更(geng)新(xin)時間(jian):2025-11-30
NCI-H23人(ren)非小細胞肺癌(ai)細胞說(shuo)明書現貨(huo)供應(ying),質量(liang)有(you)保(bao)證(zheng)、*、實驗(yan)效果好(hao),我司為您(nin)提供免費代測(ce)服(fu)務,同時(shi)提供價(jia)格、說(shuo)明書、規(gui)格(ge)、用(yong)途、實驗(yan)原理(li)等相關操作(zuo)說(shuo)明,咨詢選購!
NCI-H23人(ren)非小細胞肺癌(ai)細胞說(shuo)明書售(shou)後服(fu)務:
產(chan)品(pin)在運(yun)輸(shu)的過程(cheng)中,細胞培養瓶中(zhong)的貼壁(bi)細胞有(you)可(ke)能從瓶(ping)壁(bi)中(zhong)脫(tuo)落下來,因(yin)此(ci)客戶(hu)在收(shou)到貨(huo)以後的*時間(jian)是(shi)要先(xian)觀(guan)察產(chan)品(pin)的狀況,顯微(wei)鏡下觀察會出現細胞懸(xuan)浮(fu)的情況(kuang),出現此(ci)狀態(tai)時(shi),請不要(yao)立(li)即(ji)打開(kai)培養瓶,應(ying)立(li)即(ji)將培養瓶置(zhi)於細胞培養箱過夜(ye),並(bing)於次日在顯微(wei)鏡下觀察,此(ci)時多數(shu)細胞會重新(xin)貼附(fu)於(yu)瓶(ping)壁(bi)。如果發(fa)現細胞仍不能貼(tie)壁(bi),請(qing)試(shi)著(zhe)用(yong)臺(tai)盼藍染色法(fa)鑒(jian)定細胞活(huo)力(li),如臺(tai)盼藍染色證(zheng)實細胞活(huo)力(li)正常(chang)請按懸(xuan)浮(fu)細胞的方法(fa)處(chu)理;如若(ruo)證(zheng)實細胞無(wu)活(huo)力(li),請在收(shou)到貨(huo)後48小時內(nei)將(jiang)細胞狀態(tai)反(fan)饋給我公(gong)司,我們(men)將盡(jin)快幫助(zhu)解決。
NCI-H23人(ren)非小細胞肺癌(ai)細胞說(shuo)明書細胞種(zhong)類(lei):
運(yun)輸(shu)和保(bao)存(cun):
視(shi)天氣(qi)狀況和運輸(shu)距離(li)遠(yuan)近,公(gong)司與(yu)客戶(hu)協商(shang)後選擇(ze)下述方(fang)式(shi)中(zhong)的壹種(zhong)進行(xing)。
1)1mL凍存(cun)細胞懸(xuan)液(ye)裝(zhuang)於(yu)1.8ml的凍存(cun)管中(zhong),置(zhi)於(yu)裝滿(man)幹(gan)冰(bing)的泡沫保溫盒中進(jin)行(xing)運(yun)輸(shu);收(shou)到細胞後請盡快解凍復(fu)蘇(su)細胞進行(xing)培養,如無(wu)法立(li)刻(ke)進行復蘇操(cao)作,凍存(cun)細胞可在-80℃的條件(jian)下保存(cun)1個(ge)月。
2)T-25培養瓶充滿(man)*培養基(ji)後進行常(chang)溫運輸(shu);收(shou)到細胞後請鏡下觀察細胞生長(chang)狀態(tai),如鋪瓶(ping)率(lv)超(chao)過(guo)85%請(qing)立(li)即(ji)進行(xing)傳(chuan)代操(cao)作(zuo),如懸(xuan)浮(fu)的細胞較(jiao)多,請(qing)將培養瓶至於培養箱中靜(jing)置(zhi)過夜(ye)以幫助(zhu)未(wei)死(si)亡的懸(xuan)NCI-H23人(ren)非小細胞肺癌(ai)細胞說(shuo)明書浮(fu)細胞能夠(gou)再次(ci)貼壁(bi)。
壹(yi).培養基(ji)及培養凍存(cun)條(tiao)件(jian)準備(bei):
1)準(zhun)備RPMI-1640培養基(ji)(RPMI-1640:GIBCO,貨(huo)號21875-091),90%;優質(zhi)胎(tai)牛(niu)血(xue)清,10%。
2)培養條件(jian): 氣(qi)相:空氣(qi),95%;二氧化(hua)碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕(shi)度為(wei)70%-80%。
3)凍(dong)存(cun)液(ye):90%血(xue)清,10%DMSO,現用(yong)現配(pei),液(ye)氮(dan)儲(chu)存(cun)。
二(er).細胞處理(li):
1)復蘇(su)細胞:將含(han)有(you)1mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍存(cun)管迅(xun)速(su)放(fang)入37℃水浴(yu)中(zhong)(水面(mian)要(yao)低(di)於(yu)凍存(cun)管蓋部(bu))搖(yao)晃(huang)解凍,移入事先(xian)準(zhun)備好的含(han)有(you)4mL培養基(ji)的15ml離(li)心(xin)管中(zhong)混(hun)合(he)均勻(yun)。在1000RPM條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4分鐘,棄(qi)去上清液(ye),加(jia)入1mL培養基(ji)後吹勻(yun)。然後將所有(you)細胞懸(xuan)液(ye)移入含(han)有(you)5ml培養基(ji)的培養瓶中(zhong)培養過夜(ye)。第二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞密度(du)。
2)細胞傳代:如果細胞密度(du)達(da)80%-90%,即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。
對於(yu)懸(xuan)浮(fu)細胞,傳代可(ke)參(can)考(kao)以下方法(fa):
方(fang)法壹(yi):收(shou)集細胞,1000RPM,常(chang)溫條件(jian)下離(li)心(xin)5分鐘,棄(qi)去上清液(ye),補加(jia)1-2mL培養液後吹勻(yun),將細胞懸(xuan)液(ye)按1:2到1:5的比例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8ml培養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中。
方(fang)法二(er):可(ke)選擇(ze)半(ban)數換(huan)液方式(shi),棄(qi)去半(ban)數培養基(ji)後,將剩余細胞懸(xuan)起(qi),將細胞懸(xuan)液(ye)按1:2到1:3的比例(li)分到(dao)新(xin)的含(han)8ml培養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中。
3)細胞凍存(cun):待(dai)細胞生長(chang)狀態(tai)良(liang)好時,可(ke)進行(xing)細胞凍存(cun)。懸(xuan)浮(fu)細胞凍存(cun)時(shi),應(ying)將細胞收(shou)集,1000RPM,常(chang)溫條件(jian)下離(li)心(xin)5分鐘,少(shao)量(liang)保存(cun)上(shang)清液(ye)(防止(zhi)細胞吸走(zou)),加(jia)入部(bu)分新(xin)鮮培養基(ji),吹打(da)均勻(yun)後,加(jia)入到凍(dong)存(cun)管中(zhong),在凍(dong)存(cun)管中(zhong)加(jia)入10%DMSO搖(yao)勻(yun)後進行凍存(cun)。
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