GL-261小鼠(shu)膠(jiao)質細(xi)胞(bao)瘤

公(gong)司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重懸，然後(hou)按 1:2 比例進行分瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶中，倒(dao)置顯微鏡(jing)下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓後(hou)加(jia)入培養液終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸液轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於(yu)凍存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液氮中進(jin)行(xing)長期(qi)保(bao)存。使用(yong)程序

降溫盒(he)可(ke)直接放入-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下細(xi)胞(bao)培養凍存處理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具體操(cao)作(zuo)步驟以(yi)隨貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴(yu)中迅速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培養基混合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養基後吹(chui)勻。然後將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培養基的培養瓶中培養過夜(ye)（或將細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第(di)二天換(huan)液(ye)並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分變(bian)圓並脫落(luo)，迅速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾下培養瓶後加(jia)2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝入無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按1:2比例分到新的含(han)8 mL培養基的新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝入無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量(liang)加入無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍存管(guan)放入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液氮灌儲存。記錄(lu)凍存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿取。

公司正在出售(shou)的產(chan)品(pin)：

大鼠(shu)表(biao)皮黑(hei)色(se)素細(xi)胞(bao)培養基 100mL 大鼠(shu)血(xue)紅素(su)結(jie)合蛋(dan)白(HPX)ELISA試劑盒(he) phytohaemagglutinin,PHA  植物(wu)血(xue)凝素(su) 96T

METTL11A： 甲(jia)基化樣(yang)蛋(dan)白11抗體 HuT78細(xi)胞(bao)，T淋(lin)巴細(xi)胞(bao)白血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao) 惡(e)性(xing)黑(hei)色(se)素瘤,A375細(xi)胞(bao) EB病(bing)毒(du)轉化的人(ren)B淋巴(ba)細(xi)胞(bao);HH-01

MS4A1 Others Human 人(ren) CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照) 大鼠(shu)血(xue)紅蛋(dan)白(Hb)ELISA試劑盒(he) ADAM9  小鼠(shu)解(jie)整(zheng)合素(su)樣(yang)金屬(shu)蛋(dan)白酶9 96T

MCC： 大腸(chang)癌(ai)突變(bian)蛋(dan)白抗體 人(ren)張氏肝細(xi)胞(bao);Chang liver

LLC-MK2恒(heng)河猴腎(shen)細(xi)胞(bao) Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)血(xue)管(guan)抑素(su)(ANG)ELISA試劑盒(he) 大鼠(shu)c-fos  大鼠(shu)c-fos 96T

HELT： 轉錄(lu)因(yin)子(zi)HELT蛋(dan)白抗體 SV40T轉化人(ren)臍靜(jing)脈內(nei)皮細(xi)胞(bao);PUMC-HUVEC-T1

JEG-3(人(ren)絨毛(mao)膜癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 食(shi)蟹(xie)猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照) 人(ren)核(he)轉錄(lu)因(yin)子(zi)(NF-kB)ELISA試劑盒(he) CGB(Chromogranin B) 嗜鉻(ge)粒素(su)B抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HES6： 轉錄(lu)因(yin)子(zi)HES6抗體 人(ren)臍靜(jing)脈內(nei)皮細(xi)胞(bao)裂解物(wu)HUVECL

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗(gou) ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽) 人(ren)核(he)因(yin)子(zi)-κB亞基p65親(qin)和(he)肽(tai)(NF-κB p65)ELISA 試劑盒(he) ChRM1(music acetylcholine receptor) 毒蕈(xun)堿型乙酰(xian)受體M1抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HMX2： 同源盒(he)蛋(dan)白H6亞型2抗體 FST Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) Follistatin / FST ( FS288 ) CHO細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照)

GL-261小(xiao)鼠膠(jiao)質細(xi)胞(bao)瘤小(xiao)鼠肝癌(ai)瘤株;H22 大鼠(shu)高(gao)香草酸(suan)(HVA)ELISA試劑盒(he) ECF  大鼠(shu)嗜(shi)酸(suan)粒細(xi)胞(bao)趨(qu)化因(yin)子(zi) 96T

Proteasome 19S S5A： 26S蛋(dan)白酶調節(jie)亞(ya)型S5a抗體 長(chang)白山豬(zhu)胚(pei)胎(tai)皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細(xi)胞(bao);201184

人(ren)胚(pei)肺(fei)成纖維細(xi)胞(bao);CCC-HPF-1 SK-N-SH, 人(ren)神經母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao) Human 大鼠(shu)高(gao)鐵(tie)血(xue)紅蛋(dan)白還原(yuan)酶(MHBR)ELISA試劑盒(he) BP(Human Bullous Pemphigoid)  人(ren)大皰(pao)性(xing)類(lei)天(tian)皰(pao)瘡(chuang)抗體 大鼠(shu)周(zhou)神經成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)RPNF

FAM3B Protein Human 重組人(ren) FAM3B 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽) 大鼠(shu)高(gao)鐵(tie)血(xue)紅蛋(dan)白(MHB)ELISA試劑盒(he) Human Enterovirus  人(ren)腸病(bing)毒(du) 96T

PGGT1A： 蛋(dan)白香葉(ye)烯(xi)基(ji)轉移酶1α抗(kang)體 CD3E & CD3G Others Human 人(ren) CD3E & CD3G Heterodimer 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽性(xing)對照)

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培養液是否有(you)漏液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞(bao)說明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養條件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由於(yu)培養條件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由(you)於溫度 變(bian)化及(ji)劇烈碰亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的培養基重懸 細(xi)胞(bao)，並接種到新的培養瓶或培養皿中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中(zhong)進行培養。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件(jian)的培養基用於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的培養基 (灌液(ye)培養基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換用(yong)按照說明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件(jian)新配(pei)制(zhi)的培養基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿。