使(shi)君(jun)子(zi)染料法PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)

產(chan)品(pin)及特(te)點(dian)：
本產(chan)品(pin)包(bao)含(han)Taq DNA聚(ju)合(he)酶、dNTPs、MgCl2、反(fan)應緩(huan)沖液，濃度為(wei)2×。具(ju)有(you)快(kuai)速簡便、靈敏(min)度高、特(te)異性強(qiang)、穩(wen)定性好(hao)等(deng)優點(dian)，可大限(xian)度的(de)減少(shao)人(ren)為誤(wu)差(cha)。使(shi)用(yong)時只需加入DNA模(mo)板和(he)引物既可(ke)。使(shi)用(yong)方便快(kuai)捷，能(neng)避(bi)免PCR操作過程(cheng)中的汙染(ran)，使(shi)用(yong)時只需取(qu)適(shi)量(liang)2×TaqPCR MasterMix溶(rong)液，加入模板和(he)引物，並加入去(qu)離子(zi)水補(bu)足(zu)體(ti)積，使(shi)MasterMix溶(rong)液濃(nong)度為(wei)1×即(ji)可進行(xing)反應。使(shi)用(yong)前請(qing)保證(zheng)充分溶(rong)解並混(hun)勻(yun)，操作需在冰(bing)上進行(xing)。本產(chan)品(pin)就(jiu)是(shi)為此目的根據(ju) PCR 原(yuan)理(li)開(kai)發(fa)的試(shi)劑盒(he)。
具(ju)有(you)高靈敏(min)度、高特(te)異性、高穩(wen)定性
可(ke)在同(tong)壹(yi)個管(guan)子(zi)中高特(te)異性的(de)執(zhi)行cDNA合(he)成與(yu)基(ji)於(yu)探(tan)針(zhen)的qPCR反(fan)應。更(geng)多優點如(ru)1.的(de)特(te)異性；2.多(duo)重(zhong)反(fan)應（高通(tong)量(liang)）；3.反(fan)應體(ti)系配置(zhi)，無(wu)需(xu)冰塊(kuai)；4.無(wu)懼高GC含(han)量(liang)PCR；5.預防(fang)交叉(cha)汙染(ran)；6.廣泛(fan)的設備(bei)兼(jian)容性。
PCR反(fan)應的(de)特(te)異性決(jue)定因(yin)素(su)為：
①引(yin)物與(yu)模板DNA特(te)異正確的(de)結(jie)合(he)；
②堿基配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性；
④靶基(ji)因的(de)特(te)異性與(yu)保(bao)守性。
其(qi)中引(yin)物與模板(ban)的(de)正確結(jie)合(he)是關(guan)鍵(jian)。引(yin)物(wu)與模板的結(jie)合(he)及引物(wu)鏈的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵循(xun)堿基配對(dui)原(yuan)則的。聚(ju)合(he)酶合(he)成反(fan)應(ying)的(de)忠實(shi)性及Taq DNA聚(ju)合(he)酶耐(nai)高溫(wen)性，使(shi)反(fan)應中模板(ban)與(yu)引(yin)物的(de)結(jie)合(he)(復(fu)性)可(ke)以在(zai)較高的溫(wen)度下進行(xing)，結(jie)合(he)的特(te)異性大(da)大(da)增加，被(bei)擴(kuo)增的(de)靶基(ji)因片(pian)段也就能(neng)保(bao)持很高的正確度。再通(tong)過選(xuan)擇特(te)異性和(he)保守性高的靶基(ji)因區(qu)，其(qi)特(te)異性程(cheng)度就(jiu)更(geng)高。
(2) 靈(ling)敏度高
PCR產(chan)物的(de)生成(cheng)量(liang)是以(yi)指數(shu)方式增加的(de)，能將皮克(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始(shi)待(dai)測(ce)模板(ban)擴(kuo)增到(dao)微克(ug=10-6g)水(shui)平。能(neng)從100萬個細(xi)胞(bao)中檢(jian)出(chu)壹(yi)個靶細(xi)胞(bao)；在病(bing)毒(du)的檢(jian)測(ce)中，PCR的(de)靈敏(min)度可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形成(cheng)單位(wei))；在(zai)細(xi)菌學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢(jian)出(chu)率為3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡(jian)便、快(kuai)速
PCR反(fan)應用(yong)耐(nai)高溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶，壹(yi)次性地(di)將反(fan)應液(ye)加好(hao)後，即在DNA擴(kuo)增液(ye)和(he)水浴鍋(guo)上進行(xing)變(bian)性-退(tui)火-延(yan)伸反(fan)應，壹(yi)般在(zai)2～4 小(xiao)時完(wan)成(cheng)擴(kuo)增反(fan)應。擴(kuo)增產(chan)物壹(yi)般用(yong)電(dian)泳分析(xi)，不(bu)壹(yi)定要(yao)用(yong)同(tong)位(wei)素(su)，無放(fang)射(she)性汙染(ran)、易(yi)推廣。
(4) 對(dui)標本的(de)純(chun)度要(yao)求低
不(bu)需要(yao)分離病(bing)毒(du)或細(xi)菌及培養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品(pin)及總RNA均(jun)可作(zuo)為擴(kuo)增模(mo)板。可(ke)直(zhi)接(jie)用臨床標(biao)本如(ru)血(xue)液、體腔液、洗(xi)嗽液(ye)、毛(mao)發、細(xi)胞(bao)、活PCR技(ji)術(shu)概論。
實(shi)驗(yan)註意(yi)事項(xiang)：
1）RT-PCR可(ke)以檢(jian)測(ce)組(zu)織(zhi)、細(xi)胞(bao)、血液(ye)、細(xi)菌等(deng)很多(duo)材料，不(bu)同的(de)樣(yang)本有(you)不(bu)同要(yao)求，實(shi)驗(yan)前請(qing)充分溝通(tong)確認實(shi)驗(yan)方案(an)和(he)樣本情(qing)況；
2）客(ke)戶盡(jin)可能(neng)提供實(shi)驗(yan)的背(bei)景信(xin)息、物種、基(ji)因準確(que)的(de)名稱和(he)ID號(hao)；
3）客(ke)戶盡(jin)量(liang)不(bu)要(yao)提供DNA或(huo)RNA樣(yang)品(pin)。
4）樣(yang)本保(bao)存(cun)於(yu)液氮或幹冰(bing)，也可以(yi)保(bao)存於(yu)Trizol液(ye)中。
實(shi)時(shi)熒(ying)光定量(liang)PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是(shi)指在(zai)PCR反(fan)應體(ti)系中(zhong)加入熒(ying)光基(ji)團(tuan)，利(li)用熒(ying)光信(xin)號(hao)積累實(shi)時(shi)監測(ce)整個PCR進程(cheng)，通(tong)過標(biao)準曲線對(dui)未(wei)知(zhi)模板(ban)進行(xing)定量(liang)分析(xi)的方(fang)法。實(shi)時(shi)熒(ying)光定量(liang)PCR的(de)化(hua)學(xue)原(yuan)理(li)包(bao)括(kuo)探(tan)針(zhen)類(lei)和(he)非探(tan)針(zhen)類(lei)兩類(lei)，探(tan)針(zhen)類(lei)是利(li)用與靶細(xi)胞(bao)序列(lie)特(te)異性雜(za)交的探(tan)針(zhen)來指示(shi)擴(kuo)增產(chan)物的(de)增加，非探(tan)針(zhen)類(lei)是利(li)用熒(ying)光染(ran)料或(huo)者(zhe)特(te)異性設(she)計(ji)的引(yin)物來指示(shi)擴(kuo)增的(de)增加。運(yun)用(yong)該(gai)技(ji)術(shu)可以(yi)對DNA、RNA樣(yang)品(pin)進行(xing)定量(liang)（包括(kuo)定量(liang)和(he)相對(dui)定量(liang)）和(he)定性分析(xi)。
CM-R107大(da)鼠海(hai)馬神經(jing)元(yuan)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL水(shui)溶性四(si)氮(dan)唑(zuo)-8;WST-8Water-soluble tetrazoliuM -8;GLT008質(zhi)量(liang)規格：BR,>97%

Raji，人(ren)Butt's瘤(liu)細(xi)胞(bao)水溶(rong)性四(si)氮(dan)唑(zuo)-5GLT005質(zhi)量(liang)規格：BR

EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化(hua)的人(ren)B細(xi)胞(bao);KMY0919 人(ren)成骨(gu)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL水(shui)溶性四(si)氮(dan)唑(zuo)-4GLT004質(zhi)量(liang)規格：BR

小(xiao)鼠畸(ji)胎(tai)瘤細(xi)胞(bao);F9積雪草酸Asiatic acid質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥90%,BR

SLIK4 Others Human 人(ren) SLIK4 / Slik4 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 積雪草酸（標(biao)準品(pin)）Asiatic acid質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)
H9c2細(xi)胞(bao)，大鼠(shu)心(xin)肌細(xi)胞(bao) 人(ren)肝癌(ai)細(xi)胞(bao),HepG2/2-15細(xi)胞(bao) CL-0128JeKo-1(人(ren)套細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2D-別異*D-allo-Isoleucine 質(zhi)量(liang)規格：0.98

二(er)氫(qing)*還(hai)原(yuan)酶缺陷(xian)型中(zhong)國倉鼠卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao);CHO/dhFr-D-纈(xie)氨醇(chun) D-Valil質(zhi)量(liang)規格：>98%

CD38 Others Human 人(ren) CD38 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) L-L-Phenylglycil質(zhi)量(liang)規格：>98%,BR

破骨細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)BOC-L-脯(pu)氨醇(chun) BOC-L-Prolil質(zhi)量(liang)規格：>98%,BR

NA Others H9N2 甲(jia)型流(liu)感(gan) H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神(shen)經(jing)氨酸酶(mei) (Neuraminidase / NA) 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 絲(si)氨醇(chun),2-氨基(ji)-1,3- 2-Ami-1,3-propanediol 質(zhi)量(liang)規格：>99%,BR
大(da)鼠垂體(ti)細(xi)胞(bao)RPC左(zuo)旋*(標(biao)準品(pin))質(zhi)量(liang)規格：>98%,標(biao)準品(pin)Levosulpiride

BeWo細(xi)胞(bao)，人胎(tai)盤絨膜癌細(xi)胞(bao) 新生牛(niu)眼晶(jing)體(ti)上皮細(xi)胞(bao),NBLE細(xi)胞(bao) 人(ren)無色(se)素睫(jie)狀上皮細(xi)胞(bao)HNPCEpiC左(zuo)旋*質(zhi)量(liang)規格：>98%,BRLevosulpiride

IAR20(大(da)鼠肝(gan)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2*質(zhi)量(liang)規格：>65IU/MG,BRBacitracin

786-O(人(ren)腎透(tou)明(ming)細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人(ren)大隱(yin)靜脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL 人(ren)臍動(dong)脈(mai)內(nei)皮細(xi)胞(bao)RNAHUAEC miRNA5 μg鹽(yan)酸*質(zhi)量(liang)規格：>98%,USP31Amitriptyline HCl

CM-R047大(da)鼠腸(chang)微血管(guan)細(xi)胞(bao)*培養(yang)基(ji)100mL苯磺酸*（絡活喜(xi)、安(an)洛地(di)）質(zhi)量(liang)規格：>99%,EP 6.4,BRAmlodipine Besylate
使(shi)君(jun)子(zi)染料法PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)Ramos細(xi)胞(bao)，血細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)系 615小(xiao)鼠前胃癌瘤(liu)株,Fc細(xi)胞(bao) 人(ren)心(xin)臟(zang)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)-心(xin)房(fang)裂(lie)解物HCF-aa L*(標(biao)準品(pin))質(zhi)量(liang)規格：HPLC>98%,標(biao)準品(pin)Bupivacaine base

NCI-H358(人(ren)非小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2*質(zhi)量(liang)規格：>99%Cinepazide maleate

CFPAC-1(人(ren)胰腺癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0102Hep 3B(人(ren)肝癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠腹水瘤(liu)細(xi)胞(bao);S-180*(標(biao)準
主要(yao)服(fu)務：DNA或(huo)RNA的(de)定量(liang)分析(xi)、基因(yin)表達差異分析(xi)、基因(yin)分型(xing)。
主要(yao)技(ji)術(shu)：引物(wu)設計、RNA提取(qu)、cDNA合(he)成、qPCR