OKT11小鼠(shu)雜交瘤（抗(kang)CD2）細胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操作步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜）。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣、鎂離子的PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而(er)定），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養基的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良好時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據細胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。

三、培(pei)養註意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好，培(pei)養液(ye)是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生請及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如細胞(bao)形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確保細(xi)胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹致，若由於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問題，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面，顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因運(yun)輸問(wen)題，部分細胞(bao)由於溫度(du) 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新的培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客戶收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸的原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩定(ding)的情況，請(qing)及時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術人員跟蹤(zong)回訪直(zhi)至問題(ti)解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配制的培(pei)養基來培(pei)養細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公司正在出(chu)售(shou)的產品(pin)：

CM-R020大(da)鼠(shu)上(shang)皮(pi)細胞(bao)培(pei)養基100mL 大(da)鼠(shu)去(qu)乙酰化(hua)饑餓(e)激(ji)素(dGHRL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PI3K(Mouse Phosphotylinosital 3 kinase)  小鼠(shu)0酸肌(ji)醇(chun)3激(ji)酶 96T

phospho-NIFK (Thr238)： 0酸化(hua)NIFK抗(kang)體(ti) 大(da)鼠(shu)骨肉(rou)瘤細胞(bao);UMR-106

人脈(mai)絡(luo)絲成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao) (HCPF)( 5×105 ) HUVEC, 人臍靜(jing)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao) Caco-2，人結(jie)直(zhi)腸腺癌(ai)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)去(qu)甲(NE)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MUC5B(Human mucin-5 subtype B)  人粘(zhan)蛋白(bai)/粘(zhan)液(ye)素5B 96T

phospho-NIFK (Thr230)： 0酸(suan)化(hua)NIFK抗(kang)體(ti) 兔(tu)角(jiao)膜(mo)後(hou)基質(zhi)層成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao);RCBBF

IL17A Protein Marmoset 重(zhong)組絨(rong)猴(hou) IL17 / IL17A 蛋(dan)白(bai) 大(da)鼠(shu)去(qu)甲(NE)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ITF(Human Intestinal trefoil factor)  人腸(chang)三葉因子 96T

Rabbit Anti-IgG heavy chain constant region： 兔抗(kang)人γ-鏈(lian) 0.1ml

Rhesus antibody Rh CK6 細(xi)胞(bao)角(jiao)蛋白(bai)6抗(kang)體(ti) 肝(gan)動脈(mai)內(nei)皮細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml)

CSF3R Protein Human 重組(zu)人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋(dan)白(bai) (Fc 標簽) 人5,10亞(ya)甲基四氫(qing)還(hai)原酶(MTHFR)ELISA試(shi)劑(ji)盒 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗(kang)原 0.5mg

IGSF9B： 免疫球蛋(dan)白(bai)超(chao)家(jia)族(zu)成(cheng)員B抗(kang)體(ti) DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

人大(da)隱靜(jing)脈(mai)內(nei)皮細胞(bao)培(pei)養基 100mL 人4羥基壬烯(xi)酸(4-HNE)ELISA試(shi)劑(ji)盒 DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(ti)(抗(kang)原) 0.5mg

OKT11小鼠(shu)雜交瘤（抗(kang)CD2）細胞(bao)Repetin： 中(zhong)間(jian)絲相關蛋白(bai)抗(kang)體(ti) 人支(zhi)氣(qi)管(guan)上(shang)皮(pi)樣細胞(bao);BEAS-2B

CL-00063T3-L1(小鼠(shu)胚胎(tai)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)癌(ai)胚抗(kang)原(CEA)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1)  人基質(zhi)金屬(shu)蛋白(bai)酶1 96T

RNF86： 環(huan)指(zhi)蛋白(bai)86 0.2ml

Rhesus antibody Rh MMRN1/ECM 內(nei)皮細胞(bao)MMRN1蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

造(zao)骨細(xi)胞(bao)生長(chang)添(tian)加(jia)物(wu)ObGS 大(da)鼠(shu)癌(ai)標誌(zhi)物(wu)-CA153ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3)  人FMS樣(yang)酪(lao)酸(suan)激(ji)酶3 96T