Bst 4.0 SYBR Green Bead

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

商(shang)品(pin)屬(shu)性(xing)

該(gai)制品(pin)為全(quan)體(ti)系凍幹微球制品(pin)，內(nei)含恒溫擴(kuo)增(zeng)所用的反應(ying)緩沖液、SYBR Green 熒(ying)光染(ran)料(liao)、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合(he)酶(mei)等，使(shi)用時只需要加入引物(wu)、模(mo)板(ban)即(ji)可進行核酸(suan)恒(heng)溫擴(kuo)增(zeng)。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶(mei)具(ju)有依賴於 RNA 模(mo)板(ban)的聚(ju)合酶(mei)活(huo)性(xing)（逆(ni)轉(zhuan)錄），還具(ju)有依賴於 DNA 的聚(ju)合酶(mei)活(huo)性(xing)，因此無論 DNA 或 RNA 樣(yang)本均可使(shi)用該制(zhi)品(pin)進行恒溫(wen)擴(kuo)增(zeng)。該制品(pin)是進行 LAMP 及(ji)RT-LAMP 擴(kuo)增(zeng)反應(ying)的試(shi)劑。
SYBR Green 系列產(chan)品(pin)為實時熒(ying)光檢(jian)測的專(zhuan)用試劑(ji)，可直(zhi)接(jie)在(zai)恒溫熒(ying)光儀(yi)或定(ding)量 PCR 以上進行 LAMP 反應(ying)擴(kuo)增(zeng)。
儲(chu)存(cun)：-20℃保(bao)存(cun) 2 年；室溫（25℃）保存(cun)>6 個(ge)月。
使(shi)用凍幹微球進行全(quan)擴(kuo)增(zeng)體系用品(pin)的制(zhi)備方(fang)法：將優(you)化的擴(kuo)增(zeng)引物(wu)分(fen)裝(zhuang)於 0.2 ml EP 管(guan)底(di)部，於(yu) 70-80℃條(tiao)件烘(hong)幹1-2h。烘(hong)幹後的 0.2 ml EP 管(guan)已經(jing)含有幹燥(zao)的擴(kuo)增(zeng)引物(wu)，再(zai)加入壹粒(li)凍幹微球即可制備(bei)成(cheng)全(quan)擴(kuo)增(zeng)體系幹燥(zao)品(pin)，該(gai)幹燥(zao)品(pin)無(wu)需冷鏈運輸(shu)，可長期(qi)保存(cun)。
反應(ying)體系說明(ming)：每(mei)壹個(ge)凍幹微球為按(an)照 25 μl 反應(ying)體系建立(li)，在(zai)使(shi)用時只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或(huo)模板(ban)即(ji)可進行反應(ying)。
使(shi)用實例，進行 LAMP 熒(ying)光擴(kuo)增(zeng)
1. 配制熒(ying)光 LAMP 反應(ying)體系在(zai) 0.2 ml EP 反應(ying)管(guan)中(zhong)加入下(xia)述試(shi)劑(ji)
Bst 4.0 SG Bead 1 粒(li)
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模板(ban) DNA/RNA X μl
ddH2O 到液體總量 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃(nong)度：FIP/BIP 分別為 16 μM、LoopF/B 分(fen)別為 4-8 μM、F3/B3 分(fen)別為 2 μM。
2. 反應(ying)體系配好(hao)後，置於熒(ying)光定(ding)量 PCR 儀(yi)中(zhong)於 65°C進行反應(ying) 15~30min。1min 收集壹次(ci)熒(ying)光信號(hao)。讀取(qu)擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)進行陰性(xing)和(he)陽性(xing)判讀。
3. 根(gen)據(ju)熒(ying)光擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)判讀陽性(xing)和(he)陰性(xing)。
註(zhu)意(yi)事項(xiang)：
（1）關於(yu)礦(kuang)物(wu)油(you)的使(shi)用，在(zai)配制完(wan) LAMP 反應(ying)體系後，可加入壹滴礦(kuang)物(wu)油(you)覆蓋於(yu)反應(ying)液上部，可以有效(xiao)的減少氣(qi)溶膠(jiao)的汙(wu)染(ran)。實驗證明(ming)礦(kuang)物(wu)油(you)並不影響機(ji)器(qi)的熒(ying)光數(shu)值讀(du)取(qu)。
（2）關於(yu)擴(kuo)增(zeng)曲線(xian)的異(yi)常：由於 LAMP 擴(kuo)增(zeng)速度較(jiao)快(kuai)，熒(ying)光信號(hao)讀取(qu)可能(neng)存在(zai)矯(jiao)正計(ji)算問題(ti)，這與(yu)熒(ying)光設備的軟件算法有管(guan)。在(zai)有些熒(ying)光 PCR 儀(yi)上，在(zai)相對熒(ying)光模(mo)式下(xia)，表(biao)現出(chu)曲(qu)線(xian)飛峰、終(zhong)點(dian)曲線(xian)下降(jiang)的問(wen)題(ti)。此時(shi)調(tiao)整到原始(shi)熒(ying)光值(zhi)模式下(xia)觀察結(jie)果，或(huo)致電(dian)相應(ying)設備供(gong)應(ying)商(shang)進行咨詢(xun)。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：