HEPA1-6小鼠(shu)肝癌細胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅供(gong)科(ke)研(yan)研究(jiu)使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培養

液終止消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培養基重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例進(jin)行分(fen)瓶傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

壹、商(shang)品(pin)介紹(shao)：

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長(chang)至覆蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入培養液終

止消(xiao)化，輕輕吹(chui)打細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉入液氮中(zhong)進(jin)行(xing)長期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞培養操作

1) 復蘇細胞：以(yi)下細胞培養凍存(cun)處(chu)理僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養基混合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養基後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有細胞懸(xuan)液加(jia)入含適(shi)量培養基的培養瓶中(zhong)培養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度達 80%-90%，即可進(jin)行傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去培養上清，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所有細胞，將(jiang)培養瓶置於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微鏡下觀察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細胞大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後加(jia)2-3ml培養基終止消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後裝入無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比例分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培養基的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細胞凍存(cun)：待細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可進(jin)行細胞凍存(cun)。下面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培養液，裝入無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞計(ji)數。

b、根據(ju)細胞數量加(jia)入無血清細胞凍存(cun)液，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註意凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下次(ci)拿(na)取。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售的(de)產(chan)品(pin)：

ENPP2 Others Human 人(ren) Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 大鼠溴脫(tuo)氧(yang)核(he)苷(gan)尿(BrdU)ELISA試(shi)劑盒(he) Human lymphocyte factor  人(ren)淋巴(ba)細胞因(yin)子(zi) 96T

MYL7： 肌球蛋(dan)白輕鏈(lian)7抗體(ti) 人(ren)牙(ya)周(zhou)膜(mo)成(cheng)纖(xian)維細胞RNAHPLR miRNA5 μg

DH82狗(gou)腎(shen)惡(e)性組(zu)織細胞增(zeng)生(sheng)癥(zheng)細胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS 大鼠溴脫(tuo)氧(yang)核(he)苷(gan)尿(BrdU)ELISA 試(shi)劑盒(he) TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2)  兔轉化生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)β2 96T

MYBPC3： 心(xin)臟(zang)肌球蛋(dan)白結合蛋(dan)白抗體(ti) ACVRL1 Others Human 人(ren) ALK-1 / ACVRL1 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照)

rRTEC, 大鼠腎(shen)小管(guan)上皮細胞 大鼠雄激(ji)素(su)受(shou)體(ti)(AR)ELISA試(shi)劑盒(he) NOS (Rabbit nitric oxide synthase)  兔合成(cheng)酶 96T

人(ren)氣(qi)管(guan)平滑(hua)肌細胞培養基 100mL 人(ren)甘(gan)露(lu)糖結(jie)合蛋(dan)白/甘露(lu)糖結(jie)合凝集(ji)素(su)(MBP/MBL)ELISA 試(shi)劑盒(he) E2F6 轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子(zi)E2F-6抗原(yuan) 0.5mg

HEMK2： Hemk甲(jia)基(ji)轉(zhuan)移酶(mei)家(jia)族(zu)2號(hao)蛋(dan)白抗體(ti) 牛(niu)陀(tuo)螺狀(zhuang)細胞;BT 雞淋巴(ba)瘤(liu)細胞，DT40細胞 Kert-3細胞，小鼠(shu)腎(shen)癌細胞

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 人(ren)甘(gan)露(lu)糖(Mannose)ELISA 試(shi)劑盒(he) E2 tag E2 tag多肽抗原(yuan) 0.5mg

HENMT1： HEN1甲(jia)基(ji)轉(zhuan)移酶(mei)同(tong)源蛋(dan)白1抗體(ti) CL-0074DLD-1(人(ren)結(jie)腸(chang)腺(xian)癌細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

OCM-1A細胞，人(ren)低(di)侵(qin)襲(xi)性脈絡(luo)膜(mo)黑(hei)色素(su)素(su)瘤(liu)細胞 綠(lv)色(se)木(mu)黴(mei) 小鼠(shu)樹突狀(zhuang)細胞肉瘤(liu)細胞;DCS 人(ren)甘(gan)露(lu)聚(ju)糖結合凝集(ji)素(su)相關(guan)絲(si)酸(suan)蛋(dan)白酶(MASP)ELISA試(shi)劑盒(he) EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠(jiao)質(zhi)細胞谷(gu)酸(suan)運(yun)載(zai)蛋(dan)白3抗原(yuan) 0.5mg

HEPA1-6小鼠(shu)肝癌細胞EPO Protein Rat 重組(zu)大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋(dan)白 (His 標簽) 大鼠鈣/鈣調(tiao)蛋(dan)白依賴(lai)性(xing)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)Ⅱγ(CAMK2γ)ELISA試(shi)劑盒(he) F-TESTO  大鼠遊(you)離(li) 96T

PDLIM3： 輔肌動(dong)蛋(dan)白相關(guan)LIM蛋(dan)白抗體(ti) CGB5 Others Human 人(ren) CGB5 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照)

MG-63 人(ren)成(cheng)骨(gu)肉瘤(liu)細胞 大鼠鈣/鈣調(tiao)蛋(dan)白依賴(lai)性(xing)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)Ⅱα(CAMK2α)ELISA試(shi)劑盒(he) HBV preS2Ag(Human hepatitis B virus)  人(ren)乙(yi)型(xing)肝炎(yan)病毒(du)前(qian)S2抗(kang)原(yuan) 96T

PROK2： 前(qian)動(dong)力(li)蛋(dan)白2抗體(ti) NCL-H548細胞，人(ren)胰(yi)腺(xian)癌細胞 人(ren)癌細胞,MDA-MB-231細胞 巨(ju)噬(shi)細胞培養基MaM

CD93 Others Human 人(ren) CD93 / C1QR1 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 大鼠富亮(liang)酸(suan)α2糖(tang)蛋(dan)白1(LRG1)ELISA試(shi)劑盒(he) HGV-IgM(Human Hepatitis G virus IgG)  人(ren)庚型(xing)肝炎(yan)病毒(du)IgM 96T

三(san)、培養註意事項 

1. 收(shou)到細胞後(hou)首(shou)先觀察細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液是(shi)否有(you)漏液、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明(ming)書(shu)，了解細胞相關(guan)信息(xi)，如(ru)細胞形態、所用(yong)培養基、血清比例、所需 細胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細胞培養條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由於培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡下觀察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由於溫(wen)度 變化及劇(ju)烈碰亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀察好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培養基重懸(xuan) 細胞，並(bing)接(jie)種到新的(de)培養瓶或(huo)培養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養基用(yong)於(yu)細胞培養。

6. 建議客(ke)戶(hu)收(shou)到細胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細胞照片，記錄細胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由於運(yun)輸的原(yuan)因(yin)，個別(bie)敏(min)感細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系，告知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至問題解決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的(de)培養基 (灌液培養基) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培養細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說明(ming)書(shu)細胞培 養條(tiao)件(jian)新配制的(de)培養基來培養細胞。     收(shou)到細胞後(hou)第(di)壹次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。