金(jin)錢(qian)草(cao)染(ran)料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)*

儲存條件：
14℃或－20℃樣品(pin)收(shou)集、處理及保(bao)存方(fang)法
1. 血(xue)清：使(shi)用(yong)不含熱(re)原和內毒素(su)的試管(guan)，操(cao)作過(guo)程(cheng)中避免任(ren)何(he)細胞刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離心10 分鐘將血(xue)清和(he)紅(hong)細胞迅速(su)小(xiao)心地(di)分(fen)離。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽或肝(gan)素(su)抗(kang)凝。3000 轉(zhuan)離心30 分鐘取上清(qing)。
3. 細胞上清(qing)液(ye)：3000 轉(zhuan)離心10 分鐘去除顆粒和聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將組(zu)織加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生理鹽水(shui)搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離心10 分鐘取上清(qing)。
5. 保存：如果(guo)樣(yang)本收集後(hou)不及時檢測(ce)，請按(an)壹次(ci)用(yong)量(liang)分裝(zhuang)，凍(dong)存於(yu)-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍並(bing)確保樣(yang)品(pin)均勻(yun)地(di)充分解凍。

特(te)點：
1. 即開即用，用(yong)戶只(zhi)需(xu)要(yao)提供(gong)病毒樣品(pin)。
2. 根據(ju)地(di)黃保(bao)守(shou)序(xu)列設計(ji)的專壹性(xing)引(yin)物(wu)，與相關病毒無交叉(cha)反應。
3. 靈(ling)敏度可(ke)以達(da)到幾(ji)百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避免後(hou)續(xu)汙(wu)染。
5. 本試劑盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反應體(ti)系的熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研，不(bu)能(neng)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使用方(fang)法：
壹、樣品(pin)采(cai)集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的采集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照樣(yang)品(pin)的采集與預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照《食(shi)品(pin)衛(wei)生微(wei)生物學檢驗(yan)阪崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢驗(yan)要(yao)求(qiu)進行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣(yang)品(pin)：用(yong)無菌註(zhu)射(she)器(qi)抽取受檢者靜脈(mai)血(xue)2mL，註入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝管(guan)，立(li)即(ji)混勻(yun)。
3、糞便樣(yang)品(pin)：取糞便置(zhi)於(yu)滅菌(jun)的收集管(guan)中(zhong)送(song)檢。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣品(pin)：取發(fa)病部(bu)位(wei)新鮮(xian)滲出(chu)物、粘液(ye)膿(nong)血(xue)送(song)檢。
壹、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性(xing)對(dui)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀(xi)釋(shi)度為例(li)）
1. 註意(yi)：由於(yu)標(biao)準品(pin)濃(nong)度非(fei)常(chang)高，因此下列稀(xi)釋(shi)操作壹定(ding)要(yao)在獨立(li)的區域(yu)進行(xing)，千萬(wan)不(bu)能汙(wu)染樣品(pin)或(huo)本試劑盒(he)的其(qi)他成分）。為增(zeng)加產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)避免擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病原，本產(chan)品(pin)不(bu)提供(gong)活(huo)體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照，只(zhi)提供(gong)可以直(zhi)接(jie)使用(yong)的 DNA段作為陽(yang)性(xing)對(dui)照。
2. 標(biao)記 6 個(ge)離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯(xin)槍(qiang)頭分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀(xi)釋(shi)液(ye)（用(yong)帶芯(xin)槍(qiang)頭，下(xia)同）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
5. 換槍(qiang)頭，在 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照(上步稀(xi)釋(shi)所得)，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
6. 換槍(qiang)頭，在 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照到 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的操作直到得到 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放(fang)冰(bing)上待(dai)用。
註：上述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌後，收集培(pei)養物用(yong)於(yu)檢測(ce)。 
二(er)、DNA提取：
可采用PCR試劑盒(he)配(pei)備的DNA抽提液(ye)，按(an)以下(xia)說(shuo)明進行(xing)DNA核(he)酸的粗提。也可(ke)采(cai)購(gou)上海澤葉(ye)生物科(ke)技有(you)限公(gong)司(si)生產(chan)的DNA提取試劑盒(he)(過(guo)柱(zhu)法-熒光(guang)配(pei)套(tao))或其(qi)他合適(shi)的商業化產(chan)品(pin)，並(bing)按照相應試劑盒(he)說(shuo)明進行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體(ti)培養物：取液(ye)體(ti)培養物100μL加到1.5mL無菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清(qing)，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培養物：挑取單(dan)克隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
3、糞便樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取米粒大(da)小(xiao)糞便於(yu)滅菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生理鹽水(shui)，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
4、其(qi)他液(ye)體(ti)標(biao)本：取標(biao)本2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
註：陽(yang)性(xing)對(dui)照和(he)陰性(xing)對(dui)照為已(yi)經(jing)抽(chou)提好的核(he)酸(無需提取)，直接取5μL加入(ru)到反應體(ti)系中即可。由於(yu)陽(yang)性(xing)對(dui)照濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建(jian)議(yi)在樣品(pin)制(zhi)備區域(yu)加(jia)入(ru)陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
兔腎細胞;RK13鈉 Tazobactam 質(zhi)量(liang)規格：含量(liang)>90%%,BR

V Others Canine 狗 CCN3 / V 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 鈉 (標(biao)準品(pin))Tazobactam 質(zhi)量(liang)規格：含量(liang)測定(ding)，標(biao)準品(pin)

CL-0133KLE(人內膜(mo)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶×2D-環D-Cycloserine質(zhi)量(liang)規格：>98%,效價>900µg/mg,BR,可用於(yu)細胞培養(yang)

P3/NS1/1-Ag4-1細胞，鼠骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞 人B細胞瘤(liu)細胞,RAMOS(RA.1)細胞 小(xiao)鼠子細胞;U14D-環(標(biao)準品(pin))D-Cycloserine質(zhi)量(liang)規格：標(biao)準品(pin)用(yong)於(yu)含量(liang)測定(ding)

ARPE-19(人視網膜(mo)上皮(pi)細胞) 5×106cells/瓶×2Tetracycline 質(zhi)量(liang)規格：Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade
抗真菌溶液(ye)AMS乳酸Ciprofloxacin lactate質(zhi)量(liang)規格：美(mei)國進口(kou)

GALK1 Others Human 人 GALK1 / Galactokinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 甲(jia)酰Formyl Ciprofloxacin質(zhi)量(liang)規格：美(mei)國進口(kou)

人絨(rong)癌細胞;JEG-36'-(二(er)乙(yi)氨基)-1',2'-苯(ben)並(bing)熒烷(>98.0%(GC)(T))6'-(Diethylami)-1',2'-benzofluoran質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(GC)(T)

LLC Lewis細胞，肺(fei)癌細胞 人胃癌細胞,(+)9811細胞 猴腎細胞;vero IgRCD4-2'-(二(er)芐氨基)-6'-(二(er)乙(yi)氨基)熒烷(>98.0%(HPLC)(T))2'-(Dibenzylami)-6'-(diethylami)fluoran質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(HPLC)(T)

雜交瘤(liu)(B類(lei));Z172A4C4C6F3G123',6'-二(er)甲(jia)氧(yang)基熒(ying)烷(>98.0%(HPLC))3',6'-Dimethoxyfluoran質(zhi)量(liang)規格：>98.0%(HPLC)
RM1(大(da)鼠(shu)肌肉成(cheng)纖維樣(yang)細胞) 5×106cells/瓶×2*基乙(yi)酸(>99%,BR)質(zhi)量(liang)規格：>99%,BRTrimethylacetic acid

H4(人腦神(shen)經(jing)膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性(xing)細胞白血(xue)病細胞)5×106cells/瓶×2 小(xiao)耳豬(zhu)肺(fei)細胞;SEP-L1轉(zhuan)染試劑（溶(rong)液(ye)）質(zhi)量(liang)規格：>95%，分子生物學級Transfection Reagents-Biofection

小(xiao)鼠樹突(tu)狀細胞肉瘤(liu)低轉(zhuan)移(yi)細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定(ding)過(guo)表(biao)達(da));DG6-VAP33-GFP反式肉桂(gui)醛(quan)(>95%，BR)質(zhi)量(liang)規格：>95%，BRtrans-Cinnamaldehyde

人視網膜(mo)色素(su)上皮(pi)細胞(HRPEpiC)(5×105 )富勒1 C60()，球 C60質(zhi)量(liang)規格：>99.5%(HPLC)Fullerene C60 (pure)

CM-M051小(xiao)鼠頸上皮(pi)細胞*培養(yang)基(ji)100mL焦1酸(>45%，BR)質(zhi)量(liang)規格：>45%，BRPyrophosphoric acid
金錢草染料(liao)法PCR鑒(jian)定(ding)試劑盒(he)*人肺(fei)間充質(zhi)幹細胞裂解物HPMSCL對(dui)藍，英(ying)文名(ming)或(huo)英文縮寫：BCIP，級別：CP，98.5%，規格：1毫克

CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 硼完四(si)輕溶液(ye)(+4℃) Borcnq-tqtrcxy7furcn complqx 14044-62-6

615小(xiao)鼠癌瘤(liu)株;Ca759兒價分桔(ju)黃四(si)鈉(na)，英文名或(huo)英(ying)文(wen)縮寫：xyleol Orange tetrawo7ium salt，級別：高，規格：5克

L-02細胞，
實驗流程：
1. 整個(ge)檢測(ce)過(guo)程(cheng)應嚴格按(an)照(zhao)本說明書要求分(fen)別(bie)在試劑準備區、樣(yang)本處理區和(he)PCR擴增區進行(xing)操(cao)作，各(ge)區實(shi)驗(yan)服、儀器(qi) 、耗材(cai)應獨立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭(tou)采用帶濾芯(xin)吸(xi)頭(tou)；樣本處理區應(ying)配(pei)有(you)生物安全(quan)櫃，樣(yang)本處理在生物安全(quan)櫃中(zhong)進行(xing)操(cao)作；三個(ge)區應(ying)該配有(you)紫(zi)外線(xian)殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避免RNA降(jiang)解，樣本處理過(guo)程(cheng)應在0-4℃條件下操(cao)作，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗(yan)後立(li)即(ji)上機(ji)檢測(ce)；樣(yang)本處理過(guo)程(cheng)中使用的器(qi)具耗材(cai)應經(jing)過(guo)無(wu)核(he)酶處理。

3. 每次(ci)實(shi)驗(yan)應(ying)該設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性(xing)對(dui)照。
4. 試劑盒(he)所(suo)有(you)試劑在使用前(qian)應(ying)該在常溫下充分融(rong)化(hua)混勻，並(bing)應瞬時離心。
5. 試劑盒(he)內所(suo)配(pei)陰性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照在壹次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至標(biao)本準備區，並(bing)單(dan)獨存放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光(guang)幹擾，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避免在PCR反應管(guan)上進行(xing)任(ren)何(he)標(biao)記。
7. 儀器(qi) 擴增相關參數應按(an)照(zhao)本說明書相關要求進行(xing)設(she)置；不同批(pi)號(hao)試劑不(bu)能混用(yong)。
8. ABI系列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參數設置(zhi)中(zhong)不選ROX校正(zheng)，淬滅基(ji)因選擇None。
9. 實驗過(guo)程(cheng)中產(chan)品(pin)的廢棄(qi)物(wu)應(ying)該進行(xing)無(wu)害(hai)化(hua)處理後方(fang)可(ke)丟(diu)棄(qi)。