柿蒂探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試劑盒(he)說明(ming)書(shu)

儲存(cun)條(tiao)件：
14℃或(huo)－20℃樣品收(shou)集、處理及保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血(xue)清：使(shi)用(yong)不(bu)含(han)熱原和(he)內(nei)毒(du)素(su)的試管，操作過(guo)程(cheng)中避(bi)免任何(he)細(xi)胞刺激(ji)，收(shou)集血(xue)液後，3000 轉離(li)心10 分鐘將(jiang)血(xue)清和(he)紅(hong)細胞(bao)迅速(su)小心地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分鐘取(qu)上清。
3. 細胞上清液(ye)：3000 轉離(li)心10 分鐘去除顆(ke)粒(li)和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織勻(yun)漿：將(jiang)組(zu)織加(jia)入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽水搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分鐘取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如果(guo)樣本(ben)收(shou)集後不(bu)及(ji)時(shi)檢測，請按壹(yi)次用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存(cun)於-20℃，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)，在室(shi)溫下解凍(dong)並確(que)保(bao)樣品均勻地充(chong)分解凍(dong)。

特(te)點：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶只(zhi)需要提(ti)供(gong)病毒(du)樣品。
2. 根(gen)據地黃保(bao)守序(xu)列設(she)計的(de)專壹(yi)性引(yin)物(wu)，與相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。
3. 靈敏(min)度(du)可以(yi)達(da)到幾百(bai)拷(kao)貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹管式(shi)熒光(guang)定量(liang) PCR 檢測，避(bi)免後續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試劑盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反應(ying)體系(xi)的熒光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只(zhi)適(shi)用(yong)於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於臨(lin)床診斷(duan)。

使(shi)用(yong)方法(fa)：
壹、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yu)培養按(an)照樣品的采集與預(yu)培養按(an)照《食品(pin)衛(wei)生微(wei)生物(wu)學檢驗阪崎腸桿(gan)菌檢驗要求進行(xing)。
2、血(xue)液樣品：用(yong)無菌註(zhu)射(she)器抽取(qu)受檢者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝(ning)管，立即(ji)混(hun)勻。
3、糞(fen)便(bian)樣品：取(qu)糞(fen)便(bian)置(zhi)於滅菌的(de)收(shou)集管中送檢。
4、病竈部位樣品：取(qu)發病部(bu)位(wei)新鮮(xian)滲(shen)出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血(xue)送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀釋(shi)度為(wei)例）
1. 註(zhu)意(yi)：由(you)於標(biao)準品(pin)濃度(du)非常高，因(yin)此下列稀釋(shi)操作壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立的(de)區域(yu)進行(xing)，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙(wu)染(ran)樣品或(huo)本(ben)試劑盒(he)的(de)其(qi)他成分）。為增(zeng)加(jia)產(chan)品穩定性和(he)避(bi)免擴散(san)傳(chuan)染性病原，本(ben)產(chan)品不(bu)提(ti)供活體(ti)樣品做陽(yang)性對照，只(zhi)提(ti)供(gong)可以(yi)直接使(shi)用(yong)的 DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性對照。
2. 標(biao)記 6 個離(li)心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭分別加入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭，下同）。
4. 在 7 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
5. 換槍頭，在 6 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照(上步(bu)稀釋(shi)所得)，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照到 5 號(hao)管中，充分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的陽(yang)性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作直到得到 6 個稀釋(shi)度的(de)陽(yang)性對照。放(fang)冰上待用(yong)。
註(zhu)：上述樣品建(jian)議(yi)經過增(zeng)菌後，收(shou)集培養物(wu)用(yong)於檢測。 
二、DNA提取(qu)：
可采(cai)用(yong)PCR試劑盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提液，按(an)以(yi)下說明(ming)進行(xing)DNA核酸的粗(cu)提(ti)。也(ye)可采(cai)購(gou)上海(hai)澤(ze)葉生(sheng)物(wu)科技(ji)有(you)限公(gong)司生產的DNA提取(qu)試劑盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配(pei)套(tao))或(huo)其(qi)他合(he)適的(de)商業(ye)化產品，並按(an)照相(xiang)應(ying)試劑盒(he)說明(ming)進行(xing)操作。
1、液體培養物(wu)：取(qu)液體(ti)培養物(wu)100μL加到1.5mL無菌離(li)心管中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加(jia)入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體培養物(wu)：挑取(qu)單克隆菌落(luo)與50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：挑取(qu)米粒(li)大(da)小(xiao)糞(fen)便(bian)於滅菌離(li)心管中，加入0.5mL生理鹽水，振蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分鐘，棄(qi)上清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其(qi)他液(ye)體標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對照和(he)陰性對照為已(yi)經抽提(ti)好(hao)的核(he)酸(無需提取(qu))，直接取(qu)5μL加入到反(fan)應(ying)體系(xi)中即可。由(you)於陽(yang)性對照濃度(du)較(jiao)高(gao)，建(jian)議(yi)在樣品制備(bei)區域(yu)加入陽(yang)性對照。 
  Ondansetron HCl  質量(liang)規(gui)格：>99%,BR,可用(yong)於細(xi)胞(bao)培養 小鼠天冬酸轉(zhuan)酶(mei)(AST)ELISA試劑盒(he) ，英文名： AST ELISA Kit

（標(biao)準品(pin)）  Ondansetron HCl  質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準品(pin) 豚(tun)鼠血(xue)清(NO)ELISA檢測試劑盒(he)guineapigniicoxide,NOELISAKit 96T/48T

  Ornidazole  質量(liang)規(gui)格：>99%,BR 牛(niu)內(nei)皮(pi)型合(he)成酶(eNOS)試劑盒(he) Bovine Endothelial niic oxide syhase,eNOS ELISA Kit

（標(biao)準品(pin)）  Ornidazole  質量(liang)規(gui)格：HPLC>99%,標(biao)準品(pin) 英文名稱Human-TELISAKit人肌鈣蛋(dan)白(bai)-T(Tn-T)規格：96T/48T

  Oxaliplatin  質量(liang)規(gui)格：>99%,BR，細胞培養級(ji) 動物(wu)軟組(zu)織線粒(li)體(ti)可溶(rong)性總蛋白制備(bei)試劑盒(he)20

（標(biao)準品(pin)）  Oxaliplatin  質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準品(pin) RatP-SelectinELISA試劑盒(he)大(da)鼠P選擇素(su)(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

  Oxiconazole Nitrate  質量(liang)規(gui)格：度>99% 小鼠天冬酸基(ji)轉移(yi)酶(AST)ELISA試劑盒(he) ，英文名： AST ELISA Kit

鹽酸(suan)  Oxytetracycline HCl  質量(liang)規(gui)格：>95%,BR 小鼠白介(jie)素(su)18(IL-18)ELISA檢測試劑盒(he)MouseIerleukin18,IL-18ELISAKit 96T/48T

鹽酸(suan)(標(biao)準品(pin))  Oxytetracycline HCl  質量(liang)規(gui)格：效價測(ce)定 人骨涎蛋白(bai)(BSP)試劑盒(he) Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit

,醋酸催產(chan)素(su)  Oxytocin Acetate  質量(liang)規(gui)格：>97%,BR Ratferritin,FEELISAKit大(da)鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T
Doxapram  monohydrate  中文名：  分子(zi)式(shi)：C24H33ClN2O3    中文名稱   方法(fa)   規格

Dorzolomide   中文名：鹽酸(suan)多佐(zuo)胺(an)  分子(zi)式(shi)：C10H17ClN2O4S3    豬(Dex)ELISAKit  

Donepezil   中文名：  分子(zi)式(shi)：C24H30ClNO3    豬D二聚體(D2D)ELISAKit              

Domperidone  中文名：  分子(zi)式(shi)：C22H24ClN5O2    豬生長激素(su)釋放(fang)肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒(he)  

Docosanoic acid  中文名：二十二(er)烷(wan)酸  分子(zi)式(shi)：C22H44O2    豬生長激素(su)釋放(fang)多肽(GHRP)ELISA試劑盒(he)
曲(qu)洛司(si)坦(tan)(標(biao)準品(pin))  Trilostane  質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準品(pin) Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA試劑盒(he)大(da)鼠β2微(wei)球(qiu)蛋白(bai)(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

醋酸  Triptorelin Acetate  質量(liang)規(gui)格：度大(da)於(yu)98% Ratβ-Defensins,β-DFELISAKit大(da)鼠β-防禦(yu)素(su)(β-DF)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

鹽酸(suan)  Vancomycin HCl  質量(liang)規(gui)格：≥900μg/mg,USP33,BR Ratβ-Defensins,β-DFELISA試劑盒(he)大(da)鼠β-防禦(yu)素(su)(β-DF)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

鹽酸(suan)(標(biao)準品(pin))  Vancomycin HCl  質量(liang)規(gui)格：含(han)量(liang)測(ce)定 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit大(da)鼠β血(xue)小板(ban)球(qiu)蛋白(bai)/β血(xue)栓環(huan)蛋白(bai)(β-TG)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

凡(fan)德他尼(ni)  Vandetanib   質量(liang)規(gui)格：>99%,可用(yong)於細(xi)胞(bao)培養 Ratβ-Thromboglobulin,β-TGELISA試劑盒(he)大(da)鼠β血(xue)小板(ban)球(qiu)蛋白(bai)/β血(xue)栓環(huan)蛋白(bai)(β-TG)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

伐倫克林(lin)  Varenicline Tartrate  質量(liang)規(gui)格：>98% Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit大(da)鼠的牛(niu)血(xue)清白(bai)蛋(dan)白殘(can)留檢測ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

伐倫克林(lin)(標(biao)準品(pin))  Varenicline Tartrate  質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標(biao)準品(pin) Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISA試劑盒(he)大(da)鼠的牛(niu)血(xue)清白(bai)蛋(dan)白殘(can)留檢測ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

長春瑞賓/重(zhong)長春瑞賓  Vinorelbine Tartrate  質量(liang)規(gui)格：>98%,USP,BR Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人絲狀血(xue)球(qiu)凝(ning)集素(su)(FHA)ELISA試劑盒(he)

重(zhong)長春瑞賓(標(biao)準品(pin))  Vinorelbine Tartrate  質量(liang)規(gui)格：HPLC≥98%,標(biao)準品(pin) Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit大(da)鼠/蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T

  Voriconazole  質量(liang)規(gui)格：>99%,BR Reatserine/threonineproteinkinase,STKELISA試劑盒(he)大(da)鼠/蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒(he)規(gui)格：96T/48T
柿蒂探(tan)針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試劑盒(he)說明(ming)書(shu)Halowax 1001，10ng/ul 標(biao)準品(pin) Benzo(a)anthraceneD12  10ng/ul於環(huan)己(ji)烷(wan)，10ML 特(te)征(zheng)形(xing)態(tai) 液態

Aroclor-Mix 1242,1254,1260 1:1:1,10ng/ul Benzo(a)anthracene  10ng/ul於環(huan)己(ji)烷(wan),10ML 特(te)征(zheng)形(xing)態(tai) 液態

Aroclor 5060,10ng/ul 標(biao)準品(pin) Anthracene  10ng/ul於環(huan)己(ji)烷(wan),10ML 特(te)征(zheng)形(xing)態(tai) 液態
實驗流程(cheng)：
1. 整個檢測過程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按照本(ben)說明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分別在試劑準備(bei)區、樣本(ben)處理區和(he)PCR擴增(zeng)區進行(xing)操作，各(ge)區實驗(yan)服(fu)、儀器 、耗(hao)材(cai)應(ying)獨(du)立使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混用(yong)；實驗(yan)用(yong)吸頭采用(yong)帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣本(ben)處理區應(ying)配有(you)生(sheng)物(wu)安全櫃(gui)，樣本(ben)處理在生物(wu)安全櫃(gui)中(zhong)進行(xing)操作；三個(ge)區應(ying)該配有(you)紫(zi)外(wai)線殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為避(bi)免RNA降(jiang)解，樣本(ben)處理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件下操作，且完成實驗後立即(ji)上機檢測；樣本(ben)處理過程(cheng)中使(shi)用(yong)的器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應(ying)經過無(wu)核酶(mei)處理。

3. 每(mei)次實(shi)驗(yan)應(ying)該設(she)置(zhi)陰、陽(yang)性對照。
4. 試劑盒(he)所(suo)有(you)試劑在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該在常溫下充分融化混勻，並應(ying)瞬(shun)時(shi)離(li)心。
5. 試劑盒(he)內(nei)所(suo)配陰(yin)性和(he)陽(yang)性對照在壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準備(bei)區，並單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為防止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免裸手(shou)直接接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管，並應(ying)避(bi)免在PCR反應(ying)管上進行(xing)任何(he)標(biao)記。
7. 儀器 擴增(zeng)相(xiang)關(guan)參數應(ying)按照本(ben)說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同批號(hao)試劑不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列熒光(guang)定量(liang)PCR儀參數設(she)置(zhi)中不(bu)選(xuan)ROX校(xiao)正，淬滅基(ji)因選(xuan)擇None。
9. 實驗過程(cheng)中產品(pin)的廢棄(qi)物(wu)應(ying)該進行(xing)無害化處理後方可丟(diu)棄(qi)。