白(bai)果(guo)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)

特(te)點(dian)：
1. 即開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶(hu)只(zhi)需要(yao)提(ti)供(gong)病(bing)毒樣(yang)品。
2. 根(gen)據地黃(huang)保(bao)守(shou)序(xu)列設(she)計的專(zhuan)壹性引(yin)物，與(yu)相(xiang)關病毒(du)無交(jiao)叉反(fan)應。
3. 靈敏(min)度可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百拷(kao)貝/反(fan)應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光定量 PCR 檢測(ce)，避免後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足夠 50 次 20μL 反(fan)應體系的(de)熒(ying)光定量 PCR。
6. 本產品只適(shi)用於(yu)科研，不(bu)能用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用(yong)方法(fa)：
壹、樣(yang)品采集(ji)：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的采集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按照樣(yang)品的采集(ji)與(yu)預培(pei)養(yang)按照《食(shi)品衛生(sheng)微(wei)生(sheng)物學(xue)檢驗(yan)阪崎腸桿菌檢驗(yan)要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品：用無(wu)菌註(zhu)射(she)器抽取受檢者(zhe)靜脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸檬(meng)酸鈉(na))抗凝(ning)管(guan)，立即混(hun)勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅(mie)菌(jun)的收集(ji)管(guan)中送(song)檢。
4、病竈(zao)部位樣(yang)品：取發(fa)病部位新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血送(song)檢。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽性對(dui)照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由於(yu)標準品濃(nong)度非(fei)常高(gao)，因此(ci)下(xia)列稀(xi)釋(shi)操作(zuo)壹(yi)定要(yao)在(zai)獨立的(de)區(qu)域進(jin)行(xing)，千(qian)萬不(bu)能汙(wu)染(ran)樣(yang)品或(huo)本試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)其他成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加產品穩定性和避免擴(kuo)散(san)傳(chuan)染(ran)性病原，本產品不(bu)提供(gong)活體樣(yang)品做(zuo)陽性對(dui)照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可以(yi)直(zhi)接使(shi)用(yong)的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標記 6 個離(li)心管(guan)，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍頭分別(bie)加入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板稀(xi)釋(shi)液（用(yong)帶芯(xin)槍頭，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換槍頭，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上步稀(xi)釋所(suo)得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換槍頭，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分(fen)震蕩 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重復(fu)上面的(de)操作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上述樣(yang)品建(jian)議經過增(zeng)菌後，收集(ji)培(pei)養(yang)物用(yong)於(yu)檢測(ce)。 
二、DNA提取(qu)：
可采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配(pei)備(bei)的DNA抽提液，按以(yi)下(xia)說明進(jin)行(xing)DNA核酸的(de)粗(cu)提(ti)。也可采購上海澤葉(ye)生(sheng)物科技有(you)限公司生(sheng)產的DNA提取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套)或(huo)其他合適(shi)的商(shang)業化產品，並按照相(xiang)應試(shi)劑(ji)盒(he)說明進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液體培(pei)養(yang)物：取(qu)液體培(pei)養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加入50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑取單(dan)克(ke)隆菌落(luo)與(yu)50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑取米(mi)粒大小糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，加入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱中加入50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
4、其他液體標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上清，沈澱中加入50μL DNA抽提液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取上清5μL進行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和(he)陰性對(dui)照(zhao)為(wei)已(yi)經抽提好的(de)核(he)酸(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接取(qu)5μL加入到(dao)反(fan)應體系中(zhong)即可(ke)。由於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建(jian)議在(zai)樣(yang)品制備(bei)區(qu)域加入陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢測(ce)過程(cheng)應嚴格按照本說明書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本處(chu)理區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操作(zuo)，各(ge)區(qu)實(shi)驗服(fu)、儀器 、耗材應獨立使(shi)用(yong)，不(bu)能混(hun)用；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭采用帶濾芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處(chu)理區(qu)應配有生(sheng)物安(an)全櫃，樣(yang)本處(chu)理在(zai)生(sheng)物安(an)全櫃中進行(xing)操作(zuo)；三(san)個區(qu)應該(gai)配(pei)有紫(zi)外線殺(sha)菌裝(zhuang)置。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降解，樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)應在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操作(zuo)，且(qie)完成實(shi)驗後(hou)立(li)即上機檢測(ce)；樣(yang)本處(chu)理過程(cheng)中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗材應經過無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理。
3. 每次實(shi)驗應該(gai)設(she)置陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應該(gai)在(zai)常(chang)溫下(xia)充分融化混勻(yun)，並應瞬時離(li)心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配陰性和陽性對(dui)照(zhao)在(zai)壹(yi)次使(shi)用(yong)前(qian)應全部轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標本準備(bei)區(qu)，並(bing)單(dan)獨存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾，應避免裸手直(zhi)接接觸(chu)PCR反(fan)應管，並應避免在(zai)PCR反(fan)應管上進行(xing)任(ren)何(he)標記。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應按照本說明書(shu)相(xiang)關要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置；不(bu)同批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系列熒(ying)光定量PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中(zhong)不(bu)選ROX校正，淬滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程(cheng)中產品的廢(fei)棄(qi)物應該(gai)進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處(chu)理後(hou)方可(ke)丟(diu)棄(qi)。
儲存(cun)條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收集(ji)、處(chu)理及(ji)保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血清(qing)：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱原和(he)內(nei)毒素(su)的(de)試(shi)管，操作(zuo)過程(cheng)中避(bi)免任何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)，收集(ji)血(xue)液後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)將血(xue)清和(he)紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小心地分離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸檬(meng)酸鹽(yan)或(huo)肝素抗凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分鐘(zhong)取(qu)上清。
3. 細(xi)胞(bao)上清液：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚(ju)合物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿：將組織(zhi)加入適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分鐘(zhong)取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如果樣(yang)本收集(ji)後(hou)不(bu)及時(shi)檢測(ce)，請按壹次用(yong)量分(fen)裝(zhuang)，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)反(fan)復凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫下(xia)解凍(dong)並(bing)確保(bao)樣(yang)品均(jun)勻(yun)地充分解凍(dong)。
KP-N-NS人腎(shen)上腺神經母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)(腦轉(zhuan)移(yi)) KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS重水(shui),氧化氘(50G)Deuterium Oxide質量(liang)規格：D,99.9%

SF763細(xi)胞(bao)，人(ren)腦(nao)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 肺炎(yan)克(ke)雷(lei)伯菌 人顱(lu)骨(gu)造(zao)骨(gu)細(xi)胞(bao)總RNAHCO NA重水(shui),氧化氘(100G)Deuterium Oxide質量(liang)規格：D,99.9%

RKO-AS45-1(人結腸癌(ai)轉(zhuan)基因(yin)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2氘代硫(liu)酸(0.55 ml x 10)Sulfuric Acid-D2質量(liang)規格：D,99.5%, acidity 90% IN D2O

FRhK-4(恒河(he)猴(hou)胚腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0307SW1116(人結腸腺癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大耳(er)山(shan)羊腎(shen)細(xi)胞(bao);LDG-2氘代硫(liu)酸(50g )Sulfuric Acid-D2質量(liang)規格：D, 99%, acidity 96-98% IN D2O

主動(dong)脈平滑肌(ji)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)氘代硫(liu)酸(100g )Sulfuric Acid-D2質量(liang)規格：D,99.5%, acidity 90% IN D2O
倉鼠腎(shen)細(xi)胞(bao);HL-1地拉羅司,去(qu)鐵(tie)斯(si)若Deferasirox質量(liang)規格：>99.0%

小鼠樹(shu)突(tu)狀細(xi)胞(bao)肉瘤(liu)低轉(zhuan)移(yi)細(xi)胞(bao)(綠色熒(ying)光蛋(dan)白(bai)標記);DG6-GFP 小鼠內(nei)臟(zang)脂肪細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL地拉羅司(標準品)Deferasirox質量(liang)規格：HPLC>98%,標準品

HET-1A, 人食(shi)管上皮細(xi)胞(bao) Human*Risperidone質量(liang)規格：>98%,BR,可用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)

CD209B Others Mouse 小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對(dui)照(zhao)) *（標準品）Risperidone質量(liang)規格：HPLC>99%,標準品

人顱(lu)骨(gu)造(zao)骨(gu)細(xi)胞(bao)裂(lie)解物HCOL*(標準品)Ritonavir質量(liang)規格：HPLC>98%,標準品
中國(guo)倉鼠卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)-二氫(qing)*還原酶(mei)缺(que)陷型;CHO/dhFr- 喉(hou)表皮樣(yang)癌(ai)細(xi)胞(bao)，HEp-2細(xi)胞(bao) SF-9細(xi)胞(bao)，昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)系胰高(gao)血糖(tang)素樣(yang)肽(tai)-2（1-34)，人質量(liang)規格：>95%,BRGLP-2 (1-34) (human)

人胚(pei)肺成纖維(wei)細(xi)胞(bao);CCC-HPF-1胰高(gao)血糖(tang)素（1-29），牛，人(ren)，豬(zhu)質量(liang)規格：>95%,BRGlucagon (1 - 29), bovine,human, porcine

HA Others H3N2 甲型流(liu)感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝(ning)素(su)HA1 (Hemagglutinin) 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 胰高(gao)血糖(tang)素（19-29），牛，人(ren)，豬(zhu)質量(liang)規格：>95%,BRGlucagon (19 - 29), bovine,human, porcine

支(zhi)氣(qi)管成纖維(wei)細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(1ml)胰高(gao)血糖(tang)素樣(yang)肽(tai)Ⅰ（7-36）酰胺(an)，人(ren)質量(liang)規格：>95%,BRGlucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human

ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 升(sheng)麻素（標準品）質量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品Cimifugin
白(bai)果(guo)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)人胚(pei)肺二倍(bei)體細(xi)胞(bao);KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基 100mL聚(ju)酰胺shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：10毫升(sheng)

人卵(luan)巢(chao)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao);SK-OV-32,4,5-三錄(lu)本酚 2,4,5-Trichlorophqnol 92-92-4

APCS Others Human 人 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 微(wei)量可(ke)調移(yi)液器(qi)P10shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：保(bao)存(cun)：-20℃1克(ke)

兔脂(zhi)肪間(jian)質幹(gan)細(xi)胞(bao) Rabbit adipose d