漏(lou)蘆(lu)PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)*

特(te)點(dian)：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶(hu)只(zhi)需(xu)要提供病毒(du)樣品(pin)。
2. 根據(ju)地(di)黃保(bao)守序列設計(ji)的(de)專壹性引(yin)物，與(yu)相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
3. 靈敏度可以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百拷貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹管式熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢測(ce)，避(bi)免後(hou)續汙(wu)染(ran)。
5. 本(ben)試劑(ji)盒足(zu)夠 50 次 20μL 反(fan)應體系的(de)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產品(pin)只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科研(yan)，不能用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使用(yong)方法(fa)：
壹、樣品(pin)采(cai)集：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預培(pei)養按照樣品(pin)的(de)采(cai)集與(yu)預培(pei)養按照《食(shi)品(pin)衛生微生物學(xue)檢驗(yan)阪崎(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)檢驗(yan)要求進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品(pin)：用(yong)無(wu)菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽取受檢者(zhe)靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻(yun)。
3、糞便樣品(pin)：取糞便置於滅(mie)菌(jun)的(de)收集(ji)管中(zhong)送檢。
4、病(bing)竈部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取發病(bing)部(bu)位(wei)新(xin)鮮(xian)滲出物、粘(zhan)液(ye)膿(nong)血(xue)送(song)檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋(shi)度為(wei)例）
1. 註(zhu)意：由於標準(zhun)品(pin)濃度非(fei)常高(gao)，因此下列稀釋(shi)操作壹定(ding)要在獨(du)立(li)的(de)區(qu)域進行，千(qian)萬(wan)不能汙(wu)染(ran)樣品(pin)或本試(shi)劑盒的(de)其(qi)他(ta)成分(fen)）。為(wei)增加(jia)產品(pin)穩定(ding)性和避(bi)免(mian)擴散傳染(ran)性病(bing)原(yuan)，本產品(pin)不提供活體(ti)樣品(pin)做陽性對(dui)照，只(zhi)提供可以(yi)直(zhi)接使用(yong)的(de) DNA段作為(wei)陽性對(dui)照。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離心管，分(fen)別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)分(fen)別加(jia)入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在 7 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de)1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上待用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 6 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照(上步(bu)稀釋(shi)所得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上待用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E5 拷貝(bei)/μL 的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上待用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上面的(de)操作直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋(shi)度的(de)陽性對(dui)照。放冰(bing)上待用(yong)。
註(zhu)：上述樣品(pin)建議(yi)經過(guo)增菌(jun)後(hou)，收集培(pei)養物用(yong)於(yu)檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可采(cai)用(yong)PCR試(shi)劑盒(he)配備的(de)DNA抽提液(ye)，按以(yi)下說明(ming)進行DNA核(he)酸的(de)粗提(ti)。也可采(cai)購上海(hai)澤葉生(sheng)物科(ke)技有限公(gong)司生(sheng)產的(de)DNA提(ti)取試(shi)劑盒(過(guo)柱法(fa)-熒光(guang)配套)或(huo)其(qi)他(ta)合(he)適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化產品(pin)，並按照相(xiang)應試劑(ji)盒說(shuo)明(ming)進行操(cao)作。
1、液(ye)體培(pei)養物：取(qu)液(ye)體培(pei)養物100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離心管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡(jin)量(liang)吸棄(qi)上清，加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固(gu)體(ti)培(pei)養物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞便樣品(pin)：挑取米(mi)粒(li)大(da)小(xiao)糞便於滅(mie)菌(jun)離心管中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄(qi)上清，沈澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其(qi)他(ta)液(ye)體標(biao)本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上清，沈澱(dian)中(zhong)加(jia)入(ru)50μL DNA抽提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽性對(dui)照和陰(yin)性對(dui)照為(wei)已經抽提好(hao)的(de)核酸(無(wu)需(xu)提(ti)取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到(dao)反應體系中(zhong)即可。由於陽性對(dui)照濃度(du)較(jiao)高(gao)，建議(yi)在樣(yang)品(pin)制(zhi)備區(qu)域加(jia)入(ru)陽(yang)性對(dui)照。 
實驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢測(ce)過(guo)程應嚴(yan)格按照本說(shuo)明(ming)書要求分(fen)別在試(shi)劑(ji)準備區(qu)、樣本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進行操(cao)作，各區(qu)實驗服、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材應獨(du)立(li)使用(yong)，不(bu)能混用(yong)；實驗用(yong)吸頭(tou)采(cai)用(yong)帶(dai)濾(lv)芯吸頭(tou)；樣本(ben)處(chu)理區(qu)應配有生(sheng)物安(an)全(quan)櫃，樣本處(chu)理在生(sheng)物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進行操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應該配有紫(zi)外線殺菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避免(mian)RNA降解，樣本處(chu)理過(guo)程應在0-4℃條件下操作，且(qie)完(wan)成實驗後(hou)立即上機檢測(ce)；樣(yang)本處(chu)理過(guo)程中(zhong)使用(yong)的(de)器(qi)具耗材應經過(guo)無核(he)酶(mei)處(chu)理。
3. 每(mei)次實驗應該設置陰(yin)、陽(yang)性對(dui)照。
4. 試(shi)劑盒(he)所有試(shi)劑(ji)在使用(yong)前(qian)應該在常溫(wen)下充分(fen)融化混勻(yun)，並應瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試(shi)劑盒(he)內所配陰(yin)性和陽(yang)性對(dui)照在壹次使用(yong)前(qian)應全(quan)部(bu)轉移至(zhi)標(biao)本準備區(qu)，並單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為(wei)防止熒光(guang)幹(gan)擾，應避免(mian)裸手(shou)直接接(jie)觸PCR反(fan)應管，並應避免(mian)在PCR反(fan)應管上進行任何標(biao)記(ji)。
7. 儀(yi)器(qi) 擴(kuo)增相(xiang)關(guan)參(can)數應按照本說(shuo)明(ming)書相(xiang)關(guan)要求進(jin)行設置；不同(tong)批(pi)號(hao)試劑(ji)不能混用(yong)。
8. ABI系列熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參數設置中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅(mie)基(ji)因選(xuan)擇None。
9. 實驗過程(cheng)中(zhong)產品(pin)的(de)廢(fei)棄(qi)物應該進行無(wu)害(hai)化處(chu)理後(hou)方可丟(diu)棄(qi)。
儲存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品(pin)收集、處(chu)理及(ji)保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和內毒(du)素的(de)試管，操作過(guo)程(cheng)中(zhong)避免(mian)任何細胞(bao)刺激(ji)，收集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉離心10 分(fen)鐘將血(xue)清(qing)和紅細胞(bao)迅速小(xiao)心地(di)分(fen)離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽(yan)或肝(gan)素抗凝。3000 轉離心30 分(fen)鐘取上清。
3. 細胞(bao)上清液(ye)：3000 轉離心10 分(fen)鐘去除顆粒(li)和聚合(he)物。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將組織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉離心10 分(fen)鐘取上清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果樣本收(shou)集後(hou)不及(ji)時(shi)檢測(ce)，請(qing)按壹次用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復凍融，在室溫(wen)下解凍(dong)並確(que)保樣(yang)品(pin)均勻(yun)地(di)充分(fen)解凍。
Raji，人(ren)Butt's瘤(liu)細胞(bao) Human1酸三鈣(>98%,BR)Calcium phosphate, tribasic質量(liang)規(gui)格：>98%,BR

FAS Others Human 人(ren) CD95 / Fas / TNFRSF6 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) DL-硒(xi)代(dai)蛋氨酸(USP)DL-Selemine質量(liang)規(gui)格：>98%(HPLC),USP

人(ren)胎(tai)盤(pan)絨膜癌細胞(bao);BeWo蜜(mi)二糖(tang)Melibiose質量(liang)規(gui)格：>98%,水合(he)物

CLEC5A Others Cymolgus 食(shi)蟹猴(hou) CLEC5A / MDL1 / MDL-1 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 草酸鈉(>98%，BC) oxalate質量(liang)規(gui)格：>98%，BC

CM-R034大(da)鼠(shu)肝(gan)動脈內皮細胞(bao)*培(pei)養基(ji)100mL鎢(wu)酸鈉二(er)水(>98%,BR) tungstate, dehydrate質量(liang)規(gui)格：>98%,BR
EC109，人(ren)食(shi)管癌細胞(bao)美(mei)拉諾(nuo)坦II；MTII質量(liang)規(gui)格：>98%,BRMelatan ⅡAcetate

EB病(bing)毒(du)轉化的(de)人B細胞(bao);KMY0926 人(ren)腦(nao)動脈血(xue)管平滑(hua)肌細胞(bao)*培(pei)養基(ji) 100mL質量(liang)規(gui)格：>99%Meloxicam

大(da)鼠(shu)肺(fei)泡巨(ju)噬細胞(bao);NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]（標(biao)準品(pin)）質量(liang)規(gui)格：HPLC>99%,標(biao)準品(pin)Gemcitabine HCl

IL23R Others Rat 大(da)鼠(shu) IL23R / IL23 Receptor 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 甲(jia)磺酸質量(liang)規(gui)格：>98.5%,BRGemifioxacin Mesylate

肺(fei)大(da)靜(jing)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)甲(jia)磺酸（標準品(pin)）質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標(biao)準品(pin)Gemifioxacin Mesylate
HA Others H5N1 甲(jia)型流(liu)感(gan) H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血(xue)凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) D-甲(jia)酯鹽(yan)酸鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：0.98D-Alanine Methyl Ester

人(ren)臍(qi)動脈平滑(hua)肌細胞(bao)cDNAHUASMC cDNAD-叔丁(ding)酯(zhi)鹽(yan)酸鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：0.99D-Alanine tert-Butyl Ester

V79細胞(bao)，中(zhong)國倉鼠(shu)肺(fei)細胞(bao) 人(ren)肺癌亞歷(li)山(shan)大(da)細胞(bao)系,PLC/PRF/5細胞(bao) 膀(pang)胱上皮細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)D-質量(liang)規(gui)格：0.98D-Arginine

猞(she)猁(li)皮膚成纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞(bao);ELS1D-核(he)糖-5-1酸二鈉鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：>85%,美(mei)國進口D-Ribose 5-phosphate di salt hydrate

VCAM1 Others Human 人(ren) CD106 / VCAM1 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照) 蘇木色(se)精(jing)，蘇木素(su)質量(liang)規(gui)格：進(jin)分(fen)Hematoxylin
漏(lou)蘆PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)*恒(heng)河猴(hou)腎細胞(bao);LLC-MK2亞(ya)甲基(ji)二(er)水楊酸(異構體的(de)混合(he)物)(>90.0%(T))質量(liang)規(gui)格：>90.0%(T)Methylenedisalicylic Acid (mixture of isomers)

大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細胞(bao)(低(di)分(fen)化);PC-12(低(di)分(fen)化) 肝(gan)癌細胞(bao)，BEL-7402細胞(bao) D3細胞(bao)，129小(xiao)鼠(shu)ES細胞(bao)2-氨(an)基(ji)-2',5-二(er)氯(lv)二苯(ben)甲(jia)酮(tong)(>98.0%(N))質量(liang)規(gui)格：>98.0%(N)2-Ami-2',5-dichlorobenzophene

MiaPaCa-2, 人(ren)胰(yi)腺癌細胞(bao) Human