牛(niu)支(zhi)原體(ti)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書

牛支原體(ti)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書組(zu)成(cheng)及試劑(ji)配制:
1、 酶(mei)標(biao)板：壹塊（96孔(kong)）
2、 標(biao)準(zhun)品(pin)（凍(dong)幹品(pin)）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)至(zhi)0.5ml，蓋(gai)好後室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同時(shi)反復顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動以助溶解，其濃度(du)為200 U/L，然(ran)後(hou)做系列倍比稀(xi)釋(shi)（註(zhu)：不(bu)要直接(jie)在板中進(jin)行倍比稀(xi)釋(shi)），分(fen)別(bie)配制成(cheng)200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)直接(jie)作(zuo)為(wei)空白(bai)孔(kong) 0 U/L。如(ru)配(pei)制100 U/L標(biao)準(zhun)品(pin)：取(qu)0.3ml （不(bu)要少(shao)於(yu)0.3ml ）200 U/L的(de)上述(shu)標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru)含(han)有0.3ml樣品稀(xi)釋(shi)液(ye)的(de)Eppendorf管(guan)中，混(hun)勻(yun)即可(ke)，其余濃度(du)以此(ci)類(lei)推。
3、 樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)：1×20ml。
4、牛(niu)支原體(ti)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書 檢測(ce)稀(xi)釋(shi)液(ye)A：1×10ml。
5、 檢測(ce)稀(xi)釋(shi)液(ye)B：1×10ml。

牛(niu)支原體(ti)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書樣(yang)本(ben)采(cai)集(ji)、存(cun)放(fang)及運輸(shu)：
1、樣(yang)本(ben)采(cai)集(ji)：各(ge)類(lei)型樣本(ben)按(an)照(zhao)常(chang)規方法(fa)采(cai)集(ji)；
2、存(cun)放(fang)：樣(yang)本(ben)在2~8℃條件下(xia)保(bao)存(cun)應不(bu)超過(guo)72h，-70℃以下可保(bao)存(cun)，但(dan)應避(bi)免反復凍(dong)融(rong)（zui多(duo)凍(dong)融(rong)3次(ci)）；
3、運輸(shu)：采(cai)用泡沫箱加(jia)冰(bing)密(mi)封(feng)進(jin)行運輸(shu)。

特(te)點(dian)優勢：
    1.特異性：所(suo)有產品使(shi)用的(de)引(yin)物(wu)均經過(guo)詳盡的(de)生物(wu)信息學(xue)分析，經過(guo)GenBank及自(zi)建龐大(da)數(shu)據庫(ku)的(de)比對，確保所(suo)用的(de)每(mei)壹條引物(wu)均為(wei)種(zhong)屬(shu)或血清(qing)型特異的(de)基(ji)因序(xu)列區(qu)段，可(ke)實(shi)現對(dui)細(xi)菌(jun)種(zhong)屬(shu)及血(xue)清型的(de)特(te)異檢測(ce)，特(te)異性均達到100%。
    2.   重現(xian)性：該(gai)系列所(suo)有產品均經過(guo)大(da)量(liang)實(shi)驗菌(jun)株(zhu)的(de)驗證，重現(xian)性為100%。
    3.   靈敏(min)性：該(gai)系列產(chan)品可(ke)實(shi)現對(dui)檢測(ce)菌(jun)的(de)高(gao)靈敏(min)檢測(ce)，當(dang)樣品(pin)中細(xi)菌(jun)的(de)濃度(du)達到103cfu/ml時(shi)，可(ke)實(shi)現對(dui)其的(de)直接(jie)檢測(ce)，無(wu)需(xu)繁(fan)瑣(suo)的(de)增(zeng)菌(jun)過(guo)程。
    4.   實(shi)用性：檢測(ce)範(fan)圍廣(guang)，涵(han)蓋了對(dui)人(ren)體危害(hai)較為(wei)嚴(yan)重的(de)17種(zhong)呼(hu)吸(xi)道(dao)及腸道(dao)致病(bing)菌(jun)，可(ke)實(shi)現對(dui)臨(lin)床樣品及其他環境(jing)取(qu)樣(yang)的(de)快(kuai)速(su)檢測(ce)，整個(ge)檢測(ce)過(guo)程為3-4個(ge)小(xiao)時。
    5.   優勢1：序列資(zi)源(yuan)豐(feng)富，除(chu)GenBank公布(bu)的(de)序(xu)列外，公司(si)還進(jin)行了(le)大(da)量(liang)菌(jun)株(zhu)的(de)序(xu)列破(po)譯，從(cong)理(li)論(lun)上保證(zheng)所(suo)選引物(wu)具有良(liang)好的(de)保(bao)守(shou)性和(he)特異性。

    6.   優勢2：該(gai)系列試劑(ji)盒均經過(guo)大(da)量(liang)的(de)保(bao)守(shou)性及特(te)異性實(shi)驗驗證，憑(ping)借公司(si)擁有的(de)豐(feng)富的(de)菌(jun)種(zhong)資(zi)源(yuan)，每壹種(zhong)檢測(ce)試劑(ji)盒均經過(guo)了20余種(zhong)標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)和(he)臨床菌(jun)株(zhu)的(de)保(bao)守(shou)性驗證及40余(yu)種(zhong)近緣標(biao)準(zhun)菌(jun)株(zhu)和(he)臨床菌(jun)株(zhu)的(de)特(te)異性驗證，確保在使(shi)用過(guo)程中不(bu)會出現(xian)任(ren)何的(de)假(jia)陽(yang)性及假(jia)陰性報(bao)告結果(guo)。

反(fan)應五(wu)要素：
參(can)加(jia)PCR反應的(de)物(wu)質(zhi)主要有五(wu)種(zhong)即(ji)引(yin)物(wu)、酶(mei)、dNTP、模(mo)板和(he)Mg2+
引物(wu)：引物是PCR特異性反應的(de)關(guan)鍵(jian)，PCR 產(chan)物的(de)特(te)異性取(qu)決於引物與模(mo)板DNA互補的(de)程(cheng)度(du)。理論(lun)上，只要知道(dao)任何壹段模(mo)板DNA序列， 就能(neng)按(an)其設(she)計(ji)互補的(de)寡(gua)核(he)苷(gan)酸鏈(lian)做引(yin)物(wu)，利(li)用PCR就可(ke)將(jiang)模(mo)板DNA在體外大(da)量(liang)擴(kuo)增(zeng)。設(she)計(ji)引(yin)物(wu)應遵(zun)循(xun)以下原則：
①引物(wu)長度(du)： 15-30bp，常(chang)用為20bp左右(you)。
②引物(wu)擴(kuo)增(zeng)跨度(du)： 以200-500bp為(wei)宜(yi)，特(te)定條件下(xia)可(ke)擴(kuo)增(zeng)長至10kb的(de)片(pian)段(duan)。
③引(yin)物堿基(ji)：G+C含量以40-60%為宜(yi)，G+C太(tai)少(shao)擴(kuo)增(zeng)效果(guo)不(bu)佳(jia)，G+C過(guo)多(duo)易出現(xian)非特異條帶。ATGC隨機分(fen)布(bu)，避(bi)免5個(ge)以上的(de)嘌(piao)呤(ling)或嘧啶(ding)核(he)苷(gan)酸的(de)成(cheng)串(chuan)排列。
④避(bi)免引物內部出現(xian)二(er)級(ji)結構，避(bi)免兩(liang)條引物(wu)間(jian)互補，特別是3'端(duan)的(de)互補，否則會形(xing)成(cheng)引物二聚(ju)體，產生非特異的(de)擴(kuo)增(zeng)條帶。
⑤引物3'端(duan)的(de)堿基(ji)，特別是末及倒(dao)數第(di)二個(ge)堿基(ji)，應嚴(yan)格(ge)要求(qiu)配(pei)對(dui)，以(yi)避(bi)免因末(mo)端(duan)堿基(ji)不(bu)配(pei)對而導(dao)致(zhi)PCR失(shi)敗。
⑥引物中有或能(neng)加(jia)上合適(shi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點， 被(bei)擴(kuo)增(zeng)的(de)靶(ba)序(xu)列有適宜(yi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點， 這(zhe)對酶(mei)切(qie)分(fen)析或分子克隆很(hen)有好處(chu)。
⑦引物(wu)的(de)特(te)異性：引物應與核(he)酸(suan)序列數(shu)據庫(ku)的(de)其它序列無(wu)明顯同源性。
引物量：每條引物(wu)的(de)濃度(du)0.1～1umol或10～100pmol，以低(di)引(yin)物量產(chan)生所(suo)需(xu)要的(de)結果(guo)為(wei)好，引物(wu)濃度(du)偏高(gao)會引(yin)起錯(cuo)配(pei)和(he)非特異性擴(kuo)增(zeng)，且可(ke)增加引物之(zhi)間形(xing)成(cheng)二聚體的(de)機(ji)會。

腺(xian)相關病(bing)毒(du)5 VP1抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫： AAV5 capsid protein VP1

脂(zhi)肪(fang)醛脫氫(qing)酶(mei)抗體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫： ALDH3A2

抗(kang)利(li)尿(niao)激素(su)1A抗(kang)體 英文(wen)縮寫： AVPR1A

抗(kang)利(li)尿(niao)激素(su)受(shou)體1B抗體 英文(wen)縮寫： AVPR1B

二(er)磷(lin)酸腺(xian)苷(gan)核(he)糖(tang)基(ji)化(hua)因子核(he)苷(gan)酸交換(huan)因子2抗體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫： ARFGEF2

α增(zeng)強(qiang)子結合蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) 英文(wen)縮寫： ATBF1

脊(ji)髓(sui)小(xiao)腦共(gong)濟失(shi)調(tiao)10抗體 英文(wen)縮寫： ATXN10

蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A錨定(ding)蛋(dan)白(bai)7抗體(ti) 英文(wen)縮寫： AKAP7

腺(xian)苷(gan)三磷(lin)酸結合盒轉運體12抗(kang)體 英(ying)文(wen)縮寫： ABCA12

腺(xian)苷(gan)三磷(lin)酸結合盒轉運體9抗(kang)體 英(ying)文(wen)縮寫： ABCB9

三磷(lin)酸腺(xian)苷(gan)結合盒轉運蛋白(bai)4抗體(ti) 英文(wen)縮寫： ABCD4

肌(ji)動(dong)蛋(dan)白(bai)結合蛋(dan)白(bai)LIM3抗體(ti) 英文(wen)縮寫： ABLIM3

高(gao)爾基(ji)復合體(ti)相關蛋白(bai)1抗體(ti) 英文(wen)縮寫： ACBD3

乙(yi)酰(xian)羧化(hua)酶(mei)1ACCα抗體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫： ACACA

腺(xian)嘌(piao)呤(ling)核(he)苷(gan)酸轉運蛋白(bai)1、2、3、4抗體(ti) 英文(wen)縮寫： ANT1+ANT2+ANT3+ANT4

牛(niu)支(zhi)原體(ti)PCR檢測(ce)試劑(ji)盒說(shuo)明書去(qu)整合素(su)樣金(jin)屬(shu)蛋(dan)白(bai)酶(mei)12 英文(wen)縮寫： ADAM12

磷(lin)酸化(hua)乙酰(xian)羧化(hua)酶(mei)1ACCα抗體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫： Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)

膜(mo)粘(zhan)連蛋白(bai)2受體(ti)抗體 英(ying)文(wen)縮寫： AX2R

晚(wan)期糖(tang)基(ji)化(hua)終(zhong)末產(chan)物特異性受體抗體 英文(wen)縮寫： AGER