豚(tun)鼠(shu)組胺(an)elisa試劑盒說(shuo)明(ming)書

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豚(tun)鼠(shu)組(zu)胺(an)elisa試劑盒說(shuo)明(ming)書      抗(kang)體：壹(yi)抗(kang)、二(er)抗(kang)、進(jin)口(kou)原(yuan)裝(zhuang)抗(kang)體、進(jin)口(kou)分裝(zhuang)抗體、單(dan)克(ke)隆抗體、多(duo)克隆抗體、單(dan)標抗(kang)體、雙(shuang)標抗(kang)體、多(duo)標抗(kang)體；免(mian)疫組(zu)化抗體、免(mian)疫細(xi)胞(bao)化學(xue)抗體、免(mian)疫熒(ying)光抗(kang)體、流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)抗體。抗體：壹(yi)抗(kang)、二(er)抗(kang)、進(jin)口(kou)原(yuan)裝(zhuang)抗(kang)體、進(jin)口(kou)分裝(zhuang)抗體、單(dan)克(ke)隆抗體、多(duo)克隆抗體、單(dan)標抗(kang)體、雙(shuang)標抗(kang)體、多(duo)標抗(kang)體；免(mian)疫組(zu)化抗體、免(mian)疫細(xi)胞(bao)化學(xue)抗體、免(mian)疫熒(ying)光抗(kang)體、流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)抗體。
     動物血(xue)清：內皮(pi)細(xi)胞(bao)血(xue)清、GIBCO胎牛(niu)清、HyClone。動物血(xue)清：內皮(pi)細(xi)胞(bao)血(xue)清、GIBCO胎牛(niu)清、HyClone。
     細(xi)胞(bao)：*細(xi)胞(bao)、正常(chang)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐藥(yao)細(xi)胞(bao)。細(xi)胞(bao)：*細(xi)胞(bao)、正常(chang)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐藥(yao)細(xi)胞(bao)。
註意(yi)事項(xiang)
1.試劑盒從(cong)冷藏環境中(zhong)取(qu)出應(ying)在(zai)室(shi)溫平(ping)衡 15-30 分(fen)鐘後(hou)方可(ke)使用(yong)，酶(mei)標包(bao)被(bei)板開封後如(ru)未(wei)用(yong)完，板條(tiao)應裝(zhuang)入密封袋(dai)中(zhong)保(bao)存。
2.濃洗滌液可(ke)能(neng)會有結晶(jing)析(xi)出，稀(xi)釋(shi)時可(ke)在(zai)水(shui)浴中(zhong)加溫助(zhu)溶，洗滌時不(bu)影響(xiang)結果(guo)。
3.各(ge)步加樣(yang)均(jun)應(ying)使用(yong)加樣(yang)器(qi)，並(bing)經常校(xiao)對其準(zhun)確(que)性(xing)，以(yi)避(bi)免(mian)試驗(yan)誤(wu)差。壹(yi)次加樣(yang)時間控制在 5 分(fen)鐘內(nei)，如標本(ben)數(shu)量(liang)多(duo)，使用(yong)排槍加樣(yang)。
4.請(qing)每(mei)次測定的同時做(zuo)標準(zhun)曲(qu)線，做(zuo)復(fu)孔(kong)。如(ru)標本(ben)中(zhong)待(dai)測物(wu)質(zhi)含(han)量(liang)過(guo)高(gao)（樣(yang)本(ben)OD 值大(da)於標準(zhun)品(pin)孔*孔的OD 值），請(qing)先用(yong)樣品(pin)稀釋液稀釋壹(yi)定倍數(shu)（n 倍）後再測(ce)定，計(ji)算時請後乘以(yi)總(zong)稀釋倍數(shu)（×n×5）。
豚鼠(shu)組(zu)胺(an)elisa試劑盒說(shuo)明(ming)書 5.封板膜(mo)只(zhi)限壹(yi)次性使用(yong)，以(yi)避(bi)免(mian)交(jiao)叉汙染。
6.底物(wu)請避(bi)光保(bao)存。
7.嚴格按照說(shuo)明(ming)書的操作進(jin)行，試驗(yan)結果(guo)判定必(bi)須(xu)以(yi)酶(mei)標儀讀數(shu)為準(zhun).
8.所(suo)有樣(yang)品(pin)，洗滌液和各(ge)種廢棄(qi)物都(dou)應(ying)按(an)傳染物處(chu)理(li)。
操(cao)作(zuo)步驟
1.標準(zhun)品(pin)的稀釋：本(ben)試劑盒提(ti)供(gong)原(yuan)倍標準(zhun)品(pin)壹(yi)支(zhi)，用(yong)戶可(ke)按(an)照下列圖表在小(xiao)試(shi)管(guan)中(zhong)進(jin)行稀釋(shi)。
2.加樣(yang)：分(fen)別(bie)設(she)空白(bai)孔(kong)（空白對照(zhao)孔不(bu)加樣(yang)品(pin)及(ji)酶(mei)標試(shi)劑，其余各(ge)步操(cao)作(zuo)相同(tong)）、標準(zhun)孔(kong)、待測樣品(pin)孔。在酶(mei)標包(bao)被(bei)板上標準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加樣(yang) 50µl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔中(zhong)先(xian)加樣(yang)品(pin)稀釋液 40µl，然後再加待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin) 10µl（樣品(pin)終(zhong)稀(xi)釋(shi)度(du)為 5 倍）。加樣(yang)將(jiang)樣品(pin)加於酶(mei)標板孔(kong)底部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃動混勻(yun)。
3.溫育：用(yong)封板膜(mo)封板後(hou)置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配(pei)液：將(jiang) 30 倍濃縮洗滌液用(yong)蒸餾水(shui) 30 倍稀釋後(hou)備(bei)用(yong)
5.洗滌：小心(xin)揭(jie)掉(diao)封板膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩(shuai)幹，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒後(hou)棄(qi)去，如(ru)此(ci)重復(fu) 5 次，拍幹。
6.加酶(mei)：每孔加入(ru)酶(mei)標試(shi)劑 50µl，空(kong)白(bai)孔除(chu)外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯(xian)色(se)：每(mei)孔先(xian)加入(ru)顯(xian)色(se)劑 A50µl，再加入(ru)顯(xian)色(se)劑 B50µl，輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光顯(xian)色(se)
15 分(fen)鐘.
10.終(zhong)止：每孔加終(zhong)止液 50µl，終(zhong)止反應（此(ci)時藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se)）。
11.測(ce)定：以(yi)空(kong)白(bai)空調零(ling)，450nm 波(bo)長(chang)依序測量(liang)各(ge)孔的吸(xi)光度(du)（OD 值）。 測(ce)定應在(zai)加終(zhong)止液後 15 分(fen)鐘以(yi)內(nei)進(jin)行。
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