桔梗(geng)探針法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)

特(te)點(dian)：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要(yao)提供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃保守(shou)序(xu)列設(she)計(ji)的(de)專壹(yi)性(xing)引(yin)物，與相關(guan)病毒無交叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)以達到幾百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹(yi)管式熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢(jian)測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染(ran)。
5. 本試(shi)劑盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應體系的(de)熒(ying)光定(ding)量 PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適用(yong)於科研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷。

使用(yong)方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食品樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食品(pin)衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)檢(jian)驗阪崎(qi)腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進行。
2、血液樣(yang)品(pin)：用(yong)無菌註射(she)器抽(chou)取受(shou)檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註入(ru)無菌EDTA2Na(或檸(ning)檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管，立(li)即混勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌的(de)收集(ji)管中送檢(jian)。
4、病竈部位樣(yang)品(pin)：取發病部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹(yi)、稀釋 PCR 陽性(xing)對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度(du)為(wei)例）
1. 註意：由於(yu)標準品(pin)濃度(du)非常(chang)高(gao)，因此下列稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定(ding)要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的(de)區域進行，千萬(wan)不能汙染(ran)樣(yang)品(pin)或本試(shi)劑盒的(de)其他(ta)成分(fen)）。為(wei)增加產(chan)品(pin)穩定(ding)性(xing)和避(bi)免(mian)擴(kuo)散傳染(ran)性(xing)病原，本產(chan)品(pin)不(bu)提供(gong)活(huo)體樣(yang)品(pin)做(zuo)陽性(xing)對(dui)照(zhao)，只(zhi)提供(gong)可(ke)以直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作為(wei)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
2. 標記 6 個離心(xin)管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋(shi)液(ye)（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用(yong)。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)(上步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用(yong)。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)到 5 號管中，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用(yong)。
7. 重復(fu)上面的(de)操作直(zhi)到得到 6 個稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上待用(yong)。
註：上述(shu)樣(yang)品(pin)建議經(jing)過增(zeng)菌後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物用(yong)於檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取：
可(ke)采(cai)用(yong)PCR試劑盒配(pei)備的(de)DNA抽(chou)提液，按(an)以下說(shuo)明進行DNA核酸的(de)粗提。也可(ke)采(cai)購上海澤葉(ye)生(sheng)物(wu)科技有(you)限公司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒(ying)光配(pei)套(tao))或其他(ta)合(he)適(shi)的(de)商業(ye)化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相應試劑(ji)盒說(shuo)明進行操作。
1、液體培養物：取液體培養物100μL加到1.5mL無菌離心(xin)管中，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量吸(xi)棄上清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應。
2、固(gu)體培養物：挑(tiao)取單克(ke)隆(long)菌落與(yu)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min，取上清(qing)5μL進行PCR反應。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取米粒(li)大(da)小糞便(bian)於滅菌離心(xin)管中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽水(shui)，振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離心(xin)3分(fen)鐘，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取上清(qing)5μL進行PCR反應。
4、其他(ta)液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上清(qing)，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心(xin)3min取上清(qing)5μL進行PCR反應。
註：陽性(xing)對(dui)照(zhao)和陰性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)已(yi)經抽(chou)提好的(de)核酸(無需提取)，直(zhi)接取5μL加入(ru)到反應體系中(zhong)即(ji)可(ke)。由於陽性(xing)對(dui)照(zhao)濃度(du)較(jiao)高(gao)，建議在(zai)樣(yang)品(pin)制(zhi)備區(qu)域加入(ru)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。 
實驗流程：
1. 整個檢(jian)測(ce)過(guo)程應嚴格(ge)按(an)照(zhao)本說(shuo)明書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別在(zai)試劑(ji)準(zhun)備區(qu)、樣(yang)本處理區和PCR擴增區進行操作，各區(qu)實(shi)驗服、儀(yi)器 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使用(yong)，不能(neng)混(hun)用(yong)；實驗用(yong)吸(xi)頭采(cai)用(yong)帶濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處理區應配(pei)有(you)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)，樣(yang)本處理在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中進行操作；三個區(qu)應該(gai)配(pei)有(you)紫(zi)外(wai)線(xian)殺(sha)菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降解，樣(yang)本處理過程應在(zai)0-4℃條(tiao)件下操(cao)作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗後立(li)即上機(ji)檢(jian)測(ce)；樣(yang)本處理過程中使用(yong)的(de)器具耗(hao)材(cai)應經過(guo)無核酶(mei)處理。
3. 每次實驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使用(yong)前應該(gai)在(zai)常溫(wen)下充(chong)分(fen)融化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬時(shi)離心(xin)。
5. 試劑盒內所(suo)配(pei)陰(yin)性(xing)和陽性(xing)對(dui)照(zhao)在(zai)壹(yi)次使用(yong)前應全(quan)部轉移至(zhi)標本準(zhun)備區(qu)，並(bing)單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹擾，應避(bi)免(mian)裸(luo)手直(zhi)接接觸(chu)PCR反應管，並(bing)應避(bi)免(mian)在(zai)PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀(yi)器 擴增相關(guan)參(can)數應按(an)照(zhao)本說(shuo)明書(shu)相關(guan)要(yao)求(qiu)進行設(she)置(zhi)；不(bu)同批號試劑不能混(hun)用(yong)。
8. ABI系列熒(ying)光定(ding)量PCR儀(yi)參(can)數設(she)置(zhi)中(zhong)不選(xuan)ROX校正，淬滅基因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過程中產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物應該(gai)進行無害(hai)化(hua)處理後方(fang)可(ke)丟棄。
儲(chu)存(cun)條(tiao)件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收集(ji)、處理及(ji)保(bao)存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血清(qing)：使用(yong)不含熱原和內毒素(su)的(de)試管，操作過程中避(bi)免(mian)任(ren)何細胞(bao)刺激，收集(ji)血(xue)液(ye)後，3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘將血(xue)清(qing)和紅(hong)細胞(bao)迅(xun)速(su)小心地分(fen)離。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽或肝(gan)素抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心(xin)30 分(fen)鐘取上清(qing)。
3. 細胞(bao)上清(qing)液：3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘去(qu)除顆粒(li)和聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組織勻漿：將組(zu)織加入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離心(xin)10 分(fen)鐘取上清(qing)。
5. 保存(cun)：如(ru)果(guo)樣(yang)本收集(ji)後(hou)不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請按(an)壹(yi)次用(yong)量分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)反復(fu)凍融，在(zai)室溫(wen)下解凍(dong)並(bing)確保樣(yang)品(pin)均(jun)勻地充(chong)分(fen)解凍(dong)。
Vero(非洲綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠胚胎(tai)成(cheng)纖(xian)維細胞(bao);3T3-L1硫酸小檗堿（標準品(pin)）Berberine hydrogen sulphate質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品

人小膠質(zhi)細胞(bao)裂解物(wu)HML噻(sai)嗪二酮(tong)（標準(zhun)品）Xanthiazone 質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品

CLEC7A Others Human 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 噻(sai)嗪二酮(tong)苷（標(biao)準(zhun)品）Xanthiside 質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品

人胃癌細胞(bao);MKN-45多(duo)被銀(yin)蓮(lian)花皂(zao)苷R8（標準品）Raddeaside R8質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品

小鼠胰(yi)腺癌細胞(bao)(B類(lei));Pan02 透明質(zhi)酸酶(mei)(含100mL酶(mei)解緩(huan)沖液) 10mL虎(hu)掌草皂(zao)甙D（標準品）無質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品
CN3 Others Human 人 CN3 / Coactin-3 人細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 芹菜素質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥97%,BRApigenin

大鼠骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao);IR983F芹菜素(標準品)質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標準品Apigenin

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 氧化(hua)鉍(bi)質(zhi)量規(gui)格(ge)：AR,>99%Bismuth oxide

人胰島β細胞(bao)*培(pei)養基 100mL2-氯(lv)-1,3-質(zhi)量規(gui)格(ge)：進口原裝，98%2-Chloro-1,3-propanediol

GNM細胞(bao)，上頜牙齦(yin)癌頸結轉移癌 宋(song)氏(shi)誌(zhi)賀(he)氏(shi)菌(jun) 人APP-PS1(M146L)雙(shuang)基因轉染(ran)CHO細胞(bao)株(zhu);7WML6.0富馬酸*質(zhi)量規(gui)格(ge)：>99%Bisoprolol fumarate
HEC-1-A細胞(bao)，人(ren)內膜腺癌細胞(bao) 鼠雜(za)交(jiao)骨(gu)髓(sui)瘤細胞(bao),K6H6/B5細胞(bao) 新生(sheng)兒(er)表皮(pi)角(jiao)化(hua)細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)鹽酸(suan)*質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,BRVenlaine

FC33(人胚胎(tai)腎(shen)細胞(bao)(Asp-2基因修(xiu)飾(shi))) 5×106cells/瓶(ping)×2原卟啉(lin)IX質(zhi)量規(gui)格(ge)：>95%Protoporphyrin IX

HWP subcutaneous Pellet 人類(lei)皮(pi)下白前脂肪細胞(bao)團(tuan)塊 > 1 mio.cells 人少突(tu)膠(jiao)質(zhi)前體細胞(bao)(懸(xuan)浮(fu)生(sheng)長)總RNAHOPC-os NA甲磺(huang)酸*（標(biao)準品(pin)）質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品Ropivacaine mesylate

CL-00025637(人膀胱癌細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2甲磺(huang)酸*質(zhi)量規(gui)格(ge)：>98%,BRRopivacaine mesylate

NGF Others Mouse 小鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 鹽酸(suan)*酯(zhi)質(zhi)量規(gui)格(ge)：≥653µg/mg,BRCefetamet pivoxil
桔梗(geng)探針法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)CD70 Protein Rat 重組大(da)鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋(dan)白 (His 標簽(qian))去(qu)氧膽(dan)酸(suan)鹽瓊(qiong)脂(zhi)shēng huà shì jì容量(liang)：100克

人絨毛間葉成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)(HVT)( 5×105 ) MCF-7(MCF7)(ATCC來(lai)源(yuan)), 人癌細胞(bao) Human-2.5-二羧醋(cu)97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9

人皮(pi)膚(fu)色(se)素(su)瘤細胞(bao);SK-MEL-1氧化(hua)槐(huai)果(guo)堿，英(ying)文(wen)名(ming)或英(ying)文(wen)縮(suo)寫(xie)：Oxysophocarpine，級別：BR，98%，規(gui)格(ge)：