GT1-1小鼠垂(chui)體瘤(liu)細胞(bao)

公(gong)司產(chan)品(pin)僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不得用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸，然後按 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養；

壹(yi)、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養(yang)瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將細胞(bao)凍存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將其移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期(qi)保(bao)存(cun)。使用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒可(ke)直接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作(zuo)步驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書為主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄(qi)去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹勻(yun)。然後將所有(you)細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)含(han)適量培養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培養過夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中(zhong)，使消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定），然後在顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸液按1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好時(shi)，可進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細(xi)胞(bao)培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄(qi)去上清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數量加入(ru)無(wu)血(xue)清細胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識(shi)。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

IFNA10 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 蛋白(bai) (Fc 標簽) 大鼠血(xue)管(guan)性血(xue)友(you)病因子(zi)裂解(jie)蛋白(bai)酶(mei)(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試(shi)劑(ji)盒 HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor)  人肝(gan)素(su)結合(he)性表皮生(sheng)長因子(zi) 96T

phospho-MEK3(Thr222)： 0酸(suan)化原(yuan)活化蛋白(bai)激(ji)酶(mei)激(ji)酶(mei)3抗(kang)體 IFNA4 Others Human 人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

大(da)鼠腦動脈(mai)血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠血(xue)管(guan)性血(xue)友(you)病因子(zi)抗原(yuan)(vWF:Ag)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Plant phosphatidic acid,PA  植物(wu)凝脂酸 96T

MEK5： 原(yuan)活化蛋白(bai)激(ji)酶(mei)激(ji)酶(mei)5抗(kang)體 SW-13細胞(bao)，腎(shen)上腺(xian)皮質腺癌細胞(bao) 黑色(se)素(su)瘤(liu),Bowes Melanoma細胞(bao) 人肺(fei)癌細胞(bao);A549 [A-549]

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴(hou) HER4 / ErbB4 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)血(xue)管(guan)性血(xue)友(you)病因子(zi)/瑞(rui)斯托(tuo)輔因(yin)子(VWF)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Mouse oxidizided glutathione,GSSG  小鼠氧化型(xing) 96T

Capsid protein VP1： 大(da)鼠細小病毒H-1株(H-1)抗(kang)體(ti) HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流感(gan) H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血(xue)凝素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

白(bai)鰱(lian)尾(wei)鰭細胞(bao)系;SCF 人核(he)仁形成區(qu)嗜銀蛋白(bai)(Ag-NORs)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CK18(Cytokeratin 18) 細(xi)胞(bao)角蛋白(bai)18抗原(yuan)(C端) 0.5ml

HAS1： 透(tou)明(ming)質酸合(he)成酶(mei)1抗(kang)體 人EB病毒轉化的B細(xi)胞(bao);CGM1

JeKo-1(人套(tao)細(xi)胞(bao)淋巴瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 食(shi)蟹(xie)猴(hou) / 恒河猴(hou) IL12A / NKSF1 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人核(he)基質蛋白(bai)22(NMP-22)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CK14/17/42/10 peptide 細(xi)胞(bao)角蛋白(bai)14抗原(yuan) 0.5mg

HIF3 alpha： 缺(que)氧誘(you)導因子(zi)3α/HIF-3α抗(kang)體(ti) 人前(qian)脂肪細胞(bao)-皮下裂解(jie)物(wu)HPA-s L

GT1-1小鼠垂(chui)體瘤(liu)細胞(bao)615小鼠癌瘤(liu)株;Ca759 大(da)鼠(shu)高(gao)遷(qian)移(yi)率(lv)族(zu)蛋白(bai)1(HMG-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PT(Human Pertussiu Toxin)  人百(bai)日咳毒素(su) 96T

PMCA1： 細(xi)胞(bao)膜鈣ATP酶(mei)1抗(kang)體 貂源(yuan)細胞(bao)

人胚(pei)皮膚(fu)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao);CCC-ESF-1 人肺(fei)微(wei)血(xue)管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠高(gao)敏(min)狀腺(xian)原(yuan)酸(u-T3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CD30  大(da)鼠CD30分(fen)子(zi) 96T

PMCA4： 細(xi)胞(bao)膜鈣ATP酶(mei)4抗(kang)體 大鼠顆(ke)粒(li)細(xi)胞(bao)RGC

NAMPT Protein Human 重(zhong)組(zu)人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白(bai) (His & GST 標簽) 大鼠高(gao)敏(min)狀腺(xian)原(yuan)酸(u-T3)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 C.albicans(Human Candida Albicans)  人白(bai)色念珠(zhu)菌 96T

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完好，培(pei)養液是(shi)否有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述現(xian)象 發(fa)生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系。

2. 仔細閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血(xue)清比例、所(suo)需 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦拭(shi)細胞(bao)瓶表面(mian)，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精(jing)消毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞(bao)照(zhao)片，記錄細胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和(he)我司技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不穩(wen)定的情況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我們聯系，告知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的技(ji)術人員跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。