瓜(gua)蔞(lou)PCR鑒定(ding)試劑盒保存

特點(dian)：
1. 即(ji)開即(ji)用(yong)，用戶只(zhi)需要提供(gong)病毒樣(yang)品(pin)。
2. 根據地黃保守(shou)序(xu)列(lie)設(she)計的專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物，與(yu)相(xiang)關(guan)病毒無交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
3. 靈敏(min)度可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷貝/反應。
4. 壹管式(shi)熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢(jian)測，避(bi)免後續汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑盒足夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體系的熒(ying)光定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於(yu)臨床(chuang)診斷。

使用方(fang)法(fa)：
壹、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按照(zhao)《食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢(jian)驗(yan)要求進(jin)行。
2、血液(ye)樣(yang)品(pin)：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器(qi)抽取(qu)受(shou)檢(jian)者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸(suan)鈉)抗凝管，立即(ji)混(hun)勻。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品(pin)：取(qu)糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收集(ji)管中送(song)檢(jian)。
4、病竈部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘液(ye)膿(nong)血送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註意：由於(yu)標(biao)準品濃度非常(chang)高，因此下(xia)列(lie)稀釋(shi)操作壹定(ding)要在獨(du)立的區(qu)域進(jin)行，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本(ben)試(shi)劑盒的其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為增加產(chan)品(pin)穩定(ding)性(xing)和避(bi)免擴散(san)傳(chuan)染(ran)性(xing)病原(yuan)，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提供(gong)活體樣(yang)品(pin)做陽性(xing)對(dui)照(zhao)，只(zhi)提供(gong)可以(yi)直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作為陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋(shi)液(ye)（用帶(dai)芯槍頭，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)，充(chong)分震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hao)管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀釋(shi)所得)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管中加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管中，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
7. 重復(fu)上(shang)面的操(cao)作直到得到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度的(de)陽性(xing)對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品(pin)建議(yi)經(jing)過增菌後，收集(ji)培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采(cai)用PCR試(shi)劑盒配備的DNA抽(chou)提液(ye)，按以(yi)下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行DNA核(he)酸的粗(cu)提。也可(ke)采(cai)購(gou)上(shang)海澤葉生(sheng)物科(ke)技有限公(gong)司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試(shi)劑盒(過柱法(fa)-熒(ying)光配(pei)套)或(huo)其他(ta)合(he)適(shi)的商業化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按照(zhao)相(xiang)應試劑盒說明進行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體培(pei)養(yang)物：取液(ye)體培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管中，8000rpm離心(xin)3min，盡量吸(xi)棄上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑取(qu)單(dan)克隆(long)菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取(qu)米粒(li)大小(xiao)糞(fen)便(bian)於(yu)滅菌(jun)離(li)心(xin)管中，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘，棄上(shang)清(qing)，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心(xin)3min，棄上(shang)清(qing)，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
註：陽性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陰性(xing)對(dui)照(zhao)為(wei)已經抽(chou)提(ti)好的(de)核酸(suan)(無(wu)需提(ti)取(qu))，直(zhi)接取5μL加入到(dao)反應體系中即(ji)可(ke)。由於陽性(xing)對(dui)照(zhao)濃度較高，建議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域加(jia)入陽性(xing)對(dui)照(zhao)。 
實驗流程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過程(cheng)應嚴格按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書要求分(fen)別在(zai)試(shi)劑準備區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進行(xing)操作，各區(qu)實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立使用，不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)；實驗用(yong)吸(xi)頭采(cai)用帶(dai)濾(lv)芯吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)應配有生(sheng)物安全櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理在生(sheng)物安全櫃中進(jin)行(xing)操作；三個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有紫外(wai)線(xian)殺(sha)菌裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降解(jie)，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程(cheng)應在0-4℃條(tiao)件下(xia)操作，且(qie)完(wan)成實驗後立即(ji)上(shang)機(ji)檢(jian)測；樣(yang)本(ben)處(chu)理過程(cheng)中使(shi)用(yong)的器(qi)具耗(hao)材(cai)應經過無核酶(mei)處(chu)理。
3. 每(mei)次(ci)實驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽性(xing)對(dui)照(zhao)。
4. 試劑盒所有試(shi)劑在使用前應該(gai)在(zai)常(chang)溫下(xia)充(chong)分融化混(hun)勻，並應瞬(shun)時(shi)離心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內(nei)所配陰性(xing)和陽性(xing)對(dui)照(zhao)在(zai)壹次使用(yong)前(qian)應全部(bu)轉(zhuan)移至標(biao)本(ben)準(zhun)備(bei)區(qu)，並單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾(rao)，應避(bi)免裸手(shou)直(zhi)接接觸PCR反應管，並(bing)應避(bi)免在PCR反(fan)應管上(shang)進行任(ren)何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相關參(can)數應按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書相(xiang)關(guan)要求進(jin)行設(she)置(zhi)；不(bu)同(tong)批號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系列熒(ying)光定(ding)量PCR儀參(can)數設(she)置(zhi)中不(bu)選ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過程(cheng)中產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄物(wu)應該(gai)進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處(chu)理後方可(ke)丟(diu)棄。
儲(chu)存條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收集(ji)、處(chu)理及(ji)保存方(fang)法(fa)
1. 血清(qing)：使用(yong)不(bu)含熱原(yuan)和內(nei)毒素的試(shi)管，操(cao)作過程(cheng)中避(bi)免任何(he)細胞(bao)刺激(ji)，收集(ji)血(xue)液(ye)後，3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘將(jiang)血清(qing)和紅細胞(bao)迅速(su)小(xiao)心(xin)地分離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)或(huo)肝素抗凝。3000 轉離心(xin)30 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
3. 細胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘去(qu)除顆(ke)粒(li)和(he)聚(ju)合(he)物。
4. 組織(zhi)勻漿：將(jiang)組織(zhi)加入適量生(sheng)理鹽(yan)水搗碎(sui)。3000 轉(zhuan)離心(xin)10 分(fen)鐘取上(shang)清(qing)。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)收集(ji)後不(bu)及(ji)時(shi)檢(jian)測，請(qing)按壹次用量分裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融，在室(shi)溫下(xia)解(jie)凍(dong)並確保樣(yang)品(pin)均(jun)勻地充分解(jie)凍(dong)。
RL1(大(da)鼠肺成纖維(wei)樣(yang)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2石斛(hu)堿（標(biao)準品）Dendrobine質(zhi)量規格：HPLC≥97%，標(biao)準品

GNM(人(ren)口腔鱗(lin)癌(ai)頸結轉(zhuan)移癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0320BC3H1(小(xiao)鼠腦瘤(liu)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)型豬腎細胞(bao);MPK石榴(liu)皮(pi)鞣(rou)素（標(biao)準品）Punicalin質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品

小(xiao)鼠肺腺(xian)癌(ai)低轉(zhuan)移細胞(bao)(綠色(se)熒(ying)光蛋(dan)白(bai)標(biao)記(ji));LA1-GFP（標(biao)準品）(−)-Huperzine A質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品

CD3D & CD3E Others Human 人(ren) CD3D & CD3E Heterodimer 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 矢(shi)車菊素(su)-3-O-葡萄(tao)糖(tang)苷(標(biao)準品）Cyanidin-3-O-glucoside chloride質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品

Ca Ski 人(ren)腸轉(zhuan)移細胞(bao)紅花(hua)甙; Carthamine;Safflower Yellow質量規格：色(se)價E(1%)=150;含量>95%
CXCL3 Protein Human 重(zhong)組人(ren) CXCL3 / GRO gamma 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽)克裏(li)唑啼(ti)尼(ni)鹽(yan)酸;克(ke)裏(li)唑替(ti)尼(ni)鹽(yan)酸Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl質(zhi)量規格：>99%,MET抑(yi)制(zhi)劑

Lncap clone FGC(人前列(lie)腺(xian)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren) AMTN / Amelotin 人細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) DL-DL-Tryptophan質(zhi)量規格：>98%,BR

盤羊(yang)皮(pi)膚細胞(bao);ASHS2DL-DL-Serine質(zhi)量規格：>98%,可(ke)用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)

CD40 Others Canine 狗(gou) CD40 / TNFRSF5 人細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) L-蛋(dan)氨(an)酸(suan);L-Mine質量規格：>98%,BR

軟(ruan)骨細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)DL-苯(ben)DL-Phenylalanine質(zhi)量規格：>98,BR
VSIG4 Others Human 人(ren) VSIG4 人細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 金絲(si)桃素(標(biao)準品)質(zhi)量規格：HPLC≥98%,標(biao)準品Hypericin

人(ren)骨骼肌成肌細胞(bao)RNAHSkMM miRNA5 μgD-葡(pu)萄(tao)糖(tang)-6-1酸(suan)質量規格：1M in H2O(260Mg/ml),進(jin)口原(yuan)裝D-（+）-Glucopyrase 6-phosphate

ScaBER細胞(bao)，人膀(pang)胱(guang)鱗(lin)癌(ai)細胞(bao) 小鼠結腸(chang)癌(ai)細胞(bao),C26細胞(bao) RLFs, 大鼠肺成纖維(wei)細胞(bao)6-1酸葡萄(tao)糖(tang)三鈉鹽(yan)質量規格：>98%,BRD-Gluconate 6-phosphate 3 salt 

L-O2(人(ren)正(zheng)常(chang)肝細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2質(zhi)量規格：> 95%,BRAztreonam

NHEK.f single dor Pellet 正(zheng)常(chang)人(ren)表(biao)皮(pi)角(jiao)質(zhi)細胞(bao)團塊(kuai)(少(shao)年者(zhe)) > 1 mio.cells 小鼠顆(ke)粒(li)細胞(bao)MGC（標(biao)準品）質量規格：HPLC>95%,標(biao)準品Aztreonam
瓜(gua)蔞(lou)PCR鑒定(ding)試劑盒保存CM-R070大(da)鼠尿(niao)道上(shang)皮(pi)細胞(bao)*培(pei)養(yang)基100mL二(er)甲基(ji)酯質(zhi)量規格：美國進(jin)口Methotrexate Dimethyl Ester

ACHN, 人(ren)腎細胞(bao)腺(xian)癌(ai)細胞(bao) 胚肺細胞(bao),HLF細胞(bao) Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌(ai)細胞(bao))-甲基(ji)-d3，二(er)甲基(ji)酯質(zhi)量規格：美國進(jin)口Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester

小(xiao)鼠B細胞(bao)雜(za)交(jiao)瘤(liu)細胞(bao);SH27-羥基質量規格：美國進(jin)口7-Hydroxy Methotrexate