MA-104恒河(he)猴(hou)腎(shen)細胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供(gong)科研(yan)研究使(shi)用、不(bu)得用於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進(jin)行長期(qi)保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒(he)可(ke)直接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混合(he)均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化液浸(jin)潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情況(kuang)而定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消化(hua)情況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回操作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的新皿中或(huo)者瓶中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計數。

b、根(gen)據細胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記(ji)錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

IKB alpha： 核因(yin)子(zi)κB抑(yi)制蛋白(bai)α抗體(ti) 腎(shen)成纖維細胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

NCI-N87 [N87]人胃癌(ai)細胞(bao) NCI-N87 human gasic cancer cells [N87] RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠尿(niao)卟啉原脫(tuo)羧酶(UROD)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MPF(Human maturation promoting factor)  人成熟促進(jin)因(yin)子(zi) 96T

Phospho-NFKB p65(Ser276)： 0酸化細胞(bao)核因(yin)子(zi)NF-κB p65抗體(ti) FCN1 Others Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照)

非洲綠猴(hou)腎(shen)細胞(bao)系(xi)/HCV-E1;Vero-HCV-E1 大(da)鼠鳥酸基甲酰轉移酶(OCT)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MC Ab  大(da)鼠黑色素細胞(bao)抗體(ti) 中國(guo)倉鼠卵(luan)巢細胞(bao)-二(er)氫(qing)還(hai)原酶(mei)缺(que)陷型;CHO/dhFr-

人外(wai)殼(ke)細胞(bao)(HHorSC)( 5×105 ) CSC, 小鼠心肌細胞(bao) Mouse 大(da)鼠黏著斑蛋(dan)白(VCL)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ASGPR(Human asialoglyco protein receptor)  人去(qu)唾(tuo)液(ye)酸糖蛋(dan)白受(shou)體(ti) 96T

Lysyl tRNA synthetase： 賴酸tRNA的連(lian)接酶(mei)抗體(ti) 人胎盤絨膜(mo)癌細胞(bao);BeWo

BC-020(人癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠子細胞(bao);U14 牛(niu)腹(fu)瀉病(bing)毒(du)(DV)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Amyloid protein precursor 澱(dian)粉(fen)樣肽(tai)前(qian)體(ti)蛋白(bai)(多(duo)肽(tai)抗原) 0.5mg

Kidins220： 220kDa蛋白激(ji)酶(mei)D相(xiang)互(hu)作用蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 人絨毛膜毛細血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)

EFNA5 Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biao)簽(qian))(Fc 標(biao)簽) 牛(niu)副(fu)流感(gan)病(bing)毒(du)III,PIV-III,ELISA試(shi)劑(ji)盒 ACTH(1-39) 促腎(shen)上(shang)腺(xian)皮質(zhi)激素(1-39) 0.1mg

phospho-Kidins220 (Ser918)： 0酸化220kDa蛋(dan)白激(ji)酶(mei)D相(xiang)互(hu)作用蛋(dan)白(bai)抗體(ti) USP46 Others Human 人 USP46 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照)

MA-104恒河(he)猴(hou)腎(shen)細胞(bao)S100A7： S100鈣結(jie)合(he)蛋(dan)白A7抗體(ti) L129細胞(bao)，NCTC克隆(long)929細胞(bao) 人Butt`s淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞(bao),Raji細胞(bao) 小鼠小膠質(zhi)細胞(bao);BV2

MICA Others Human 人 MICA 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 大(da)鼠S100鈣結(jie)合(he)蛋(dan)白(S100)ELISA試(shi)劑(ji)盒 LXA4(Human Lipoxin A4)  人脂(zhi)氧(yang)素A4 96T

stabilin1： 淋巴管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao)和血管(guan)內皮細胞(bao)受體(ti)1抗體(ti) 小香豬皮(pi)膚(fu)細胞(bao);SSC-S2

CM-R051大(da)鼠子宮(gong)頸(jing)上(shang)皮(pi)細胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL 大(da)鼠S100蛋白(S-100)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PR3-ANCA(Human proteinase-antineutrophil cytoplasmic antibody)  人蛋(dan)白(bai)酶(mei)3特(te)異(yi)性(xing)抗中性(xing)粒(li)細胞(bao)胞(bao)質抗體(ti) HA Others H5N1 甲型流(liu)感(gan) H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照)

大(da)鼠腦脊(ji)神經元(yuan)RN-r 大(da)鼠S100蛋白(S-100)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 Beta-LPH(Human Beta-lipotropic hormone)  人β-促脂(zhi)素 96T

三、培(pei)養(yang)註意事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察細胞(bao)瓶是否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是否有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時和我們聯系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態、所(suo)用培(pei)養(yang)基、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若由於培(pei)養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細胞(bao)瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細胞(bao)由於溫(wen)度 變化及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成碎片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接(jie)混勻收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基用於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞(bao)照片(pian)，記錄細胞(bao)狀態，便(bian)於和我司技術部溝通(tong) 交(jiao)流。由於運輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩定的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我們聯系(xi)，告知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們的技術人員跟蹤回訪直(zhi)至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新配制的培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。