SDOW-17小鼠雜交瘤

公司(si)產品僅(jin)供科研研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止消(xiao)化(hua)，再輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養基(ji)重懸(xuan)，然後按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分瓶傳代，最(zui)後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液終

止消(xiao)化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移至 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後將其移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒可直接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟以(yi)隨貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書為主。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹勻(yun)。然後將所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將細胞(bao)懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液並(bing)檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳代：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代培(pei)養。

a、棄(qi)去培(pei)養上(shang)清，用不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細胞(bao)，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基(ji)終止消(xiao)化(hua)。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液後吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或者瓶中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據細胞(bao)數量(liang)加入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好標識。將凍存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記錄凍(dong)存管(guan)位置以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後首先觀(guan)察細胞(bao)瓶是否完好，培(pei)養液是否有漏液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述現象(xiang) 發生請及時和(he)我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導致細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任由 客(ke)戶(hu)自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶表面，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細胞(bao)由(you)於溫度 變(bian)化及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直接混勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的培(pei)養瓶或培(pei)養皿中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養基(ji)用於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客(ke)戶(hu)收到細胞(bao)後前 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通(tong) 交流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原因，個(ge)別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩定(ding)的情況(kuang)，請及時和(he)我們(men)聯系，告知(zhi)細胞(bao) 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不能(neng)再用來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收到細胞(bao)後第(di)壹次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正在出(chu)售(shou)的產品：

IL25 Protein Rat 重(zhong)組(zu)大(da)鼠 Ierleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽) 大(da)鼠羥脯(pu)酸(Hyp)ELISA試(shi)劑盒(he) TLa(Human thymus-leukemia antigen)  人(ren)胸腺白血(xue)病抗(kang)原 96T

phospho-NEK9(Thr210)： 0酸化(hua)絲酸/蘇(su)酸蛋白激(ji)酶(mei)NEK9抗(kang)體 CAMKV Others Human 人(ren) CAMKV 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠小梁網細胞(bao)培(pei)養基(ji) 100mL 大鼠羥脯(pu)酸(Hyp)ELISA 試(shi)劑盒(he) CIAP  大(da)鼠小腸(chang)堿性(xing)0酸酶(mei) 96T

NNF1R： 多(duo)胺(an)調控因子(zi)1抗(kang)體 SRSV/3T3細胞(bao)，SRSV轉化的3T3細胞(bao) 人(ren)胰腺(xian)癌(ai)細胞(bao),SW1990細胞(bao) CM-M032小(xiao)鼠腸(chang)靜脈內(nei)皮(pi)細胞(bao)培(pei)養基(ji)100mL

LILRB3 Others Mouse 小(xiao)鼠 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠羥甲基戊二酸單酰還(hai)原酶(HMG-CoAR)ELISA試(shi)劑盒(he) FSH(mouse follicle-stimulating hormone)  小(xiao)鼠促卵(luan)泡(pao)素 96T

人(ren)滑(hua)膜(mo)細胞(bao)培(pei)養基(ji) 100mL 人(ren)17羥皮(pi)質(zhi)類(lei)固(gu)醇(17-OHCS)ELISA 試(shi)劑盒(he) hypothetical protein (LOC55652) hypothetical protein 抗(kang)原 0.5mg

IKK alpha + IKK beta： KB抑(yi)制(zhi)蛋白激(ji)酶(mei)α/β抗(kang)體 人(ren)腦微(wei)血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞(bao) 人(ren)肺(fei)癌細胞(bao)，NCI-H520[H520]細胞(bao) SAC-IIB2(腹水(shui)瘤細胞(bao))

BST1 Others Rat 大(da)鼠 CD157 / BST1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao)) 人(ren)17β-雌二(er)醇(17β-Esadiol)ELISA試(shi)劑盒(he) HCCR-1(BRI3 binding protein) 人(ren)基因/bri3結合蛋白(抗(kang)原) 0.5mg

IL-12： 白(bai)介(jie)素12抗(kang)體 大(da)鼠腎系(xi)膜(mo)細胞(bao);RMC

CHO-pt細胞(bao)，轉血小(xiao)板(ban)基因倉鼠卵(luan)巢(chao)細胞(bao) L6(大(da)鼠成肌(ji)細胞(bao)) 615小(xiao)鼠癌瘤株;Ca761 人(ren)16α羥基(ji)雌酮(tong)1(16-α OHE-1)ELISA 試(shi)劑盒(he) pre S1/S2 protein [HBV] pre S1/pre S2(抗(kang)原) 0.5mg

SDOW-17小(xiao)鼠雜交瘤phospho-ROCK1(Thr455+Ser456)： 0酸化(hua)Rho相(xiang)關(guan)蛋白激(ji)酶(mei)1抗(kang)體 293(人(ren)胚腎細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2

EB病(bing)毒(du)轉化的人(ren)B淋(lin)巴(ba)細胞(bao);KMYF 人(ren)關節軟(ruan)骨(gu)細胞(bao)培(pei)養基(ji) 100mL 大鼠γ分泌(mi)酶(mei)(GACE)ELISA試(shi)劑盒(he) AQP-1(Human Aquaporin 1)  人(ren)水(shui)通(tong)道(dao)蛋白1 96T

RbAp48： 視網膜(mo)母細胞(bao)瘤結合蛋白P48抗(kang)體 CL-0335EB (NBL-4) (牛(niu)胚氣(qi)管(guan)細胞(bao))5×106cells/瓶×2

293A，人(ren)胚腎上(shang)皮細胞(bao)系(xi)(腺(xian)病(bing)毒(du)包(bao)裝(zhuang)級(ji)別) 大(da)鼠γ-分泌(mi)激(ji)活(huo)蛋白(γSAP)ELISA試(shi)劑盒(he) AQP-0(Human Aquaporin 0)  人(ren)水(shui)通(tong)道(dao)蛋白0 96T

RIMBP2： 神(shen)經(jing)元突(tu)觸膜(mo)結合蛋白2抗(kang)體 PROS1 Others Human 人(ren) PROS1 / Protein S 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽性對(dui)照(zhao))