核(he)桃(tao)仁(ren)探針(zhen)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)保存

實驗流程：
1. 整(zheng)個(ge)檢測(ce)過程應(ying)嚴(yan)格(ge)按(an)照本(ben)說(shuo)明(ming)書要求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試劑(ji)準備(bei)區(qu)、樣(yang)本處理(li)區(qu)和PCR擴(kuo)增區進(jin)行(xing)操(cao)作，各區實驗服、儀(yi)器 、耗(hao)材應(ying)獨(du)立(li)使用，不能(neng)混用；實驗用吸(xi)頭采(cai)用帶濾(lv)芯(xin)吸(xi)頭；樣(yang)本處理(li)區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生物(wu)安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本處理(li)在(zai)生物(wu)安(an)全(quan)櫃中(zhong)進(jin)行(xing)操(cao)作；三(san)個區(qu)應(ying)該(gai)配(pei)有紫(zi)外(wai)線殺菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣(yang)本處理(li)過程應(ying)在(zai)0-4℃條(tiao)件下操作，且(qie)完(wan)成實驗後立(li)即(ji)上(shang)機(ji)檢測(ce)；樣(yang)本處理(li)過程中(zhong)使用的器(qi)具耗(hao)材應(ying)經過無(wu)核(he)酶(mei)處理(li)。
3. 每次(ci)實驗應(ying)該(gai)設(she)置陰(yin)、陽(yang)性(xing)對照。
4. 試劑(ji)盒(he)所有試劑(ji)在(zai)使用(yong)前應(ying)該(gai)在(zai)常溫(wen)下充(chong)分(fen)融化(hua)混勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試劑(ji)盒(he)內所配(pei)陰(yin)性(xing)和陽(yang)性(xing)對照在(zai)壹次(ci)使用前(qian)應(ying)全(quan)部(bu)轉移至(zhi)標(biao)本(ben)準備(bei)區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防止(zhi)熒(ying)光幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手(shou)直接接觸(chu)PCR反應(ying)管(guan)，並應(ying)避(bi)免(mian)在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任(ren)何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按(an)照(zhao)本說(shuo)明(ming)書相(xiang)關要求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置；不(bu)同(tong)批號(hao)試劑(ji)不(bu)能混用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒(ying)光定(ding)量PCR儀(yi)參(can)數(shu)設置中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過程中(zhong)產品的廢棄(qi)物(wu)應(ying)該(gai)進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處理(li)後(hou)方可(ke)丟(diu)棄(qi)。

特(te)點：
1. 即(ji)開即用，用(yong)戶(hu)只需要提供病毒樣(yang)品。
2. 根據地(di)黃(huang)保(bao)守序列設(she)計(ji)的專壹(yi)性(xing)引物(wu)，與(yu)相(xiang)關病毒無(wu)交叉(cha)反應(ying)。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝/反應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢測(ce)，避(bi)免(mian)後(hou)續汙(wu)染。
5. 本(ben)試劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體(ti)系(xi)的熒(ying)光定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產品只適(shi)用於科研，不能(neng)用於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)。
使(shi)用(yong)方法：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的采(cai)集與(yu)預培(pei)養(yang)按(an)照樣(yang)品的采(cai)集與(yu)預培(pei)養(yang)按(an)照《食(shi)品衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗阪崎腸(chang)桿菌檢驗要求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品：用(yong)無(wu)菌註(zhu)射(she)器抽(chou)取(qu)受(shou)檢者(zhe)靜脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸(suan)鈉)抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即(ji)混勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞(fen)便(bian)置於(yu)滅(mie)菌的收集管(guan)中(zhong)送(song)檢。
4、病竈部(bu)位樣(yang)品：取(qu)發(fa)病部(bu)位新鮮(xian)滲(shen)出物(wu)、粘(zhan)液(ye)膿血(xue)送(song)檢。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋度(du)為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常高(gao)，因(yin)此下列稀(xi)釋操(cao)作壹定(ding)要在(zai)獨(du)立(li)的區(qu)域進(jin)行(xing)，千(qian)萬不能(neng)汙(wu)染樣(yang)品或(huo)本(ben)試劑(ji)盒(he)的其他成分(fen)）。為增加(jia)產品穩(wen)定(ding)性(xing)和避(bi)免(mian)擴(kuo)散(san)傳染(ran)性(xing)病原，本產品不(bu)提(ti)供活體樣(yang)品做陽(yang)性(xing)對照，只提供可(ke)以(yi)直接(jie)使(shi)用(yong)的 DNA段(duan)作為陽(yang)性(xing)對照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯(xin)槍頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光 PCR 模板稀(xi)釋液(ye)（用帶芯(xin)槍頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
5. 換(huan)槍(qiang)頭，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照(上(shang)步稀(xi)釋所(suo)得(de))，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
6. 換(huan)槍(qiang)頭，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照到(dao) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽(yang)性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
7. 重復(fu)上(shang)面的操(cao)作直到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀(xi)釋度(du)的陽(yang)性(xing)對照。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
註(zhu)：上(shang)述(shu)樣(yang)品建(jian)議經過增菌後，收集培(pei)養(yang)物(wu)用(yong)於檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可(ke)采(cai)用PCR試劑(ji)盒(he)配備的DNA抽(chou)提液(ye)，按以(yi)下說明(ming)進(jin)行(xing)DNA核(he)酸(suan)的粗(cu)提。也可(ke)采(cai)購上(shang)海(hai)澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技有限公(gong)司(si)生產的DNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱法-熒(ying)光配套)或(huo)其他合適(shi)的商(shang)業化產品，並按照相(xiang)應(ying)試劑(ji)盒(he)說明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體培(pei)養(yang)物(wu)：取(qu)液(ye)體培(pei)養(yang)物(wu)100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養(yang)物(wu)：挑取(qu)單(dan)克隆(long)菌落與(yu)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品：挑取(qu)米(mi)粒(li)大(da)小(xiao)糞便於滅(mie)菌離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
4、其他液(ye)體標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中(zhong)加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對照和陰(yin)性(xing)對照為(wei)已經抽(chou)提好的核(he)酸(suan)(無(wu)需提(ti)取(qu))，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加(jia)入到(dao)反應(ying)體(ti)系(xi)中(zhong)即可(ke)。由(you)於(yu)陽(yang)性(xing)對照濃(nong)度(du)較(jiao)高，建議在(zai)樣(yang)品制(zhi)備區域加(jia)入陽(yang)性(xing)對照。 
Li-7 人(ren)肝癌細(xi)胞(bao)心得(de)安(an)乙(yi)二(er)醇(chun)Propranolol glycol質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

WISH人(ren)羊(yang)膜(mo)細(xi)胞(bao) Human WISH cells MEM(GIBCO)+10%FBS鹽(yan)酸心得(de)安(an)Propranolol 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

PROK1 Protein Human 重組人(ren) EG-VEGF / prokineticin-1 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽)(R)-(+)-鹽(yan)酸心得(de)安(an)(R)-(+)-Propranolol 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

人(ren)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao);293 [HEK-293] GH3, 大(da)鼠(shu)垂(chui)體生長激(ji)素(su)腺(xian)瘤 Rattus外(wai)消旋(xuan)心得(de)安(an)β-D-葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)酸(suan)鈉鹽(yan)rac Propranolol β-D-Glucuronide  Salt質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

小(xiao)鼠(shu)誘導性(xing)多潛能(neng)幹(gan)細(xi)胞(bao);PUMC-mips-B2外(wai)消旋(xuan)7-羥基(ji)心得(de)安(an)rac 7-Hydroxy Propranolol質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口
人(ren)胃(wei)癌細(xi)胞(bao);MGC-803羥基(ji)伐(fa)倫(lun)克林Hydroxy Varenicline質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

Tca-8113細(xi)胞(bao)，舌鱗(lin)癌細(xi)胞(bao) 人(ren)低分(fen)化胃(wei)癌細(xi)胞(bao),BGC-823細(xi)胞(bao) 盤(pan)羊(yang)皮(pi)膚細(xi)胞(bao);ASHS2N-氧(yang)基匹(pi)格(ge)列酮(tong)Pioglitazone N-Oxide質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

小(xiao)鼠(shu)胰腺(xian)癌細(xi)胞(bao)(B類(lei));Pan02酮(tong)基(ji)匹(pi)格(ge)列酮(tong)標(biao)記(ji)d4Keto-Pioglitazone - Labeled d4質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 羥基(ji)匹(pi)格(ge)列酮(tong)標(biao)記(ji)d4Hydroxy Pioglitazone Labeled d4質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口

人(ren)表(biao)皮(pi)角(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao)RNAHEK miRNA5 μg匹(pi)格(ge)列酮(tong)標(biao)記(ji)的d4Pioglitazone - Labeled d4質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國進(jin)口
人(ren)肺(fei)腺(xian)癌細(xi)胞(bao);Calu-3 大(da)鼠(shu)氣管(guan)上(shang)皮細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL甘草(cao)酸(suan)(β型(xing)),18beta-甘草(cao)酸(suan)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%18-beta-glycyrrheticacid

支(zhi)氣管(guan)上(shang)皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)甘草(cao)酸(suan)(β型(xing)),18beta-甘草(cao)酸(suan)(標(biao)準品(pin))質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標(biao)準品(pin)18-beta-glycyrrheticacid

REG1A Others Cynomolgus 食(shi)蟹猴 REG1A / PSPS 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) OXOID胰(yi)蛋(dan)白(bai)腖質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：BR，進(jin)口Tryptone

中(zhong)國倉鼠卵巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞(ya)系(xi)克隆(long));CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNAβ-萘黃(huang)酮(tong)質量規(gui)格(ge)：>99%,進(jin)分(fen)β-Naphthoflavone

SK-MES-1細(xi)胞(bao)，人(ren)肺(fei)鱗(lin)癌細(xi)胞(bao) 狗(gou)腎(shen)細(xi)胞(bao),MDCK細(xi)胞(bao) CM-M066小(xiao)鼠(shu)膀胱成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL石(shi)斛(hu)堿(jian)（標(biao)準品(pin)）質(zhi)量規(gui)格(ge)：HPLC≥97%，標(biao)準品(pin)Dendrobine
核(he)桃(tao)仁(ren)探針(zhen)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑(ji)盒(he)保存KLK7 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) KLK7 / Kallikrein 7 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 金(jin)絲shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：100克

人(ren)前(qian)脂(zhi)肪(fang)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL2,4,4-三(san)基-1-務1;雙(shuang)異 2,4,4-TriMqthyl-1-pqntqnq

MC細(xi)胞(bao)，大鼠巨噬(shi)細(xi)胞(bao) THP-1(人(ren)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)) 中(zhong)國倉鼠卵巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞(ya)系(xi)克隆(long));CHO-HCV-NS4A脫(tuo)氫(qing)乙(yi)酸shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：500克

EFNB1 Protein Mouse 重組小(xiao)鼠(shu) Ephrin-B
儲(chu)存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收集、處理(li)及保(bao)存(cun)方法
1. 血(xue)清(qing)：使用不含(han)熱原和內(nei)毒(du)素(su)的試管(guan)，操(cao)作過程中(zhong)避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收集血(xue)液(ye)後，3000 轉離心10 分(fen)鐘將(jiang)血清和紅細(xi)胞(bao)迅速小心(xin)地(di)分(fen)離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽(yan)或(huo)肝素(su)抗凝(ning)。3000 轉離心30 分(fen)鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清液(ye)：3000 轉離心10 分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚(ju)合物(wu)。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組織(zhi)加(jia)入適(shi)量生理鹽(yan)水搗碎。3000 轉離心10 分(fen)鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存(cun)：如果樣(yang)本收集後(hou)不(bu)及時(shi)檢測(ce)，請按(an)壹(yi)次(ci)用量分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)，在(zai)室溫下解凍(dong)並確保樣(yang)品均(jun)勻地(di)充(chong)分(fen)解凍(dong)。