VERO E6非(fei)洲綠猴(hou)腎(shen)細胞

公(gong)司(si)產品(pin)僅供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床診斷！

1、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓後(hou)加入 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹打細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進行分瓶(ping)傳代，最後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓後(hou)加入培(pei)養(yang)液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞使(shi)之脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮中(zhong)進行長期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接放(fang)入-80℃。

壹(yi)、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體操(cao)作步驟以隨貨產品(pin)說明書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖晃解(jie)凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有細胞懸(xuan)液(ye)加入含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞密度(du)。

2) 細胞傳代：如果(guo)細胞密度(du)達 80%-90%，即可(ke)進行傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所有細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情況而定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大部分變圓並(bing)脫落，迅速拿(na)回操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生長狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進行細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無(wu)血(xue)清細胞凍存液(ye)，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻(yun)，每支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

Rhesus antibody Rh GPRIN2 G蛋白調節誘導(dao)神(shen)經(jing)突(tu)增生蛋白2抗(kang)體 FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

豹貓(mao)肺成(cheng)纖(xian)維樣細胞;LCL4 大鼠酶原顆(ke)粒(li)膜(mo)糖蛋白(GP2)ELISA試劑盒(he) TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen)  人組(zu)織(zhi)多肽(tai)抗(kang)原 96T

OTC： 鳥(niao)酸基甲酰(xian)轉移酶抗(kang)體 中(zhong)國(guo)倉鼠卵巢(chao)細胞(亞系克隆(long));CHO-HCV-E2

人支(zhi)氣(qi)管上(shang)皮細胞(HBEpiC)(5×105 ) 細胞名稱 種(zhong)屬(shu) 大(da)鼠酶(CAT)ELISA試劑(ji)盒 Human lung cancer Marker  人肺癌標誌(zhi)物(wu) 96T

OS9： OS-9蛋白抗(kang)體 人惡(e)性黑(hei)色素(su)瘤(liu)細胞;A-375 [A375]

KCNC4： 離子(zi)通(tong)道蛋白Kv3.4抗(kang)體 人絨(rong)毛(mao)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細胞 Sars蛋白表(biao)達株(zhu)，293001B細胞 NCI-H520 [H520](人肺癌細胞)

CLMP Others Rat 大(da)鼠 ASAM / CLMP 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 雞(ji)免(mian)疫核(he)糖核酸(Irna)ELISA 試劑盒 IL-17(Interleukin-17)human 白介素(su)-17抗(kang)原(人) 0.5mg

KCNC3/Kv3.3： 離子(zi)通(tong)道蛋白Kv3.3抗(kang)體 EB病毒(du)轉(zhuan)化(hua)的(de)人B淋巴(ba)細胞;KMY0905

CMT93細胞，小(xiao)鼠結(jie)腸(chang)癌細胞 NCL-H460(非(fei)小(xiao)細胞肺癌) 水(shui)牛(niu)皮膚成(cheng)纖(xian)維樣細胞;WB-S4 雞(ji)卵黃(huang)高0蛋酸肽(tai)(PPP)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Insulin (from porcine pancreas) 胰(yi)島(dao)素(su) 1mg

KDM4B： 組(zu)蛋白去甲基(ji)化(hua)酶(mei)JMJD2B抗(kang)體 BSG Others Mouse 小(xiao)鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

VERO E6非(fei)洲綠猴(hou)腎(shen)細胞人小(xiao)腦(nao)顆(ke)粒(li)細胞HCGC 大鼠c-Jun基末端(duan)激酶(mei)(JNK)ELISA試(shi)劑盒(he) PT(Human Prothrombin0  人原(yuan) 96T

Syncytin 1： 合胞素(su)1抗(kang)體 BT-549(人管(guan)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

人神(shen)經(jing)母細胞瘤(liu)細胞;SH-SY5Y 人牙(ya)周膜(mo)成(cheng)纖(xian)維細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠c-jun ELISA試劑盒(he) CFD(Human complement factor D)  人補(bu)體因子(zi)D 96T

SDCCAG16： 結(jie)腸(chang)癌抗(kang)原16抗(kang)體 CL-0013A2780(人卵巢(chao)癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

A549, 人肺癌細胞系 大鼠c-fos ELISA試劑盒(he) pFN(Human Plasma fibronectin)  人血(xue)漿纖(xian)維連接蛋白 96T

三(san)、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞瓶(ping)是否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否(fou)有漏液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時(shi)和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guan)信息(xi)，如細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出現(xian)問題(ti)，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題，部分細胞由於溫度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以消化(hua)，懸(xuan)浮細胞直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照片，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和我司(si)技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於運輸(shu)的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感(gan)細胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系，告知(zhi)細胞 的(de)具體情況(kuang)，以便我們(men)的(de)技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直至問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。