合(he)歡皮(pi)染(ran)料法(fa)PCR鑒定試劑盒*

儲存條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處(chu)理及(ji)保存(cun)方(fang)法
1. 血(xue)清：使用不含熱(re)原(yuan)和內(nei)毒素(su)的試管(guan)，操(cao)作過程中避免任(ren)何(he)細(xi)胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液(ye)後(hou)，3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清和紅細胞(bao)迅(xun)速(su)小(xiao)心(xin)地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心(xin)30 分鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細(xi)胞上(shang)清液(ye)：3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物(wu)。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加(jia)入適(shi)量生理(li)鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保(bao)存：如(ru)果(guo)樣本(ben)收(shou)集(ji)後不及時(shi)檢測，請(qing)按壹次(ci)用(yong)量分裝，凍存於(yu)-20℃，避免反復凍融(rong)，在(zai)室溫(wen)下(xia)解凍(dong)並(bing)確(que)保樣品均勻(yun)地(di)充分解凍(dong)。

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開即用，用戶只(zhi)需要(yao)提(ti)供(gong)病(bing)毒樣品。
2. 根(gen)據地(di)黃保(bao)守(shou)序列設計(ji)的專壹性引物(wu)，與(yu)相關病(bing)毒無(wu)交叉反應。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)以達到幾百拷(kao)貝(bei)/反應。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定量 PCR 檢測，避免後(hou)續(xu)汙染(ran)。
5. 本(ben)試劑盒足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系(xi)的熒光(guang)定量 PCR。
6. 本(ben)產品只(zhi)適用於(yu)科(ke)研(yan)，不能(neng)用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使(shi)用方(fang)法：
壹(yi)、樣品采集(ji)：
1、食(shi)品樣品：樣品的采集(ji)與(yu)預(yu)培養按照樣(yang)品的采集(ji)與(yu)預(yu)培養按照《食(shi)品衛生微(wei)生(sheng)物(wu)學檢驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢驗(yan)要(yao)求進行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用無(wu)菌註射器抽(chou)取受(shou)檢者靜(jing)脈血2mL，註入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗(kang)凝管(guan)，立(li)即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞便樣品：取糞便置於滅(mie)菌(jun)的收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢。
4、病(bing)竈(zao)部位(wei)樣(yang)品：取發(fa)病(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送(song)檢。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意：由於(yu)標(biao)準品濃度(du)非常高，因此下(xia)列稀(xi)釋(shi)操(cao)作壹定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的區(qu)域進行(xing)，千萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣品或本(ben)試劑盒的其他成分）。為(wei)增(zeng)加(jia)產品穩定性和(he)避免擴散(san)傳(chuan)染(ran)性病(bing)原(yuan)，本產品不提供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品做陽性對照，只(zhi)提供(gong)可(ke)以直接(jie)使用的 DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管(guan)，分別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍頭分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶芯(xin)槍頭，下(xia)同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照，充(chong)分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
5. 換(huan)槍頭，在(zai) 6 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照(上(shang)步(bu)稀釋(shi)所(suo)得(de))，充(chong)分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
6. 換(huan)槍頭，在(zai) 5 號管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照到 5 號管(guan)中(zhong)，充(chong)分震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對照。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
7. 重(zhong)復上(shang)面的操(cao)作直到得(de)到 6 個(ge)稀釋(shi)度(du)的陽性對照。放(fang)冰(bing)上(shang)待用(yong)。
註：上(shang)述樣(yang)品建(jian)議經過(guo)增(zeng)菌(jun)後，收(shou)集(ji)培養(yang)物(wu)用於(yu)檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采用(yong)PCR試劑盒配(pei)備的DNA抽(chou)提液(ye)，按以下(xia)說(shuo)明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸(suan)的粗提。也可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤葉(ye)生物(wu)科(ke)技有限(xian)公司生(sheng)產的DNA提(ti)取試劑盒(過(guo)柱法(fa)-熒(ying)光(guang)配套(tao))或(huo)其他合(he)適(shi)的商(shang)業化產品，並按照相(xiang)應(ying)試劑盒說(shuo)明(ming)進行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體(ti)培養(yang)物(wu)：取液(ye)體(ti)培養(yang)物(wu)100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量吸棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培(pei)養(yang)物(wu)：挑(tiao)取單克隆菌落與(yu)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
3、糞便樣品：挑(tiao)取米粒(li)大(da)小(xiao)糞便於滅(mie)菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
4、其他液(ye)體(ti)標本(ben)：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清，沈澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應。
註：陽性對照和(he)陰性對照為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好的核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加(jia)入到反應體(ti)系(xi)中(zhong)即可(ke)。由於(yu)陽性對照濃(nong)度(du)較高，建(jian)議在(zai)樣品制備區(qu)域加(jia)入陽(yang)性對照。 
（標(biao)準品）  Probenecid  質(zhi)量規格：>98%,標(biao)準品 牛(niu)金(jin)屬(shu)硫(liu)蛋(dan)白(MT)試劑盒 Bovine Metallothionein,MT ELISA Kit

  Norfloxacin  質(zhi)量規格：>99,USP,BR,可(ke)用於(yu)細胞培養 英(ying)文名稱(cheng)HumanOCELISAKit人骨(gu)鈣素(su)(OC)規格：96T/48T

（標(biao)準品）  Norfloxacin  質(zhi)量規格：HPLC>98%,標(biao)準品 動物(wu)細胞(bao)/組織(zhi)甘(gan)露糖(tang)6-0酸(suan)異構(gou)酶(mannose-6-phosphateisomerase;MPI)電(dian)泳(yong)分析(xi)試劑盒5

鹽(yan)酸鹽(yan)  Norfloxacin HCl  質(zhi)量規格：含(han)量大於(yu)98.5% RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISA試劑盒大(da)鼠(shu)可(ke)溶性CD30配(pei)體(sCD30L)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鹽(yan)酸鹽(yan)（標準品）  Norfloxacin HCl  質(zhi)量規格：HPLC>98%,標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)髓(sui)樣分化因子88(MyD88)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： MyD88 ELISA Kit

  Indometacin  質(zhi)量規格：>99%,AR,BP2010 小(xiao)鼠(shu)神經生(sheng)長(chang)因子(NGF)ELISA檢測試劑盒MouseNervegrowthfactor,NGFELISAkit 96T/48T

（標(biao)準品）  Indometacin  質(zhi)量規格：HPLC>98%,標(biao)準品 人轉移酶(mei)2抗(kang)體(IgA)試劑盒 Human ansglaminase 2 aibody IgA ELISA kit

西米替(ti)汀  Cimetidine  質(zhi)量規格：>99%,USP32,A型(xing) Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit大(da)鼠(shu)胰高血(xue)糖(tang)素(su)樣(yang)肽(tai)1(Glp-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

西米替(ti)汀（標(biao)準品）  Cimetidine  質(zhi)量規格：HPLC>98%,標(biao)準品 AP-NPP底(di)物(wu)顯(xian)色試劑盒10

阿德(de)福(fu)韋(wei)/阿德(de)福(fu)韋(wei)酯(zhi)  Adefovir dipivoxil  質(zhi)量規格：>99%,可(ke)用於(yu)細胞培養 Mousehepaticlipase,HLELISA試劑盒小(xiao)鼠(shu)肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規格：96T/48T
Desglucohellebrin  20300-44-1  中(zhong)文名：  分子式：C30H42O10    Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBELISAKit 人抗(kang)DNA酶(mei)B抗(kang)體(ai-DNaseB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口(kou)分裝

Polypodine B  18069-14-2  中(zhong)文名：水龍骨(gu)甾酮(tong)B  分子式：C27H44O8    humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA試劑盒人艾(ai)柯(ke)病(bing)毒IgM(ECHOIgM)ELISA試劑盒規格：96T/48T

14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  1323952-04-0  中(zhong)文名：  分子式：C30H44O10    組織(zhi)PDGFRα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次(ci)

Withanolide S  63139-16-2  中(zhong)文名：醉(zui)茄內(nei)酯(zhi)S  分子式：C28H40O8    HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit人肽(tai)基脯(pu)氨酰順反異構(gou)酶(PPI)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Ergosterol glucoside  130155-33-8  中(zhong)文名：麥(mai)角甾醇(chun)葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)  分子式：C34H54O6    兔(tu)子可(ke)溶性細(xi)胞(bao)粘附(fu)分子1(sVCAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝
羌活醇(chun)（標準品）  Notopterol  質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)緩激肽(tai)(BK)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： BK ELISA Kit

10-羥(qiang)基癸酸（標(biao)準品)  10-Hydroxydecanoic acid  質(zhi)量規格：HPLC≥96%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)黃體(ti)激素(su)(LH)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： LH ELISA Kit

羥(qiang)基A(標(biao)準品)  Hydroxysafflor yellow A  質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)黃體(ti)生(sheng)成素(su)(LH)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： LH ELISA Kit

馬(ma)兜(dou)鈴酸(suan)A去(qu)甲基(ji)代謝產(chan)物(wu)  Aristolochic Acid Ia  質(zhi)量規格：美(mei)國進口(kou) 小(xiao)鼠(shu)黃體(ti)生(sheng)成素(su)(LH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝

羥(qiang)基積(ji)雪草(cao)苷(gan)（標準品）  Madecassoside  質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)黃體(ti)生(sheng)成素(su)釋(shi)放(fang)激素(su)(LHRH)ELISA檢測試劑盒MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISAKit 96T/48T

羥(qiang)基積(ji)雪草(cao)酸（標準品）  Madecassic acid  質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)黃體(ti)生(sheng)成素(su)釋(shi)放(fang)激素(su)(LHRH)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： LHRH ELISA Kit

羥(qiang)基積(ji)雪草(cao)酸  Madecassic acid  質(zhi)量規格：HPLC≥80%,BR 小(xiao)鼠(shu)磺基轉移酶(mei)(PST)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： PST ELISA Kit

海(hai)柯(ke)皂(zao)苷(gan)元  Hecogenin  質(zhi)量規格：HPLC≥95%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)回(hui)腸(chang)脂(zhi)肪酸(suan)結(jie)合(he)蛋(dan)白(FABP6)ELISA試劑盒 ，英(ying)文名： FABP6 ELISA Kit

靈(ling)芝酸 B  Ganoderic acid B  質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)活化蛋(dan)白C(APC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝(zhuang)/原(yuan)裝

異(yi)夏佛塔苷(gan)  Isoschaftoside  質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品 小(xiao)鼠(shu)活化蛋(dan)白C(APC)ELISA檢測試劑盒MouseactivatedproteinC,APCELISAKit 96T/48T
合(he)歡皮(pi)染(ran)料法(fa)PCR鑒定試劑盒*Metazachlor oxanilic acid (OA)標(biao)準品 ParaquatdiiodideD6 - 純(chun)品型，10mg 特(te)征(zheng)形(xing)態 固態

Metazachlor-2-hydroxy 標(biao)準品 ParaquatdiiodideD6 125709-81-1 純(chun)品型，10mg 特(te)征(zheng)形(xing)態 固態

Custom-Metazachlor 標(biao)準品 ParaquatdichlorideD6 - 純(chun)品型，1.5g 特(te)征(zheng)形(xing)態 固態
實(shi)驗(yan)流(liu)程：
1. 整(zheng)個檢測過程應嚴(yan)格(ge)按照本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求分別(bie)在(zai)試劑準備區(qu)、樣本處(chu)理區(qu)和PCR擴增(zeng)區(qu)進行(xing)操(cao)作，各區(qu)實(shi)驗(yan)服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不能(neng)混(hun)用(yong)；實(shi)驗(yan)用(yong)吸(xi)頭(tou)采(cai)用帶濾芯吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)應配有生物(wu)安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本處(chu)理在(zai)生物(wu)安(an)全(quan)櫃中(zhong)進行(xing)操(cao)作；三個(ge)區(qu)應該配有紫外線(xian)殺菌(jun)裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解，樣(yang)本(ben)處(chu)理過(guo)程應在(zai)0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操(cao)作，且完成實(shi)驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機(ji)檢測；樣本處(chu)理過(guo)程中使(shi)用(yong)的器具耗(hao)材(cai)應經過(guo)無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理。

3. 每(mei)次實(shi)驗(yan)應(ying)該(gai)設置陰、陽(yang)性對照。
4. 試劑盒所(suo)有試劑在(zai)使用(yong)前應該在(zai)常溫(wen)下(xia)充(chong)分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬時離(li)心(xin)。
5. 試劑盒內(nei)所(suo)配陰性和(he)陽(yang)性對照在(zai)壹次(ci)使用前應全部轉移至(zhi)標(biao)本準備區(qu)，並單獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手直接(jie)接(jie)觸PCR反應管(guan)，並(bing)應(ying)避免在(zai)PCR反應管(guan)上(shang)進行(xing)任(ren)何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應按照本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相關(guan)要(yao)求進行(xing)設置；不同批(pi)號試劑不能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒(ying)光(guang)定量PCR儀(yi)參(can)數(shu)設置中不選ROX校正，淬滅(mie)基(ji)因選擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過(guo)程中產(chan)品的廢棄(qi)物(wu)應該(gai)進行(xing)無(wu)害化處(chu)理後(hou)方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。