人(ren)白介(jie)素12elisa試(shi)劑(ji)盒(he)說明書

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人(ren)白介(jie)素12elisa試(shi)劑(ji)盒(he)說明書     抗(kang)體：壹抗(kang)、二(er)抗(kang)、進口(kou)原(yuan)裝抗(kang)體、進口(kou)分裝抗(kang)體、單克隆(long)抗(kang)體、多克隆(long)抗(kang)體、單標(biao)抗(kang)體、雙標(biao)抗(kang)體、多標(biao)抗(kang)體；免疫組化抗(kang)體、免疫細胞(bao)化(hua)學(xue)抗(kang)體、免疫熒光(guang)抗(kang)體、流(liu)式細胞(bao)抗(kang)體。抗(kang)體：壹抗(kang)、二(er)抗(kang)、進口(kou)原(yuan)裝抗(kang)體、進口(kou)分裝抗(kang)體、單克隆(long)抗(kang)體、多克隆(long)抗(kang)體、單標(biao)抗(kang)體、雙標(biao)抗(kang)體、多標(biao)抗(kang)體；免疫組化抗(kang)體、免疫細胞(bao)化(hua)學(xue)抗(kang)體、免疫熒光(guang)抗(kang)體、流(liu)式細胞(bao)抗(kang)體。
     動物血(xue)清(qing)：內(nei)皮細胞(bao)血(xue)清(qing)、GIBCO胎(tai)牛清(qing)、HyClone。動(dong)物血(xue)清(qing)：內(nei)皮細胞(bao)血(xue)清(qing)、GIBCO胎(tai)牛清(qing)、HyClone。
     細胞(bao)：*細胞(bao)、正常(chang)細胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐(nai)藥細胞(bao)。細胞(bao)：*細胞(bao)、正常(chang)細胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)、腫(zhong)瘤(liu)耐(nai)藥細胞(bao)。
註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
1.試劑(ji)盒(he)從(cong)冷藏環境(jing)中(zhong)取(qu)出應(ying)在室(shi)溫平(ping)衡 15-30 分鐘(zhong)後(hou)方可使(shi)用，酶標(biao)包被(bei)板開(kai)封後(hou)如(ru)未用完，板條應裝(zhuang)入(ru)密封袋(dai)中(zhong)保(bao)存(cun)。
2.濃(nong)洗滌液(ye)可(ke)能會(hui)有結(jie)晶析出，稀(xi)釋時可(ke)在(zai)水浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong)，洗滌時(shi)不(bu)影(ying)響(xiang)結(jie)果。
3.各步(bu)加樣(yang)均(jun)應(ying)使(shi)用加樣器(qi)，並(bing)經(jing)常(chang)校(xiao)對(dui)其準確(que)性，以(yi)避(bi)免試驗誤差。壹(yi)次加樣時(shi)間控(kong)制在(zai) 5 分鐘(zhong)人(ren)白介(jie)素12elisa試(shi)劑(ji)盒(he)說明書內(nei)，如標(biao)本數(shu)量多(duo)，使(shi)用排槍加樣。
4.請每次測定(ding)的同時(shi)做標(biao)準曲線，做復(fu)孔(kong)。如標(biao)本中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)含量過高(gao)（樣(yang)本(ben)OD 值(zhi)大(da)於標(biao)準品孔(kong)*孔(kong)的OD 值(zhi)），請先(xian)用樣品稀(xi)釋(shi)液稀釋壹(yi)定(ding)倍數(shu)（n 倍）後(hou)再(zai)測(ce)定(ding)，計(ji)算(suan)時(shi)請(qing)後(hou)乘(cheng)以(yi)總稀釋(shi)倍(bei)數（×n×5）。
5.封板膜(mo)只限壹(yi)次性使(shi)用，以(yi)避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。
6.底物(wu)請避(bi)光(guang)保存(cun)。
7.嚴(yan)格按(an)照(zhao)說明書的操(cao)作(zuo)進行(xing)，試(shi)驗結(jie)果判(pan)定(ding)必須(xu)以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀數為準(zhun).
8.所有(you)樣品，洗滌液(ye)和各種廢(fei)棄(qi)物都(dou)應(ying)按(an)傳染(ran)物處(chu)理。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟
1.標(biao)準品的稀釋(shi)：本(ben)試劑(ji)盒(he)提(ti)供(gong)原倍(bei)標(biao)準品壹(yi)支，用戶(hu)可(ke)按(an)照(zhao)下列圖表在(zai)小(xiao)試管(guan)中(zhong)進行(xing)稀(xi)釋(shi)。
2.加(jia)樣：分別設(she)空白(bai)孔（空白(bai)對(dui)照(zhao)孔不(bu)加樣(yang)品及酶標(biao)試劑(ji)，其余各步(bu)操(cao)作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶標(biao)包被(bei)板上(shang)標(biao)準品準(zhun)確(que)加(jia)樣(yang) 50µl，待(dai)測(ce)樣品孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液 40µl，然後(hou)再(zai)加(jia)待(dai)測樣品 10µl（樣(yang)品終(zhong)稀(xi)釋度(du)為(wei) 5 倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣品加(jia)於(yu)酶標(biao)板孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量不觸(chu)及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。
3.溫育：用(yong)封板膜(mo)封板後(hou)置 37℃溫育 30 分鐘(zhong)。
4.配(pei)液：將 30 倍濃(nong)縮(suo)洗滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水 30 倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)
5.洗滌：小(xiao)心揭(jie)掉封板膜(mo)，棄去液(ye)體，甩(shuai)幹，每(mei)孔加(jia)滿洗滌液(ye)，靜(jing)置 30 秒後(hou)棄(qi)去，如此重(zhong)復 5 次，拍幹。
6.加酶：每(mei)孔加入(ru)酶標(biao)試劑(ji) 50µl，空白(bai)孔除外。
7.溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同(tong) 3。
8.洗滌：操(cao)作(zuo)同(tong) 5。
9.顯色(se)：每孔(kong)先加(jia)入(ru)顯色(se)劑(ji) A50µl，再(zai)加(jia)入(ru)顯色(se)劑(ji) B50µl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻，37℃避(bi)光(guang)顯色(se)
15 分鐘(zhong).
10.終(zhong)止：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液 50µl，終(zhong)止反(fan)應（此時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉黃(huang)色(se)）。
11.測定(ding)：以(yi)空白(bai)空調(tiao)零(ling)，450nm 波長依(yi)序測量各孔的吸(xi)光(guang)度(du)（OD 值(zhi)）。 測定(ding)應在(zai)加終(zhong)止液(ye)後(hou) 15 分鐘(zhong)以(yi)內進行(xing)。
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