Bst 4.0 Basic Mix(with UDG)

公司(si)產品(pin)僅供(gong)科(ke)研研究使(shi)用、不得用於臨床(chuang)診(zhen)斷！

商品屬性(xing)

該(gai)制品為雙組(zu)分的(de)試(shi)劑(ji)，Basic Buffer Mix 包(bao)含了(le)反(fan)應(ying)緩(huan)沖(chong)液(ye)、Mg2+、dU/A/C/GTP(不含(han) dTTP)、凍幹(gan)賦形(xing)劑(ji)，酶(mei) Mix 包(bao)含 Bst 4.0 DNA/RNA 聚合(he)酶(mei)、熱(re)敏(min) UDG。得益於(yu) Bst 4.0 識(shi)別(bie) dUTP 底(di)物(wu)，反(fan)應(ying)底(di)物(wu)中(zhong)不包(bao)含dTTP，因此(ci)擴(kuo)增(zeng)產物(wu)均為 dUTP 產物(wu)，在配(pei)合(he)熱(re)敏(min) UDG的(de)情況下(xia)，實現(xian)防汙(wu)染性(xing)能。在(zai)實際(ji)測(ce)試中(zhong)，含有(you) 10e5Copies 的(de)汙(wu)染物的(de)條件(jian)下(xia)，抑制汙(wu)染擴增(zeng)。本(ben)制(zhi)品(pin)尤其適用於開(kai)蓋(gai)的(de) LAMP 反(fan)應(ying)（如(ru)試(shi)紙(zhi)條檢測(ce)）、密(mi)封(feng)腔體(ti)（汙(wu)染風險較高）的(de)檢(jian)測(ce)試(shi)驗（如定(ding)量(liang) PCR腔體(ti)）。
試(shi)劑(ji)使(shi)用特點：
（1）Basic Buffer Mix 中(zhong)不含(han)染料(liao)，可(ke)自行(xing)添加 SYBR Green、Eva Green 等(deng)染料(liao)進行熒(ying)光(guang)檢測(ce)。
（2）本(ben)試(shi)劑(ji)適(shi)用於開(kai)蓋(gai)檢(jian)測(ce)如核酸(suan)試(shi)紙(zhi)條檢測(ce)。
（3）試劑(ji)中(zhong)含有(you)凍(dong)幹賦形(xing)劑(ji)，試(shi)劑(ji)可(ke)直接(jie)凍幹，無需再優化凍幹配(pei)方(fang)。

儲存：-20℃保存 1 年(nian)；-80℃保存 2 年(nian)；短(duan)期(qi)使用放置於(yu)2-8℃，保存 1 個(ge)月(yue)。反(fan)復(fu)凍融(rong) 10 次，不影(ying)響使用。如有(you)白(bai)色沈(chen)澱(dian)，於(yu) 37℃水浴(yu)放置 10min 後(hou)溶(rong)解沈(chen)澱(dian)，不(bu)影(ying)響(xiang)使用。
使用方法(fa)：
1. 配(pei)制 LAMP 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
模(mo)板(ban) DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
10xLAMP Primer Mix 濃(nong)度：FIP/BIP 分(fen)別(bie)為 16 μM、LoopF/B 分別(bie)為 4~8 μM、F3/B3 分別(bie)為 2 μM。
註(zhu)意：如(ru)何應(ying)用核酸(suan)試(shi)紙(zhi)條進行(xing)特異性(xing)檢(jian)測，可(ke)來(lai)信(xin)咨(zi)詢(xun)。
2. 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)配(pei)好後，室(shi)溫(wen)（25-37°C）放置 2min，以(yi)消(xiao)化去除潛在的(de)核(he)酸(suan)汙(wu)染，隨後置於(yu) 65°C 進行反(fan)應(ying)15~30min。
試(shi)劑(ji)凍(dong)幹(gan)策(ce)略（有凍(dong)幹經(jing)驗(yan)人員(yuan)操(cao)作(zuo)）：
1. 配(pei)制(zhi) LAMP 凍幹(gan)體系
2.5xBst4.0 Basic BufferMix 10 μl
25xBst4.0/UDG Enzyme 1 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
ddH2O 到(dao)體(ti)積 1.5 μl
凍(dong)幹(gan)總體積 15 μl
2. 體(ti)系(xi)配(pei)制(zhi)完(wan)畢(bi)後(hou)，加入(ru) 0.2 ml EP 管(guan)進(jin)行(xing)上機(ji)凍幹(gan)。該試(shi)劑(ji)的(de)凍(dong)幹(gan)體(ti)積為 15 μl， 檢測(ce)反(fan)應(ying)體(ti)積(ji)為 25 μl。

特別(bie)說(shuo)明(ming)：
（1）本(ben)試(shi)劑(ji)防(fang)汙(wu)染原理為：熱(re)敏(min) UDG 消(xiao)化去除含(han)有(you) dUTP的(de)擴(kuo)增(zeng)產物(wu)，熱(re)敏(min) UDG 在(zai)隨(sui)後(hou) 50℃以(yi)上迅(xun)速(su)失(shi)活，並(bing)不影(ying)響(xiang)後(hou)續 LAMP 擴增(zeng)。因此(ci)，本(ben)試(shi)劑(ji)無(wu)法(fa)去(qu)除采用 dTTP擴增(zeng)的(de)汙(wu)染物，也不能消(xiao)化天然(ran)的(de)核(he)酸(suan)底(di)物(wu)（DNA/RNA）。為避免(mian)擴增(zeng)氣溶(rong)膠汙染，實驗(yan)室應(ying)長(chang)期(qi)使(shi)用本(ben)試(shi)劑(ji)進(jin)行(xing)實驗(yan)，壹旦(dan)使用 dTTP 試劑(ji)擴(kuo)增(zeng)後，造成實驗(yan)室汙(wu)染，采用本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)會(hui)消(xiao)除假(jia)陽性(xing)擴(kuo)增(zeng)。
（2）本(ben)試(shi)劑(ji)適(shi)用基於(yu) OG 染料(liao)變(bian)色法(fa)、SYBR Green 法(fa)、基於(yu) Biotin/FAM 探針的(de)核(he)酸(suan)膠體金法(fa)（ 具(ju)有膠體金法(fa)特(te)異性(xing)使(shi)用策略(lve)，如需技術支持，請來(lai)信(xin)咨(zi)詢(xun)）。本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)支持 HNB、pH 顯(xian)色(se)法(fa)。其(qi)它使用策略(lve)自行優化調整。
（3）基於(yu)本(ben)試(shi)劑(ji)， 提(ti)供(gong)凍(dong)幹制備(bei)服務(wu)。八(ba)聯管起訂(ding)量(liang) 480T，凍幹(gan)球(qiu)起訂(ding)量(liang) 2000T。

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