TM4正(zheng)常小鼠(shu)睪(gao)丸Sertoli細(xi)胞

公(gong)司(si)產品僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變圓後(hou)加入培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹(chui)打(da)細(xi)胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞，並放置於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保存(cun)。使(shi)用(yong)程序

降(jiang)溫(wen)盒可直(zhi)接放入-80℃。

壹(yi)、商(shang)品介(jie)紹(shao)：

二、細(xi)胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培(pei)養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體操(cao)作步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並檢查(zha)細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去培養上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將培養瓶(ping)置於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情(qing)況(kuang)而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部分(fen)變圓並脫落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養液，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清(qing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做好(hao)標(biao)識。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售(shou)的(de)產品：

OAS3： 2'-5'-寡腺苷酸合(he)成酶3抗體 角(jiao)膜(mo)內(nei)皮細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(1ml)

BEL-7404人肝癌細(xi)胞 BEL-7404 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS 大鼠膜(mo)相關0脂酶A2(PLA2G2A)ELISA試(shi)劑(ji)盒 F X  大鼠凝(ning)Ⅹ 96T

OSR2： 牙(ya)齒發育(yu)相(xiang)關蛋白(bai)Osr2抗體 KIRREL Others Mouse 小鼠(shu) KIRREL1 / NEPH1 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

羊源細(xi)胞 大鼠膜(mo)鐵(tie)轉(zhuan)運蛋(dan)白(FPN)ELISA試劑(ji)盒 CGRP(Mouse calcitonin gene related peptide)  小鼠(shu)降(jiang)鈣(gai)素基(ji)因相關肽 96T

Oct-4B(OCT4B-190)NT： 胚胎(tai)幹(gan)細(xi)胞關鍵蛋(dan)白190抗體 中(zhong)國倉鼠(shu)卵(luan)巢細(xi)胞K1(亞(ya)系克隆(long));CHO-K1

KCNE1L： 離子通(tong)道蛋白家族成員(yuan)1樣(yang)蛋(dan)白抗體 PPP3CA Others Human 人(ren) PPP3CA / 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

人角(jiao)膜(mo)上皮細(xi)胞培(pei)養基(ji) 100mL 雞(ji)血清(qing)(NO)ELISA 試劑(ji)盒 FLG(filaggrin)peptide 絲(si)聚(ju)蛋白(bai)/中(zhong)間(jian)絲(si)蛋白(bai)抗原 0.5mg

KCNE2： 離子通(tong)道蛋白家族成員(yuan)2抗體 人(ren)絨毛(mao)膜(mo)毛(mao)細(xi)血管內(nei)皮細(xi)胞 人(ren)胚胎(tai)皮膚(fu)成纖(xian)維細(xi)胞，CCC-ESF-1細(xi)胞 Sol8(小鼠(shu)骨(gu)骼肌肌肉母(mu)細(xi)胞)

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 雞(ji)血管內(nei)皮細(xi)胞生(sheng)長因子(VEGF)ELISA 試劑(ji)盒 FADS1 脂肪酸去飽和酶1 1mg

KCNJ5： G蛋白激(ji)活(huo)內(nei)向通(tong)道5抗體 人(ren)成骨肉瘤(liu)細(xi)胞;Saos-2

TM4正(zheng)常小鼠(shu)睪(gao)丸Sertoli細(xi)胞CM-H083人臍動脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞培(pei)養基(ji)100mL 大鼠D-乳(ru)酸脫氫(qing)酶(D-LDH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone)  人繆(mou)勒管抑(yi)制物質(zhi)/抗繆勒管激(ji)素 96T

SLC44A1： 溶(rong)質(zhi)轉(zhuan)運蛋(dan)白家族44成員(yuan)1抗體 CST5 Others Human 人(ren) CST5 人細(xi)胞裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

人口(kou)腔角(jiao)質(zhi)細(xi)胞HOK 大鼠D-乳(ru)酸脫氫(qing)酶(D-LDH)ELISA試(shi)劑(ji)盒 BTC(Human beta cellulin)  人β細(xi)胞素 96T

SLC7A9： 離子轉(zhuan)運相(xiang)關蛋白(bai)SLC7A9抗體 BRL-3A(大鼠正(zheng)常肝(gan)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2

人癌細(xi)胞;MDA-MB-453 人(ren)角(jiao)膜(mo)成纖(xian)維細(xi)胞培(pei)養基(ji) 100mL 大鼠D-乳(ru)酸(D-LAC/D-LA)ELISA試劑(ji)盒 FETU-A(Human Fetuin A)  人胎(tai)球(qiu)蛋白(bai)A 96T

三(san)、培養註意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明(ming)書，了解(jie)細(xi)胞相(xiang)關信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需 細(xi)胞因子等，確保細(xi)胞培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細(xi)胞瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細(xi)胞由(you)於溫(wen)度(du) 變化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎(sui)形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常現(xian)象。觀(guan)察(cha)好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的(de)培養基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞培(pei)養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司技術(shu)部溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸的(de)原因，個別敏(min)感(gan)細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系，告知(zhi)細(xi)胞 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請換(huan)用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。