同豬脊病(bing)毒梅(mei)拉哥(ge)病(bing)毒PCR檢測試劑(ji)盒說明書(shu)

同豬脊病(bing)毒梅(mei)拉哥(ge)病(bing)毒PCR檢測試劑(ji)盒說明書(shu)組成(cheng)及試劑(ji)配(pei)制(zhi):
1、 酶(mei)標(biao)板：壹塊(kuai)（96孔）
2、 標(biao)準品(pin)（凍(dong)幹品(pin)）： 2瓶(ping)，請臨(lin)用前15分鐘(zhong)內配(pei)制(zhi)。每瓶(ping)以樣(yang)品(pin)稀釋液稀(xi)釋至0.5ml，蓋好(hao)後室(shi)溫靜(jing)置(zhi)大(da)約10分鐘(zhong)，同時反(fan)復顛(dian)倒/搓動以(yi)助(zhu)溶(rong)解，其濃(nong)度(du)為200 U/L，然(ran)後做(zuo)系(xi)列倍比稀釋（註：不(bu)要直接在板中進(jin)行倍比稀釋），分別(bie)配(pei)制(zhi)成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣(yang)品(pin)稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配(pei)制(zhi)100 U/L標(biao)準品(pin)：取0.3ml （不(bu)要少(shao)於0.3ml ）200 U/L的(de)上述(shu)標(biao)準品(pin)加入含有0.3ml樣品(pin)稀釋液的(de)Eppendorf管中(zhong)，混(hun)勻即可，其余濃(nong)度(du)以此(ci)類(lei)推。
3、 同豬脊病(bing)毒梅(mei)拉哥(ge)病(bing)毒PCR檢測試劑(ji)盒說明書(shu)樣品(pin)稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀(xi)釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀(xi)釋液B：1×10ml。

樣(yang)本采(cai)集、存放及運(yun)輸(shu)：
同豬脊病(bing)毒梅(mei)拉哥(ge)病(bing)毒PCR檢測試劑(ji)盒說明書(shu)1、樣本采(cai)集：各(ge)類(lei)型樣(yang)本按照常(chang)規(gui)方(fang)法(fa)采(cai)集；
2、存放：樣本在2~8℃條(tiao)件(jian)下(xia)保存應(ying)不(bu)超過72h，-70℃以(yi)下可保存，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)（zui多凍(dong)融(rong)3次(ci)）；
3、運(yun)輸(shu)：采(cai)用(yong)泡(pao)沫箱加(jia)冰(bing)密封進(jin)行運(yun)輸(shu)。

特(te)點(dian)優(you)勢(shi)：
    1.特(te)異(yi)性：所(suo)有產(chan)品(pin)使(shi)用(yong)的(de)引(yin)物(wu)均經(jing)過詳(xiang)盡的(de)生物(wu)信(xin)息(xi)學(xue)分析(xi)，經(jing)過GenBank及自(zi)建(jian)龐(pang)大(da)數(shu)據(ju)庫的(de)比對，確保所(suo)用(yong)的(de)每壹(yi)條(tiao)引(yin)物(wu)均為種屬或血(xue)清(qing)型特(te)異(yi)的(de)基因(yin)序(xu)列區段(duan)，可實(shi)現對細菌(jun)種屬及血(xue)清(qing)型的(de)特(te)異(yi)檢測，特(te)異(yi)性均達(da)到100%。
    2.   重(zhong)現性：該(gai)系(xi)列所(suo)有產(chan)品(pin)均經(jing)過大(da)量(liang)實(shi)驗(yan)菌(jun)株(zhu)的(de)驗證(zheng)，重(zhong)現性為100%。
    3.   靈敏(min)性：該(gai)系(xi)列產(chan)品(pin)可實現對檢測菌(jun)的(de)高靈敏(min)檢測，當樣品(pin)中細菌(jun)的(de)濃(nong)度(du)達到103cfu/ml時，可實(shi)現對其的(de)直接檢測，無(wu)需(xu)繁瑣的(de)增菌(jun)過程。
    4.   實用(yong)性：檢測範圍(wei)廣，涵(han)蓋(gai)了對人(ren)體(ti)危害(hai)較為嚴(yan)重(zhong)的(de)17種呼(hu)吸道(dao)及腸道(dao)致(zhi)病(bing)菌(jun)，可(ke)實(shi)現對臨床樣(yang)品(pin)及其他環境(jing)取樣(yang)的(de)快速(su)檢測，整個(ge)檢測過程為3-4個(ge)小時。
    5.   優(you)勢(shi)1：序(xu)列資源豐(feng)富，除(chu)GenBank公(gong)布的(de)序(xu)列外，公司(si)還(hai)進行了大(da)量(liang)菌(jun)株(zhu)的(de)序(xu)列破(po)譯(yi)，從理(li)論(lun)上保證所(suo)選引(yin)物(wu)具(ju)有良(liang)好的(de)保守性和特(te)異(yi)性。

    6.   優(you)勢(shi)2：該(gai)系(xi)列試劑(ji)盒均經(jing)過大(da)量(liang)的(de)保守性及特(te)異(yi)性實驗驗證(zheng)，憑借(jie)公司(si)擁有的(de)豐富的(de)菌(jun)種資(zi)源，每(mei)壹(yi)種檢測試劑(ji)盒均經(jing)過了20余種標(biao)準菌(jun)株(zhu)和(he)臨(lin)床菌(jun)株(zhu)的(de)保守性驗證及40余(yu)種近(jin)緣標(biao)準菌(jun)株(zhu)和(he)臨(lin)床菌(jun)株(zhu)的(de)特(te)異(yi)性驗證，確保在使(shi)用(yong)過程中不(bu)會出(chu)現任何的(de)假(jia)陽性及假(jia)陰(yin)性報(bao)告結果。

反(fan)應五(wu)要素(su)：
參(can)加PCR反(fan)應的(de)物質(zhi)主(zhu)要有五種即引(yin)物(wu)、酶(mei)、dNTP、模板和Mg2+
引(yin)物(wu)：引(yin)物(wu)是(shi)PCR特(te)異(yi)性反(fan)應的(de)關鍵(jian)，PCR 產(chan)物(wu)的(de)特(te)異(yi)性取決(jue)於(yu)引(yin)物(wu)與模板DNA互(hu)補的(de)程度(du)。理(li)論(lun)上，只(zhi)要(yao)知道(dao)任何壹段(duan)模板DNA序(xu)列， 就(jiu)能(neng)按(an)其設計互(hu)補的(de)寡核苷酸(suan)鏈(lian)做(zuo)引(yin)物(wu)，利用PCR就(jiu)可(ke)將(jiang)模板DNA在體(ti)外大(da)量(liang)擴增。設計引(yin)物(wu)應遵(zun)循以(yi)下(xia)原(yuan)則(ze)：
①引(yin)物(wu)長度(du)： 15-30bp，常用為20bp左(zuo)右(you)。
②引(yin)物(wu)擴增跨度(du)： 以200-500bp為宜(yi)，特(te)定條件(jian)下(xia)可擴增長至10kb的(de)片段(duan)。
③引(yin)物(wu)堿基：G+C含量(liang)以(yi)40-60%為宜(yi)，G+C太少(shao)擴增效果不(bu)佳(jia)，G+C過多(duo)易出(chu)現非(fei)特(te)異(yi)條(tiao)帶(dai)。ATGC隨(sui)機(ji)分布，避免(mian)5個(ge)以(yi)上的(de)嘌呤(ling)或嘧(mi)啶核苷酸(suan)的(de)成串(chuan)排列。
④避免(mian)引(yin)物(wu)內部(bu)出(chu)現二級結(jie)構，避免(mian)兩(liang)條引(yin)物(wu)間互(hu)補，特(te)別(bie)是(shi)3'端(duan)的(de)互(hu)補，否(fou)則(ze)會形(xing)成(cheng)引(yin)物(wu)二聚(ju)體(ti)，產(chan)生(sheng)非(fei)特(te)異(yi)的(de)擴增條帶(dai)。
⑤引(yin)物(wu)3'端(duan)的(de)堿基(ji)，特(te)別(bie)是(shi)末及倒數第二個(ge)堿(jian)基，應嚴(yan)格要(yao)求配(pei)對，以(yi)避免(mian)因(yin)末端(duan)堿基(ji)不(bu)配(pei)對而導致(zhi)PCR失敗。
⑥引(yin)物(wu)中有或能(neng)加上合(he)適(shi)的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點(dian)， 被(bei)擴增的(de)靶(ba)序(xu)列有適(shi)宜的(de)酶(mei)切(qie)位(wei)點(dian)， 這(zhe)對(dui)酶(mei)切(qie)分析(xi)或分子克(ke)隆很(hen)有好處(chu)。
⑦引(yin)物(wu)的(de)特(te)異(yi)性：引(yin)物(wu)應與核酸(suan)序(xu)列數據庫的(de)其它(ta)序(xu)列無(wu)明(ming)顯同源性。
引(yin)物(wu)量：每條引(yin)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)0.1～1umol或10～100pmol，以(yi)低引(yin)物(wu)量產(chan)生(sheng)所(suo)需(xu)要的(de)結果(guo)為好(hao)，引(yin)物(wu)濃(nong)度(du)偏高會引(yin)起(qi)錯(cuo)配(pei)和非(fei)特(te)異(yi)性擴增，且可(ke)增加引(yin)物(wu)之間形(xing)成(cheng)二聚(ju)體(ti)的(de)機(ji)會。

半(ban)胱(guang)胺(an)酸(suan)蛋白酶(mei)蛋白-7抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： Caspase-7

鈣(gai)調節(jie)素(su)抗(kang)體(ti)（鈣調蛋白/鈣(gai)調素(su)） 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： Calmodulin

1號(hao)染(ran)色(se)體(ti)開放閱(yue)讀框181抗體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： C1orf181 

Ⅰ型補(bu)體(ti)受體(ti)抗體(ti)（C3b/C4b受體(ti)抗體(ti)） 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CD35

8型膠原(yuan)/內皮(pi)膠原(yuan)蛋白抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： Collagen VIII alpha 1

結(jie)合(he)轉(zhuan)化激(ji)活因(yin)子(zi)CITED1抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CITED1

細(xi)胞(bao)色(se)素(su)P450 2C9抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CYP2C9

細(xi)胞(bao)色(se)素(su)P450 2D6抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CYP2D6

血(xue)小板活化(hua)因(yin)子(zi)CTR9抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CTR9

前(qian)列環素(su)合(he)成酶(mei)抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CYP8A1

軟骨(gu)寡聚(ju)基質(zhi)蛋白抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： COMP

T淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)CD1A抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CD1A

磷(lin)酸(suan)化周期素(su)B1抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： Phospho-Cyclin B1 (Ser126)

胞(bao)漿型磷(lin)脂(zhi)酶(mei)A2抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CPLA2 beta

酯(zhi)轉(zhuan)移(yi)蛋白抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CETP

緊(jin)密(mi)連(lian)接(jie)蛋白6抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： Claudin 6

磷(lin)酸(suan)化緊密連(lian)接(jie)蛋白6抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： phospho-Claudin 6(Tyr219)

著絲(si)粒(li)蛋白T抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CENPT

染(ran)色(se)體(ti)相(xiang)關(guan)蛋白2抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CAPD2

著絲(si)粒(li)蛋白P抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CENPP

同豬脊病(bing)毒梅(mei)拉哥(ge)病(bing)毒PCR檢測試劑(ji)盒說明書(shu)細胞(bao)分裂周期相(xiang)關(guan)蛋白5抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CDCA5

染(ran)色(se)體(ti)相(xiang)關(guan)蛋白2抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CAPG2

細(xi)胞(bao)周(zhou)期調控(kong)因(yin)子(zi)10抗(kang)體(ti) 英(ying)文(wen)縮寫(xie)： CDC10