Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)無(wu)甘(gan)油(you)

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商品(pin)屬性(xing)

描述(shu)：與Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合(he)酶(mei)大片(pian)段相比，Bst 3.0 DNA聚(ju)合酶具(ju)有(you)更佳(jia)的(de)等溫(wen)擴增活性(xing)和(he)更強的(de)逆(ni)轉(zhuan)錄活性(xing)。無(wu)論(lun)以(yi)DNA還(hai)是(shi)RNA為(wei)模(mo)板，該(gai)酶都(dou)具(ju)有(you)5’-3’的(de)DNA聚(ju)合(he)酶(mei)活性(xing)和(he)強烈(lie)的(de)鏈置換活性(xing)，但(dan)該(gai)酶5’-3’和(he)3’-5’的(de)外(wai)切酶活性(xing)缺(que)失(shi)。
在以(yi)RNA為模板的(de)LAMP實(shi)驗中(zhong)，可實(shi)現單酶系(xi)統(tong)反(fan)應。該(gai)酶在60-65°C之(zhi)間具(ju)有(you)很好的(de)反(fan)轉(zhuan)錄活性(xing)，可有(you)效(xiao)解(jie)決具(ju)有(you)二(er)級復(fu)雜結(jie)構的(de)RNA模(mo)板的(de)反(fan)轉(zhuan)錄，而(er)Bst 2.0 DNA 聚合(he)酶(mei)和(he)Bst DNA 聚合酶(mei)大片(pian)段無(wu)此(ci)活性(xing)。

單(dan)位定義(yi)：
壹個活力單位即(ji)在 65°C 條(tiao)件(jian)下(xia)，30 分(fen)鐘內(nei)催化 10 nmoldNTP 的(de)摻(chan)入(ru)反(fan)應成為(wei)酸(suan)不溶(rong)性(xing)物質所需(xu)的(de)酶(mei)量。
儲(chu)存(cun)：-20℃ 可保存(cun) 3 年(nian)。
典(dian)型(xing)的(de) LAMP 反(fan)應
1. 按以(yi)下(xia)組(zu)分(fen)配(pei)制 LAMP 反(fan)應液Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失(shi)活。
使用(yong)註(zhu)意(yi)事(shi)項：
(1) Mg2+的(de)使(shi)用(yong)濃度(du)為 4~10 mM 濃度(du)，Isothermo Buffer中(zhong)沒有(you) Mg2+，通常(chang)情況下(xia)，在 6-8 mM Mg2+條(tiao)件(jian)下(xia)可獲得(de)較(jiao)好的(de) LAMP 結(jie)果(guo)。
(2) 有(you)文獻報(bao)道加入(ru) Tte Uvrd 解(jie)旋酶(mei)可改(gai)善 LAMP 的(de)效(xiao)果。
(3) 使用(yong)無(wu)模(mo)板 DNA 作為(wei)對照檢測擴(kuo)增的(de)特(te)異(yi)性(xing)。

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