BALL-1人(ren)B淋巴細(xi)胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終(zhong)止消化，再輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加入培養(yang)液(ye)終(zhong)

止消化，輕輕吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍存管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期保存。使(shi)用(yong)程序

降溫盒(he)可直(zhi)接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以隨貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主。將含有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在 37℃水浴中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入含適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿中(zhong)，加入約8 mL培(pei)養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。        

    b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液(ye)浸(jin)潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基終止消化。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。        

     c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基的(de)新(xin)皿中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數(shu)。

     b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量加入無血清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好標識(shi)。將凍(dong)存管放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌儲存。記(ji)錄凍(dong)存管位置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿取。  

公司正(zheng)在出(chu)售的(de)產(chan)品：

LRRC23： LRRC23蛋(dan)白抗體(ti) TPO Others Human 人(ren) Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

大(da)鼠腸(chang)微(wei)血管細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)酸去(qu)飽(bao)和酶(mei)1(FADS1)ELISA試劑(ji)盒(he) Avidin/AP 堿性(xing)0酸酶(mei)標記(ji)親合素(su) 0.1ml

LRRC39： LRRC39蛋(dan)白抗體(ti) SGC-7901, 人(ren)胃(wei)腺癌細(xi)胞(bao)系(xi) 腎上(shang)腺皮(pi)質(zhi)瘤細(xi)胞(bao),SW 13細(xi)胞(bao) TT(人(ren)甲狀腺癌細(xi)胞(bao))

TIMP1 Others Rat 大(da)鼠 TIMP-1 / TIMP1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠脂(zhi)肪(fang)酸合(he)酶(mei)(FASN)ELISA試劑(ji)盒(he) Goat Anti-human IgA/AP 堿性(xing)0酸酶(mei)標記(ji)羊抗人(ren)IgA 0.1ml

LC3： 自(zi)噬微(wei)管(guan)相關(guan)蛋(dan)白輕(qing)鏈3抗體(ti) 大(da)鼠肝(gan)癌細(xi)胞(bao);RH-35

QSG-7701(人(ren)正(zheng)常(chang)肝細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)抗胰島(dao)素(su)受體抗體(ti)(AIRA)ELISA 試(shi)劑盒(he) AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單(dan)0酸(suan)活化蛋(dan)白激酶(mei)β1抗原(yuan) 0.5mg

HMGB1： 高遷(qian)移(yi)率(lv)族(zu)蛋(dan)白B1抗體(ti) IGFBP5 Others Canine 狗(gou) IGFBP5 / IGFBP-5 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

原(yuan)代(dai)上皮(pi)細(xi)胞(bao)特(te)制無(wu)血清添(tian)加劑Many types of cells包裝(zhuang)：1ml 人(ren)抗(AT)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) MMP-1 基質金(jin)屬蛋(dan)白酶(mei)-1 0.5mg

HO-2： 血紅素(su)氧合(he)酶(mei)2抗體(ti) 犬源細(xi)胞(bao) 成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)，L929細(xi)胞(bao) RCBBF細(xi)胞(bao)，兔角膜(mo)後基質層(ceng)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞(bao)

BST2 Others Human 人(ren) TETHERIN / BST2 / CD317 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 人(ren)抗眼(yan)肌抗體(ti)(EMAb)ELISA 試(shi)劑盒(he) MMP-2 基質金(jin)屬蛋(dan)白酶(mei)-2(多(duo)肽(tai)抗原(yuan)) 0.5mg

BALL-1人(ren)B淋巴細(xi)胞(bao)白(bai)血病(bing)細(xi)胞(bao)人(ren)肺(fei)間充(chong)質(zhi)幹細(xi)胞(bao)(肺(fei))(HPMSC)(5×105) U251人(ren)膠質(zhi)瘤細(xi)胞(bao) Human 大(da)鼠甲(jia)狀腺素(su)(T4)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) TPO-Ab(Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody)  人(ren)抗甲(jia)狀腺過(guo)氧化物酶(mei)抗體(ti) 人(ren)臍動(dong)脈平滑(hua)肌細(xi)胞(bao)cDNAHUASMC cDNA

TNFSF10 Protein Human 重組人(ren) TNFSF10 / AIL / APO-2L / CD253 蛋(dan)白 大(da)鼠甲(jia)狀腺素(su)(T4)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes)  小鼠(shu)遊(you)離狀腺原(yuan)酸 96T

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751)： 0酸化血小板(ban)源性(xing)生長(chang)因(yin)子(zi)受體-B抗體(ti) HA Others H5N1 甲(jia)型流(liu)感(gan) H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

HCC1937 人(ren)癌細(xi)胞(bao) 大(da)鼠甲(jia)狀腺球(qiu)蛋(dan)白(TG)ELISA試(shi)劑盒(he) CRH  大(da)鼠促腎上(shang)皮(pi)質激素(su)釋(shi)放激素(su) 96T

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)： 0酸化血小板(ban)源性(xing)生長(chang)因(yin)子(zi)受體-B抗體(ti) V79細(xi)胞(bao)，中(zhong)國倉(cang)鼠(shu)肺(fei)細(xi)胞(bao) 人(ren)肺(fei)癌亞歷(li)山大(da)細(xi)胞(bao)系(xi),PLC/PRF/5細(xi)胞(bao) 膀胱(guang)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象 發生請(qing)及時(shi)和我們聯系(xi)。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血清比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片，是正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便於和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時(shi)和我們聯系(xi)，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能再用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。