覆(fu)盆子(zi)探(tan)針法PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)保(bao)存

特點(dian)：
1. 即開(kai)即(ji)用，用戶(hu)只(zhi)需(xu)要提供(gong)病(bing)毒(du)樣品(pin)。
2. 根據地(di)黃保(bao)守(shou)序(xu)列(lie)設計的(de)專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物(wu)，與(yu)相關病(bing)毒(du)無交(jiao)叉反應(ying)。
3. 靈敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達(da)到幾(ji)百拷貝/反應(ying)。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免後續汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試劑盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應(ying)體系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只(zhi)適用於科研，不能用於臨(lin)床診斷。

使(shi)用方法：
壹、樣品(pin)采(cai)集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培養按(an)照(zhao)樣品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微生物(wu)學檢(jian)驗(yan)阪崎(qi)腸桿(gan)菌檢(jian)驗(yan)要求進行(xing)。
2、血液樣品(pin)：用無菌註(zhu)射(she)器(qi)抽取(qu)受檢(jian)者靜(jing)脈血2mL，註(zhu)入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉(na))抗凝管(guan)，立即混(hun)勻。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取(qu)糞便置於滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發(fa)病(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲出物、粘液膿血送檢(jian)。
壹、稀釋 PCR 陽性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋度(du)為例(li)）
1. 註(zhu)意：由(you)於標準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常(chang)高(gao)，因此下(xia)列(lie)稀(xi)釋操作(zuo)壹定(ding)要在獨立的(de)區域(yu)進行(xing)，千萬不能汙(wu)染(ran)樣品(pin)或本(ben)試劑盒(he)的(de)其他(ta)成分(fen)）。為增加產(chan)品穩定(ding)性(xing)和(he)避免擴(kuo)散傳(chuan)染(ran)性(xing)病原(yuan)，本(ben)產(chan)品不提供(gong)活體樣品做(zuo)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只提(ti)供(gong)可(ke)以直(zhi)接使(shi)用的(de) DNA段(duan)作(zuo)為陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心(xin)管(guan)，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模板稀釋液（用帶(dai)芯(xin)槍頭，下(xia)同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰上(shang)待(dai)用。
5. 換槍頭，在 6 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所得)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰上(shang)待(dai)用。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)到 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰上(shang)待(dai)用。
7. 重復(fu)上(shang)面的(de)操作(zuo)直(zhi)到得到 6 個稀(xi)釋度(du)的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰上(shang)待(dai)用。
註(zhu)：上(shang)述樣(yang)品建(jian)議經過增菌(jun)後，收(shou)集培養物用於檢(jian)測(ce)。 
二(er)、DNA提取(qu)：
可采(cai)用PCR試劑(ji)盒(he)配備的(de)DNA抽提液，按(an)以下(xia)說(shuo)明進行(xing)DNA核酸的(de)粗(cu)提。也(ye)可(ke)采(cai)購(gou)上(shang)海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物(wu)科技(ji)有限(xian)公司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取(qu)試劑(ji)盒(過柱法-熒(ying)光(guang)配套)或其他(ta)合適的(de)商業(ye)化產(chan)品，並(bing)按(an)照(zhao)相應(ying)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明進行(xing)操作(zuo)。
1、液體培養物：取(qu)液體培養物100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，8000rpm離心(xin)3min，盡(jin)量吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培養物：挑取(qu)單克隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑取(qu)米(mi)粒(li)大小糞便於(yu)滅(mie)菌(jun)離心(xin)管(guan)中，加入(ru)0.5mL生理鹽(yan)水，振蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離心(xin)3分鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其他(ta)液體標本(ben)：取(qu)標本(ben)2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽性(xing)對照(zhao)和(he)陰性(xing)對照(zhao)為已(yi)經抽提好(hao)的(de)核酸(無需(xu)提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加入(ru)到反應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可。由(you)於陽(yang)性(xing)對照(zhao)濃度(du)較高，建(jian)議在樣品制備區域(yu)加入(ru)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
實驗(yan)流程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明書要求分(fen)別在試劑準(zhun)備(bei)區、樣本(ben)處(chu)理區和(he)PCR擴增區進行(xing)操作(zuo)，各區實驗(yan)服、儀器(qi) 、耗材(cai)應(ying)獨立使(shi)用，不能混(hun)用；實驗(yan)用吸(xi)頭采(cai)用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區應(ying)配有生物安(an)全櫃(gui)，樣本(ben)處(chu)理在生物安(an)全櫃(gui)中進行(xing)操作(zuo)；三(san)個區應(ying)該配有紫外線殺(sha)菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為避免RNA降(jiang)解，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且完成實(shi)驗(yan)後立即上(shang)機(ji)檢(jian)測(ce)；樣本(ben)處(chu)理過程(cheng)中(zhong)使(shi)用的(de)器具(ju)耗材(cai)應(ying)經過無(wu)核酶處(chu)理。
3. 每次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該設置陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所有試劑在使(shi)用前應(ying)該在常(chang)溫下(xia)充(chong)分(fen)融(rong)化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試劑(ji)盒(he)內(nei)所配陰性(xing)和(he)陽性(xing)對照(zhao)在壹次使(shi)用前應(ying)全部轉(zhuan)移至(zhi)標本(ben)準(zhun)備(bei)區，並(bing)單獨存放。
6. 為防(fang)止熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手直(zhi)接接觸PCR反應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避免在PCR反應(ying)管(guan)上(shang)進行(xing)任何標記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴增相關參(can)數應(ying)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明書相關要求進行(xing)設置；不同(tong)批號(hao)試(shi)劑不能混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參(can)數設置中不選ROX校正(zheng)，淬滅(mie)基因選擇None。
9. 實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)產(chan)品的(de)廢棄物應(ying)該進行(xing)無害(hai)化處(chu)理後方可(ke)丟棄。
儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或－20℃樣品(pin)收(shou)集、處(chu)理及(ji)保(bao)存方法
1. 血清(qing)：使(shi)用不含(han)熱(re)原和(he)內毒(du)素的(de)試管(guan)，操作(zuo)過程(cheng)中(zhong)避免任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收(shou)集血液後，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)將(jiang)血清(qing)和(he)紅細胞(bao)迅(xun)速小心(xin)地分(fen)離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或肝素抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒(li)和(he)聚合物(wu)。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組織(zhi)加入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗碎。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣本(ben)收(shou)集後不及(ji)時(shi)檢(jian)測(ce)，請(qing)按(an)壹次用量分裝(zhuang)，凍(dong)存於(yu)-20℃，避免反(fan)復凍融(rong)，在室溫下(xia)解凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣品均勻地(di)充(chong)分解凍(dong)。
原代軟(ruan)骨(gu)細(xi)胞(bao)特(te)制無血清(qing)添加劑(ji)Many types of cells包裝(zhuang)：1ml酰基-β-D-葡(pu)萄糖苷酸(suan)Furosemide Acyl-β-D-glucuronide質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

MSC, 小鼠(shu)雪旺(wang)細胞(bao) 小鼠(shu)逆轉(zhuan)錄(lu)病(bing)毒(du)包裝(zhuang)細(xi)胞(bao)，PT67細胞(bao) P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao))ent-加蘭(lan)他(ta)敏(min)ent-Galanthamine質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

人(ren)巨細(xi)胞(bao)白(bai)血病細胞(bao)株;Mo7e差向(xiang)-加蘭(lan)他(ta)敏(min)N氧化(hua)物(wu)Epi-galanthamine N-Oxide質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

CD200R1 Others Cymolgus 食蟹(xie)猴(hou) CD200R / OX2-R 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 加蘭(lan)他(ta)敏(min)N氧化(hua)物(wu)Galanthamine N-Oxide質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口

小鼠(shu)海馬(ma)趾(zhi)神經元MN-h加蘭(lan)他(ta)敏(min)β-D-葡(pu)萄糖苷酸(suan)Galanthamine β-D-Glucuronide質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口
CL-0189Raji(人(ren)Butt's瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2D-D-Arginine質量(liang)規(gui)格：0.98

Jurk. Clone E6-1細胞(bao)，白(bai)血病細胞(bao) 急性(xing)T細胞(bao)白(bai)血病細胞(bao),TALL-104細胞(bao) 人(ren)胰腺(xian)導(dao)管(guan)癌細(xi)胞(bao);CFPAC-1D-焦（標準(zhun)品(pin)）D-Pyroglutamic acid質量(liang)規(gui)格：HPLC法有(you)關物(wu)質檢(jian)查

AAV-293(人(ren)胚(pei)腎細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2異鼠(shu)李素-3-O-槐(huai)二(er)糖(tang)-7-O-鼠(shu)李糖(tang)苷（標準(zhun)品(pin)）Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamside質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標準(zhun)品(pin)

PVRL2 Others Human 人(ren) CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) (-)-Holostyligone(-)-Holostyligone質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標準(zhun)品(pin)

平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞(bao)生(sheng)長(chang)添加物(wu)SMCGS5-羧基-X-羅丹(dan)明5-Carboxy-X- rhodamine; 5-ROX質量(liang)規(gui)格：>97%
大額(e)牛(niu)皮膚成纖(xian)維樣細(xi)胞(bao);BOS-1山(shan)柰酚-3-O-蕓香糖(tang)苷(標準(zhun)品(pin))質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%，標準(zhun)品(pin)Kaempferol-3-O-rutiside

IL2RB Others Human 人(ren) IL2Rβ 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 鈉壹水物質量(liang)規(gui)格：>98%,BRPantoprazole

CM-H027人(ren)成纖(xian)維細胞(bao)*培養基100mL超(chao)細(xi)高嶺土(6000(3.5um))質量(liang)規(gui)格：6000(3.5um)Kaolin(superfine)

HA Others H4N8 甲(jia)型流感(gan) H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 高嶺(ling)土(tu)(醫(yi)藥(yao)級)質量(liang)規(gui)格：醫(yi)藥(yao)級Kaolin

(含(han)100mL 酶解緩沖液) 10mL矽藻(zao)土G(TLC)質量(liang)規(gui)格：TLCKieselguhr G
覆盆(pen)子(zi)探(tan)針法PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)保(bao)存BACE1 Others Mouse 小鼠(shu) BACE-1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) (R)-7-乙基質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(R)-7-Ethyl Camptothecin

人(ren)整合SV40基因的(de)上(shang)皮細(xi)胞(bao);HBL-100 [HBL100]7-乙基--d3質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口7-Ethyl-d3-camptothecin

DNASE1 Others Human 人(ren) DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) -d11質量(liang)規(gui)格：美(mei)國(guo)進口Cap