HL-1小(xiao)鼠(shu)心(xin)肌細(xi)胞(bao)

公(gong)司產品僅供科(ke)研研究(jiu)使用、不得用於臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止消化(hua)，再輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基(ji)重懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

壹、商(shang)品介紹(shao)：

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止消化(hua)，輕輕吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序

降溫盒(he)可直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供參(can)考，具體操(cao)作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產品說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培養基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含(han)適量培(pei)養基(ji)的培養瓶中(zhong)培(pei)養過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二天換液並檢(jian)查細(xi)胞(bao)密(mi)度。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，使消化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養基(ji)終止消化(hua)。輕輕打(da)勻(yun)後裝入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比例分到(dao)新的含(han)8 mL培養基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態良(liang)好時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加入(ru)無血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在出售的產品：

MLK3： 絲酸/蘇(su)酸蛋白激(ji)酶MLK3抗體 人(ren)脈絡叢成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)RNAHCPF miRNA5 μg

F81貓腎(shen)細(xi)胞(bao) F81 feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)信號(hao)傳(chuan)導轉錄激(ji)活因子3(STAT3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor)  小(xiao)鼠(shu)腦源性(xing)神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子 96T

Phospho-MLK3(Thr277 + Ser281)： 0酸化(hua)絲(si)酸/蘇(su)酸蛋白激(ji)酶MLK3抗體 FZD1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) FZD1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

人骨(gu)髓間(jian)充質幹細(xi)胞(bao)(hMSCs) 大鼠(shu)新生甲狀(zhuang)腺素(NN-T4)ELISA試(shi)劑(ji)盒 sCKR(Human soluble cytokine receptor)  人(ren)可(ke)溶(rong)性(xing)細(xi)胞(bao)因(yin)子受(shou)體 96T

MSK1： 有絲(si)分裂原和(he)應激(ji)活化(hua)型蛋白激(ji)酶1抗體 小(xiao)鼠(shu)骨髓瘤細(xi)胞(bao);P3/NSI/1-Ag4-1

SEMA5A Others Mouse 小鼠(shu) Semaphorin 5A / SEMA5A 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人(ren)分(fen)泌性(xing)白細(xi)胞(bao)蛋白酶(mei)抑(yi)制因(yin)子(SLPI)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人(ren)0酸化(hua)雌(ci)激(ji)素受(shou)體α多(duo)肽(tai)抗原 0.5mg

Phospho-HSL (Ser863)： 0酸化(hua)荷(he)爾(er)蒙敏(min)感脂肪酶抗體 CL-0042BxPC-3(人(ren)原位胰(yi)腺腺癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

C918細(xi)胞(bao)，人(ren)眼(yan)脈(mai)絡黑(hei)色素瘤細(xi)胞(bao) 糞腸(chang)球菌(高耐) 正(zheng)常(chang)小(xiao)鼠(shu)Sertoli細(xi)胞(bao);TM4 人(ren)分(fen)泌型免疫球(qiu)蛋白A(SIgA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ER- Alpha(phospho-Tyr537)peptide 0酸化(hua)雌(ci)激(ji)素受(shou)體α抗原 0.5mg

phospho-Histone H1.4(Thr18)： 0酸化(hua)組(zu)蛋白H1.4抗體 SERPINE1 Others Human 人(ren) PAI-1 / SerpinE1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

犬(quan)腎(shen)細(xi)胞(bao)系/野(ye)生型;MDCK/wild 人分泌型0脂酶A2(sPLA2)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 ER- Alpha /ER alpha peptide 雌(ci)激(ji)素受(shou)體α抗原 0.5mg

HL-1小鼠(shu)心(xin)肌細(xi)胞(bao)MOLT-4 人急(ji)性(xing)淋巴(ba)母(mu)細(xi)胞(bao)白血病細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)肺表(biao)面活性(xing)物(wu)質相關(guan)蛋白B(SP-B)ELISA試(shi)劑(ji)盒 LH  大鼠(shu)促黃(huang)體激(ji)素 96T

PGRPS： 肽(tai)聚糖(tang)識別蛋白1抗體 CCC-ESF-1細(xi)胞(bao)，人(ren)胚(pei)胎(tai)皮(pi)膚(fu)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao) 人(ren)癌(ai)細(xi)胞(bao),MDA-MB-415細(xi)胞(bao) 口(kou)腔(qiang)角(jiao)質細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)OKM

LRIG1 Others Mouse 小鼠(shu) LRIG1 / LIG-1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)肺表(biao)面活性(xing)物(wu)質相關(guan)蛋白A(SP-A)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AMA  大鼠(shu)抗心(xin)肌抗體 CM-H045人(ren)肝動脈(mai)平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)100mL

NCI-H1975人肺(fei)腺癌(ai)細(xi)胞(bao) Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)肺表(biao)面活性(xing)物(wu)質相關(guan)蛋白A(SP-A)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 TR(Human Testoterone recepter)  人(ren)受(shou)體 96T

PARP3： 多(duo)腺苷二0酸多(duo)聚(ju)酶(mei)3抗體 KLK1 Others Human 人(ren) KLK-1 / Kallikrein-1 人細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後首先觀察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完好，培養液(ye)是否(fou)有漏液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象，若有(you)上(shang)述現象 發生請及時(shi)和(he)我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血清(qing)比例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於培(pei)養條件(jian)不壹(yi)致而(er)導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題，責任(ren)由 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細(xi)胞(bao)由於溫度 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精消(xiao)毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的培養基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新的培養瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件(jian)的培養基用於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流。由於運輸(shu)的原因，個(ge)別敏(min)感細(xi)胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的情況，請及時(shi)和(he)我們聯(lian)系，告知細(xi)胞(bao) 的具體情(qing)況，以(yi)便(bian)我們的技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回訪直至問題解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供科(ke)研使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的培養基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用來培養細(xi)胞(bao)，請換用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的培養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後第壹次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。