更(geng)新時間(jian):2025-11-29
轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉(yu)米品系98140核(he)酸檢測試劑(ji)盒(he)公司(si)相關產(chan)品MG-63 成骨(gu)肉(rou)瘤細胞2'-甲(jia)氧基尿(niao)苷2’-OMe Uridine>98%,BRSK-MES-1肺鱗癌細胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBSTES. Na;2-[(三(san)(羥甲(jia)基(ji))甲(jia)基(ji))氨基(ji)]-1-乙磺(huang)酸鈉(na)TES >99%,AREPO Protein
訂購信息(xi):
產(chan)品名(ming)稱:轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉(yu)米品系98140核酸檢測試劑(ji)盒(he)
規格:48T 0.2PCR管
編(bian)號:BH-P97084
分(fen)類(lei):PCR-熒光探(tan)針(zhen)法(fa)
儲(chu)存條(tiao)件(jian):-20℃避光保存,避免反(fan)復凍(dong)融(rong)。
運輸:低溫、避光,快(kuai)遞(di)免費(fei)送(song)貨上(shang)門。
產(chan)品特(te)點:
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing):與(yu)其(qi)他病毒無交叉(cha)反應,無非特(te)異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng);
◇高(gao)靈(ling)敏(min)度(du):檢測靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝(bei);
◇操作簡(jian)便:該(gai)系列(lie)所(suo)有(you)試劑(ji)均(jun)采(cai)用(yong)相同的體(ti)系和條件(jian),可同時進(jin)行多個檢測;
◇高(gao)通量(liang):多(duo)種(zhong)雙重PCR檢測以及(ji)三(san)重PCR檢測試劑(ji)盒(he)。

準備(bei)物品:
清(qing)理液(ye)(A) 毫升(sheng)
染(ran)色(se)液(ye)(t B) 微(wei)升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液(ye)(C) 毫升(sheng)
溶(rong)解液(ye)(tD) 毫升(sheng)
產(chan)品說(shuo)明書 1份
使用及(ji)效(xiao)果(guo):
PCR反應特(te)點
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強(qiang)
PCR反應(ying)的(de)特(te)異(yi)性(xing)決(jue)定因(yin)素(su)為(wei):
①引物與(yu)模(mo)板DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的結(jie)合;
②堿基(ji)配對(dui)原則;
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成反應(ying)的忠實性(xing);
④靶(ba)基(ji)因(yin)的(de)特(te)異(yi)性(xing)與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引物與(yu)模(mo)板的(de)正(zheng)確結合是(shi)關鍵。引物與(yu)模(mo)板的(de)結合及(ji)引物鏈(lian)的(de)延(yan)伸是(shi)遵(zun)循堿(jian)基(ji)配對(dui)原則的(de)。聚(ju)合酶(mei)合成反應(ying)的忠實性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐(nai)高(gao)溫性(xing),使反應中(zhong)模(mo)板與(yu)引物的(de)結(jie)合(復性(xing))可以在(zai)較高(gao)的溫(wen)度(du)下進行,結合的(de)特(te)異(yi)性(xing)大(da)大(da)增加,被擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段(duan)也(ye)就能(neng)保(bao)持(chi)很高(gao)的正(zheng)確度(du)。再(zai)通過(guo)選擇特(te)異(yi)性(xing)和保守(shou)性(xing)高(gao)的靶(ba)基(ji)因(yin)區(qu),其(qi)特(te)異(yi)性(xing)程度(du)就更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)
PCR產(chan)物的(de)生(sheng)成量(liang)是(shi)以指數(shu)方(fang)式增(zeng)加的(de),能(neng)將皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級(ji)的起(qi)始待測模(mo)板擴(kuo)增(zeng)到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水平。能(neng)從(cong)100萬(wan)個細胞中(zhong)檢出壹個靶(ba)細胞;在病毒的(de)檢測中(zhong),PCR的靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)達(da)3個RFU(空斑形成單(dan)位);在細菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢出率(lv)為(wei)3個細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速(su)
PCR反應(ying)用耐(nai)高(gao)溫的(de)Taq DNA聚(ju)合酶(mei),壹次性(xing)地(di)將反(fan)應(ying)液(ye)加(jia)好後(hou),即在DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和水浴(yu)鍋(guo)上(shang)進行變性(xing)-退火-延(yan)伸反應(ying),壹般在(zai)2~4 小時完(wan)成擴(kuo)增(zeng)反(fan)應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產(chan)物壹般用(yong)電泳(yong)分(fen)析,不壹定要用同位素(su),無放(fang)射(she)性(xing)汙染、易推(tui)廣(guang)。
(4) 對(dui)標本(ben)的(de)純度(du)要求低
不需(xu)要分(fen)離病毒或細菌(jun)及(ji)培(pei)養細胞,DNA 粗(cu)制(zhi)品及(ji)總(zong)RNA均可作(zuo)為(wei)擴(kuo)增(zeng)模(mo)板。可(ke)直(zhi)接用(yong)臨(lin)床標(biao)本(ben)如血液(ye)、體(ti)腔液(ye)、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發(fa)、細胞、活PCR技術(shu)概(gai)論(lun)。
CL-0171NIH/3T3(小鼠胚(pei)胎細胞)5×106cells/瓶(ping)×2溴化(hua)新斯(si)的(de)明()Neostigmine bromide>98%,
癌細胞;MDA-MB-468 大(da)鼠小腦(nao)顆粒細胞*培養基 100mL木(mu)蘭(lan)脂(zhi)素(su)MagnolinHPLC≥98%,
Pcc4 小鼠畸(ji)胎瘤細胞RacanisodamineHPLC≥98%,
SIRPG Others Human SIRPG / CD172g 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 磺(huang)胺間(jian)二甲(jia)氧嘧鈉Sulfadimethoxine salt>98%
新(xin)生(sheng)兒(er)表(biao)皮(pi)角(jiao)化(hua)細胞Many types of cells(1ml)磺(huang)胺間(jian)二甲(jia)氧嘧鈉()Sulfadimethoxine salt>98%,
巨(ju)細胞白血病細胞株;Mo7e 大(da)鼠卵巢上(shang)皮(pi)細胞*培養基 100mL-內(nei)酰胺美(mei)國進(jin)口Gabapentin-lactam
H22 小鼠肝(gan)癌細胞相關化(hua)合物B美(mei)國進口Gabapentin Related Compound B
ERBB2 Others Rat 大(da)鼠 ErbB2 / HER2 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 相(xiang)關化(hua)合物E美(mei)國進口Gabapentin Related Compound E
小鼠肉(rou)瘤(liu)瘤株;S180相(xiang)關化(hua)合物D美(mei)國進口Gabapentin Related Compound D
KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 己(ji)酰胺(>98.0%(N))>98.0%(N)Hex*
轉(zhuan)基(ji)因(yin)玉(yu)米品系98140核酸檢測試劑(ji)盒(he)EDAR Others Human EDAR / DL 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) xyleolOrangetetrawo7iumsalt兒(er)價分(fen)桔(ju)黃(huang)四鈉5克(ke)高(gao)
肺成纖維(wei)細胞裂解(jie)物HPFL聯本(ben)安;隊二(er)安基聯本(ben);4,4′-二安基聯本(ben) Bqnzidinq;p-DicMinodiphqnyl;p,p′-Bicnilinq 9-87-2
CXADR Others Human CXADR / CAR 細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) Di-n-octylamine二(er)辛基胺100毫(hao)克(ke)BR,98%
BNL CL.2 小鼠胚(pei)胎肝(gan)細胞AMPHOTERICINB,SOLUBILIZED可溶(rong)性(xing)兩(liang)性(xing)黴(mei)素(su)B組(zu)織培(pei)養級(ji)1GCOLD
CL-0134KU812(外周(zhou)血嗜堿性(xing)白血病細胞)5×106cells/瓶(ping)×2(噻唑(zuo)藍(lan))
檢測步(bu)驟(zhou):
壹、 試劑(ji)的(de)準備(bei)
從(cong)試劑(ji)盒(he)中(zhong)取出熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應(ying)液(ye)(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合物(Enzymes MIX),冰(bing)上(shang)融(rong)化(hua)並(bing)振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)後(hou),10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所(suo)需(xu)要的PCR反(fan)應(ying)管管數為(wei)N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1管陰性(xing)對(dui)照(zhao)+1管陽性(xing)對(dui)照(zhao)),每(mei)個測試反(fan)應體系配(pei)制(zhi)如下表(biao):
試劑(ji) 每(mei)個反應加入的量(liang) N個反應加入的量(liang)
熒(ying)光PCR反應(ying)液(ye) 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
(1) 計算(suan)好各試劑(ji)的(de)使用量(liang),加(jia)入壹適當體積(ji)潔(jie)凈(jing)離心(xin)管中(zhong),充分(fen)混(hun)勻(yun),10000rpm離心(xin)10s,向(xiang)設定的N個PCR反應管中(zhong)分(fen)別加入15μL熒光(guang)PCR反(fan)應液(ye),向(xiang)每(mei)管中(zhong)加入處(chu)理(li)後(hou)樣品或陰性(xing)對(dui)照(zhao)(NTC)和陽性(xing)對(dui)照(zhao)(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離(li)心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件(jian)
將各反應管放(fang)入定量(liang)PCR儀器的(de)反應槽(cao)內。
循環條(tiao)件(jian):
1循環 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸時收(shou)集(ji)熒(ying)光信號。報(bao)告基(ji)團(tuan):設置為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基團:NONE,請(qing)勿(wu)選擇ROX參(can)比(bi)熒光(guang)。