MS1小(xiao)鼠胰島(dao)內皮(pi)細(xi)胞

公司產品(pin)僅供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷！

二(er)、細(xi)胞培(pei)養(yang)操作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供參(can)考，具(ju)體(ti)操作步驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的凍(dong)存管在(zai) 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混合均勻。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液加入含適(shi)量(liang)培養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶中培養(yang)過夜（或將細(xi)胞懸(xuan)液加入10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換液並(bing)檢(jian)查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄去培養(yang)上(shang)清，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使消(xiao)化液浸潤所有(you)細(xi)胞，將培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻。        

     c、將細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶中，置於(yu)培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細(xi)胞生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計(ji)數。

     b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液，使細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管放入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存管位置以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取。  

三、培養(yang)註意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先觀察細(xi)胞瓶是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請及時和我們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了(le)解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清比例(li)、所需 細(xi)胞因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條件不(bu)壹致(zhi)而(er)導(dao)致細(xi)胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞瓶表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由於(yu)溫度(du) 變(bian)化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常現象(xiang)。觀察好細(xi)胞狀態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於(yu)培養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶用(yong)相同條件的培(pei)養(yang)基用於(yu)細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀態(tai)，便於(yu)和我司(si)技術部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及時(shi)和我們(men)聯系(xi)，告知細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我(wo)們(men)的技術人員跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液培養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用按照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

小(xiao)鼠(shu)卵(luan)巢上(shang)皮細(xi)胞培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠(shu)嗜酸(suan)性粒(li)細(xi)胞陽(yang)離(li)子(zi)蛋(dan)白(ECP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) TAP  大鼠(shu)原激活肽 96T

NR2E3： 核受(shou)體蛋(dan)白NR2E3抗體 EL4. IL-2細(xi)胞，淋(lin)巴瘤細(xi)胞 人(ren)結腸癌細(xi)胞,Loo細(xi)胞 CM-H037人(ren)結腸平滑肌細(xi)胞培(pei)養(yang)基100mL

EGFR Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) EGFR / HER1 / ErbB1 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)嗜酸(suan)性粒(li)細(xi)胞過氧(yang)化物(wu)酶(EPO)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) CFH  大鼠(shu)補體(ti)因子(zi)H 96T

NEK8： 絲(si)酸(suan)/蘇(su)酸蛋(dan)白激酶NEK8抗體 間充質(zhi)幹細(xi)胞培(pei)養(yang)基MSCM-sf

F98大鼠(shu)腦膠(jiao)質(zhi)瘤細(xi)胞 F98 rat glioma cells DMEM+10%FBS 大鼠(shu)嗜酸(suan)細(xi)胞陽(yang)離(li)子(zi)蛋(dan)白(ECP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) FAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis)  人(ren)雕(diao)亡相(xiang)關(guan)因(yin)子(zi) 96T

IGSF3： 免疫球(qiu)蛋(dan)白超家(jia)族(zu)成員3抗(kang)體(ti) 獼猴皮(pi)膚(fu)細(xi)胞;MMS4 人(ren)軟組織纖(xian)維瘤細(xi)胞，TE 115.T細(xi)胞 Eca-109(食(shi)管癌細(xi)胞)

IL20RB Others Rat 大鼠(shu) IL20RB 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人(ren)α-內肽(α-EP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基質(zhi)結合(he)區(qu)結合(he)蛋(dan)白1抗原 0.5mg

IGSF6： 免疫球(qiu)蛋(dan)白超家(jia)族(zu)成員6抗(kang)體(ti) SV40轉(zhuan)化的(de)非洲綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞;COS-7

B16-Fo細(xi)胞，鼠(shu)黑(hei)色素瘤細(xi)胞系(xi) WI-38(胚肺細(xi)胞) 人(ren)晶體上(shang)皮細(xi)胞永生系;SRA01/04(HLE) 人α橫(heng)紋肌肌動(dong)蛋(dan)白(α-SCA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) SCF (Stem Cell Factor) 幹細(xi)胞生長(chang)因子(zi)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IGSF9： 免疫球(qiu)蛋(dan)白超家(jia)族(zu)成員9抗(kang)體(ti) CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

MS1小(xiao)鼠(shu)胰島(dao)內皮(pi)細(xi)胞RPLP0： 酸(suan)性核糖(tang)體(ti)0蛋(dan)白大亞(ya)基P0抗體(ti) 非(fei)洲綠(lv)猴腎(shen)細(xi)胞系(xi)/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A

表(biao)達(da)小鼠(shu)MHCⅠ類(lei)分(fen)子(zi)Kb的(de)人(ren)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞;293KB 人(ren)輸尿(niao)管(guan)上(shang)皮細(xi)胞培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠(shu)白細(xi)胞介(jie)素24(IL24)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PLC(Human Phospholipase C)  人(ren)0酯(zhi)酶C 96T

RanBP3： RAN結(jie)合(he)蛋(dan)白3抗體 HuH-7人肝(gan)癌細(xi)胞

mOPC, 小(xiao)鼠(shu)少(shao)突膠質(zhi)前體細(xi)胞 大鼠(shu)白細(xi)胞介(jie)素2(IL-2)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Tyk-2(Human tyrosine kinase2)  人(ren)酪(lao)酸(suan)激酶2 96T

RNF35： 環(huan)指(zhi)蛋(dan)白35抗體 CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))