探(tan)針法PCR鑒定(ding)試劑盒直(zhi)銷(xiao)

儲(chu)存(cun)條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收集、處(chu)理及(ji)保存方(fang)法
1. 血(xue)清(qing)：使用(yong)不含熱原(yuan)和內(nei)毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操作過程中避免任(ren)何(he)細胞刺激(ji)，收集血液後(hou)，3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清(qing)和紅(hong)細胞迅速小(xiao)心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽或肝(gan)素(su)抗凝。3000 轉離(li)心(xin)30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細胞上(shang)清(qing)液：3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)去除(chu)顆粒(li)和聚合(he)物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加入(ru)適量(liang)生(sheng)理鹽水(shui)搗碎。3000 轉離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本(ben)收集後(hou)不及(ji)時(shi)檢(jian)測，請按壹次(ci)用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確保樣品(pin)均勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍(dong)。

特點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用戶只需(xu)要提供(gong)病毒(du)樣品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃(huang)保守(shou)序列(lie)設(she)計(ji)的專壹性(xing)引物，與相關病毒(du)無交叉反應。
3. 靈(ling)敏度可(ke)以(yi)達到幾(ji)百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹管(guan)式熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免後(hou)續汙(wu)染。
5. 本(ben)試劑盒足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應體系(xi)的(de)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品只適用於(yu)科(ke)研，不(bu)能(neng)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方法(fa)：
壹、樣品(pin)采集：
1、食(shi)品(pin)樣品：樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培養(yang)按照樣品(pin)的(de)采集與預(yu)培養(yang)按照《食(shi)品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物學檢驗(yan)阪崎腸(chang)桿菌(jun)檢驗(yan)要求進(jin)行。
2、血(xue)液樣品(pin)：用(yong)無菌(jun)註射(she)器抽取受(shou)檢(jian)者靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗凝管(guan)，立(li)即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：取糞(fen)便置於(yu)滅菌(jun)的收(shou)集管(guan)中送檢(jian)。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品：取發(fa)病部(bu)位(wei)新鮮(xian)滲(shen)出物、粘液膿(nong)血(xue)送檢(jian)。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性(xing)對照（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度非常高(gao)，因(yin)此(ci)下列稀釋(shi)操(cao)作壹定(ding)要在獨立(li)的(de)區(qu)域進行，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染樣(yang)品(pin)或(huo)本(ben)試劑盒的其他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性(xing)和避免擴散傳(chuan)染性(xing)病原(yuan)，本(ben)產品不提供(gong)活(huo)體樣(yang)品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對照，只提供(gong)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使(shi)用的(de) DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個離(li)心(xin)管(guan)，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋(shi)液（用帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待用。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋(shi)所得)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待用。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照到 5 號管(guan)中，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待用。
7. 重復(fu)上面(mian)的操(cao)作直(zhi)到得(de)到 6 個稀釋(shi)度的陽(yang)性(xing)對照。放(fang)冰(bing)上待用。
註(zhu)：上(shang)述樣(yang)品建議(yi)經過增(zeng)菌(jun)後(hou)，收集培養(yang)物用於檢(jian)測。 
二(er)、DNA提取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒配(pei)備的DNA抽提液，按以下(xia)說明進(jin)行DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提。也(ye)可(ke)采購上海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物科(ke)技(ji)有(you)限公司生(sheng)產的(de)DNA提取試(shi)劑盒(過柱法-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或(huo)其他(ta)合(he)適的商業化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按照相應試劑盒說明進(jin)行操作。
1、液體培(pei)養(yang)物：取液體培(pei)養(yang)物100μL加到1.5mL無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑取單(dan)克隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
3、糞(fen)便(bian)樣品(pin)：挑取米粒大小(xiao)糞便於滅菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，加入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽水(shui)，振蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分(fen)鐘(zhong)，棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
4、其他(ta)液體標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加入(ru)50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照和陰(yin)性(xing)對照為(wei)已經(jing)抽提好的核(he)酸(suan)(無需提取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入(ru)到反應體系(xi)中(zhong)即(ji)可(ke)。由(you)於陽(yang)性(xing)對照濃(nong)度較高(gao)，建(jian)議(yi)在樣(yang)品制(zhi)備區(qu)域加入(ru)陽(yang)性(xing)對照。 
CD69 Others Human 人 CD69 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) Tigecycline質(zhi)量(liang)規格(ge)：含量(liang)>99.0%

小(xiao)鼠(shu)B細胞雜(za)交(jiao)瘤細胞;W6/32（標(biao)準(zhun)品(pin)）Tigecycline質(zhi)量(liang)規格(ge)：HPLC>98%,標(biao)準(zhun)品(pin)

TDGF1 Others Rat 大鼠(shu) Cripto / TDGF1 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) Tilmicosin質(zhi)量(liang)規格(ge)：幹(gan)品度≥90.0%，幹(gan)品含量(liang)≥85.0%，USP34

原(yuan)代肝(gan)實(shi)質(zhi)細胞特制無血清(qing)添加劑Many types of cells包(bao)裝：1ml(標(biao)準(zhun)品(pin))Tilmicosin質(zhi)量(liang)規格(ge)：含量(liang)測(ce)定(ding)

RCC-krause細胞，腎癌(ai)細胞 人細胞,CaSKi細胞 人內(nei)根(gen)殼細胞總(zong)RNAHHIRSC NATimolol Maleate質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,USP
人喉癌(ai)上(shang)皮(pi)細胞;Hep-2 大鼠(shu)食(shi)管(guan)平滑肌細胞*培(pei)養(yang)基 100mLAcetazolamide質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%

腦(nao)膜(mo)細胞培(pei)養(yang)基MenCM-prfBr-Mmc (=4-溴甲(jia)基-7-甲(jia)氧(yang)基)(>98.0%(T))Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(T)

SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 3-溴甲(jia)基-7-甲(jia)氧(yang)基-1,4-苯(ben)並(bing)惡(e)嗪-2-酮(tong)(>98.0%(T))3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(T)

大鼠(shu)肺(fei)大動(dong)脈內(nei)皮(pi)細胞*培(pei)養(yang)基 100mL4-溴甲(jia)基-6,7-二(er)甲(jia)氧(yang)基(>98.0%(HPLC))4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin 質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98.0%(HPLC)

BLU-87 人膀(pang)胱移行細胞癌(ai) BLU-87 human bladder ansitional cell carcima RPMI1640 (內(nei)含2mM-glutamine)+10%胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing) DBD-CO-Hz [=4-(N,N-二(er)甲(jia)基氨基磺(huang)酰(xian))-7-(N-肼(jing)基羰(tang)甲(jia)基-N-甲(jia)基)氨基-2,1,3-苯(ben)並(bing)惡(e)二(er)唑](>98.0%(HPLC))
TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照) 酸(suan)性(xing)綠(lv) 50 質(zhi)量(liang)規格(ge)：BS,進(jin)口原裝Lissamine™ Green B

軟骨(gu)細胞培(pei)養(yang)基CM酸(suan)性(xing)綠(lv)A質(zhi)量(liang)規格(ge)：BS,>97%,進(jin)口分(fen)裝Acid Green A

C-33A細胞，人子(zi)細胞 兔(tu)主(zhu)動脈(mai)平滑肌細胞,CCC-SMC-1細胞 人表皮(pi)角(jiao)質(zhi)細胞-胎(tai)兒(er)HEK-f焦1酸(suan)鉀(jia)(>97%,BC)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>97%,BCPotassium pyrophosphate, tetrabasic

HFSF(人胚胎(tai)眼(yan)鞏膜(mo)成(cheng)纖(xian)維細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2鎢(wu)酸(suan)鉀二(er)水(shui)(>98%,BR)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BRPotassium tungstate, dehydrate

hMoCD14+-PB single dorpre-screened Pellet 人類外(wai)周(zhou)血(xue)CD14+單(dan)核(he)細胞團(tuan)塊(kuai)單壹來源，預選(xuan)型(xing) > 1 mio.cells 人脊髓星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細胞RNAHA-sp miRNA5 μg硫(liu)酸(suan)奎(kui)寧水(shui)合(he)物(>98%,BR)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BRQuinine hemisulfate salt hydrate
探(tan)針法PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒直(zhi)銷(xiao)雜(za)交(jiao)瘤(B類(lei));Z51B3C10H12A12G2F7B5TES；Tris乙(yi)磺(huang)酸(suan),2-[（三(san)（羥(qiang)甲(jia)基）甲(jia)基）氨基]-1-乙(yi)磺(huang)酸(suan)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>99%,ARTES

中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵巢(chao)細胞系(xi);CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥(fei)大細胞瘤細胞，P815細胞 INS-1細胞，大鼠(shu)胰島素(su)細胞3-[ (N-三(san)(羥(qiang)甲(jia)基)甲(jia)氨基]-2-羥(qiang)基丙(bing)磺(huang)酸(suan)鈉(na)質(zhi)量(liang)規格(ge)：>98%,BRTAPSO mo

293來(lai)源病毒(du)包(bao)裝細胞;ΦA-GPTAPSO；3-[ (N-三(san)(羥(qiang)甲(jia)基)甲(jia)氨基]-2-羥(qiang)基丙(bing)磺(huang)
實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整個檢測(ce)過程應嚴格(ge)按照本(ben)說明書(shu)要求分(fen)別在試劑準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操作，各(ge)區(qu)實(shi)驗(yan)服、儀器 、耗材應獨立(li)使(shi)用(yong)，不能混(hun)用(yong)；實驗(yan)用吸頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣本(ben)處(chu)理區(qu)應配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃中(zhong)進(jin)行(xing)操作(zuo)；三個區(qu)應該配(pei)有(you)紫(zi)外(wai)線殺(sha)菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程應在0-4℃條件(jian)下操(cao)作，且(qie)完成實驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理過程中使用的器具耗材應經過無核酶(mei)處(chu)理。

3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)應該設置陰(yin)、陽性(xing)對照。
4. 試(shi)劑盒所有(you)試劑在(zai)使(shi)用前(qian)應該在常溫下(xia)充(chong)分(fen)融化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑盒內(nei)所配(pei)陰(yin)性(xing)和陽性(xing)對照在壹次(ci)使(shi)用(yong)前應全部(bu)轉移至標(biao)本(ben)準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒(ying)光(guang)幹(gan)擾，應避免裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避免在(zai)PCR反應管(guan)上進行(xing)任(ren)何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴增(zeng)相關參(can)數(shu)應按照本(ben)說明書(shu)相關要求進(jin)行設(she)置；不同(tong)批(pi)號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數(shu)設置中不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實(shi)驗(yan)過程中產品的廢(fei)棄物應該進行無害化(hua)處(chu)理後(hou)方可(ke)丟(diu)棄。