Beta-TC-6小(xiao)鼠胰(yi)島素瘤胰(yi)島Beta細(xi)胞

公司產品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按 1:2 比例(li)進行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養(yang)箱中培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生長至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中的培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞壹次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之脫落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放置於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫盒可(ke)直(zhi)接(jie)放入-80℃。

壹、商(shang)品介紹：

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養(yang)凍存處理僅(jin)供參(can)考，具體(ti)操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速搖晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液(ye)加入含(han)適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養過(guo)夜）。第(di)二(er)天換液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸潤(run)所(suo)有(you)細胞，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而定），然(ran)後在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫落，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養(yang)基的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍(dong)存：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集細胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根據細胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的產品：

IGFBP5 Protein Cynomolgus 重(zhong)組(zu)食(shi)蟹猴(hou) IGFBP5 / IGFBP-5 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 大鼠再(zai)生基因蛋(dan)白(bai)1a(REG-1a)ELISA試(shi)劑盒 Rabbit Anti-/Gold 金標(biao)記兔(tu)抗 (10nm/15nm) 0.5ml

LMCD1： 轉(zhuan)錄因(yin)子LMCD1抗(kang)體 GM2A Others Human 人 GM2A 桿狀(zhuang)病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

大(da)鼠卵(luan)巢(chao)成(cheng)纖維細(xi)胞培(pei)養(yang)基 100mL 大鼠載(zai)脂蛋(dan)白H(Apo-H)ELISA試(shi)劑盒 Avidin/Gold 金標(biao)記親(qin)合(he)素(10nm/15nm) 0.5ml

Ly76： 淋(lin)巴細(xi)胞抗(kang)原76抗體(ti) WM35, 人黑(hei)色(se)素瘤細(xi)胞 神(shen)經(jing)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞,M17細(xi)胞 PC-12分(fen)化(hua)(大鼠腎上腺(xian)嗜(shi)鉻細(xi)胞瘤)

PLAT Others Mouse 小(xiao)鼠 tPA / PLAT 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠載(zai)脂蛋(dan)白H(APOH)ELISA試(shi)劑盒 Protein A/Gold 金標(biao)記蛋(dan)白A(10nm/15nm) 0.5ml

HSF2 binding protein： 熱(re)休克因(yin)子2結(jie)合(he)蛋白(bai)抗體(ti) 人胚胎膀(pang)胱組(zu)織(zhi)來源細胞;CCC-HB-2

RL1(大(da)鼠肺(fei)成纖維樣(yang)細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗受(shou)體(A)ELISA 試(shi)劑盒 Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受(shou)體(ti)-α(抗(kang)原) 0.5mg

HEATR2： HEATR2蛋(dan)白抗(kang)體 NRBF2 Others Human 人 NRBF2 桿狀(zhuang)病毒-昆蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

SH-SY5Y人神經(jing)母(mu)細(xi)胞瘤細(xi)胞 SH-SY5Y human neuroblastoma cells MEM/F-12(1:1)+10%FBS 人抗Ⅲ抗(kang)體(AT-Ⅲ)ELISA 試(shi)劑盒 Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受(shou)體(ti)-β(抗(kang)原) 0.5mg

HBLD2： 鐵(tie)硫(liu)簇(cu)整合(he)同源(yuan)物(wu)2蛋白抗(kang)體(ti) 犬(quan)腎細胞系(xi)/IgR;MDCK/IgR 恒河(he)猴胚(pei)腎細胞，FRhK-4細(xi)胞 MV-1-Lu細(xi)胞，鼬(you)肺(fei)上皮細胞

Beta-TC-6小(xiao)鼠胰(yi)島素瘤胰(yi)島Beta細(xi)胞HEC-1-A 人子宮(gong)內(nei)膜(mo)腺(xian)癌(ai)細胞 大(da)鼠基(ji)質金屬(shu)蛋白(bai)酶抑制(zhi)因(yin)子2(TIMP-2)ELISA試(shi)劑盒 IgM  大鼠免(mian)疫球(qiu)蛋白(bai)M 96T

PASD5： 神(shen)經元(yuan)PAS結(jie)構域蛋白5抗體(ti) F9細(xi)胞，畸(ji)胎瘤細(xi)胞 人肺(fei)泡上皮細胞,HPAEpiC細(xi)胞 肝實質細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 ×105次(ci)方(fang)(1ml)

LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 大鼠基(ji)質金屬(shu)蛋白(bai)酶抑制(zhi)因(yin)子2(TIMP-2)ELISA 試(shi)劑盒 ES  大鼠內(nei)皮抑素 96T

TP1： 蛋(dan)白酪(lao)酸0酸酶受體TP1抗體(ti) CL-0224SW579(人甲狀(zhuang)腺(xian)鱗癌細(xi)胞 )5×106cells/瓶×2

Caki-1人腎透(tou)明(ming)細胞癌(ai)皮膚轉(zhuan)移(yi)細(xi)胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's 5A+10%FBS 大(da)鼠基(ji)質金屬(shu)蛋白(bai)酶抑制(zhi)因(yin)子1(TIMP-1)ELISA試(shi)劑盒 Human anti-Mi2-antibody  人抗Mi2抗(kang)體 THPO Others Mouse 小(xiao)鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性對照(zhao))

三(san)、培養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞瓶是否完好，培(pei)養(yang)液是否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若有(you)上述現(xian)象 發生請及時(shi)和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞相關信息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而導致細(xi)胞出現(xian)問題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞瓶表面(mian)，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題(ti)，部分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎形(xing)成碎片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀(guan)察(cha)好細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新的培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同條件(jian)的培(pei)養基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到(dao)細胞後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技術部溝通 交流。由(you)於運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的情況(kuang)，請及時和我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體情況(kuang)，以便我(wo)們的技術人員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該細胞僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞培(pei) 養(yang)條件新配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。