白(bai)介素elisa試劑盒(he)實(shi)驗(yan)測定(ding)方(fang)法:
1、定(ding)性測定(ding)
(1)陽性判(pan)定值(zhi)法(cut-off value,CO值(zhi)):壹般(ban)為陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)的(de)平均A值(zhi)加壹(yi)個常(chang)數(shu),試劑制備嚴格(ge)標準化,要(yao)先計(ji)算(suan)出陽性對(dui)照(zhao)A值(zhi)平均數(shu)和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)A值(zhi)平均數(shu)。標(biao)本(ben)A值(zhi)≥CO值(zhi)即為陽性。
(2)抑制率法:在(zai)競(jing)爭抑制法中(zhong)結(jie)果可(ke)用(yong)抑制率表示(shi)。
抑制率(%)=(A陰性對(dui)照(zhao)A- A待測)/陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)X100%,壹(yi)般(ban)以抑制率≥50%為陽性
2、半定量測定(ding)
結(jie)果壹(yi)般(ban)以滴(di)度(du)表示(shi)。將標本連(lian)續(xu)稀(xi)釋(shi)後,進(jin)行ELISA檢測,在(zai)陽性臨界值以上(shang)的zui高(gao)稀釋(shi)度(du)即為該標(biao)本(ben)的(de)“滴(di)度(du)"。
3、定量測定(ding)
即(ji)用己(ji)知(zhi)量的標(biao)準品作(zuo)壹(yi)系(xi)列(lie)稀(xi)釋(shi)後進(jin)行ELISA測定(ding),與(yu)待測標(biao)本(ben)同(tong)時(shi)進(jin)行測定(ding),繪(hui)制標(biao)準曲線(xian),結(jie)果以絕(jue)對(dui)量或活性單位(wei)表(biao)示(shi)。
二、註意(yi)事(shi)項(xiang):
1.試劑盒(he)從(cong)冷藏環境中(zhong)取(qu)出(chu)應在室(shi)溫(wen)平衡(heng)15-30分(fen)鐘後(hou)方(fang)可使用,酶標包被(bei)板開(kai)封(feng)後如(ru)未用(yong)完,板條(tiao)應裝入密(mi)封(feng)袋中(zhong)保存(cun)。
2.濃洗滌(di)液(ye)可(ke)能會有(you)結(jie)晶析出,稀釋時(shi)可在(zai)水浴(yu)中(zhong)加(jia)溫(wen)助溶,洗滌(di)時(shi)不影響(xiang)結(jie)果。
3.各步加樣(yang)均應(ying)使用加(jia)樣(yang)器,並經(jing)常(chang)校對(dui)其(qi)準確性(xing),以避免試驗誤差。壹(yi)次(ci)加樣(yang)時(shi)間(jian)最hao控(kong)制在(zai)5分(fen)鐘內(nei),如(ru)標本數(shu)量多(duo),使用排(pai)槍(qiang)加樣(yang)。
4. 請每(mei)次測定(ding)的(de)同(tong)時(shi)做(zuo)標準曲線(xian),最hao做(zuo)復孔。如標本(ben)中(zhong)待測物(wu)質(zhi)含量過高(gao)(樣(yang)本OD值(zhi)大於(yu)標(biao)準品孔*孔的OD值(zhi)),請(qing)先用(yong)樣(yang)品稀釋液稀(xi)釋(shi)壹(yi)定倍(bei)數(shu)(n倍(bei))後(hou)再測定(ding),計(ji)算時(shi)請最(zui)後乘以總稀釋(shi)倍(bei)數(shu)(×n×5)。
5. 封(feng)板膜(mo)只限壹次性使用,以避免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。
6.底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保存(cun)。
7.嚴格(ge)按(an)照(zhao)小(xiao)鼠(shu)卵(luan)泡(pao)抑素樣(yang)蛋白(bai)3(FSTL3) ELISA試劑盒(he)說明(ming)書的(de)操(cao)作(zuo)進(jin)行,試驗結(jie)果判(pan)定必(bi)須以酶標儀(yi)讀(du)數(shu)為(wei)準.
8.所有(you)樣(yang)品,洗滌(di)液(ye)和(he)各種(zhong)廢棄(qi)物都(dou)應(ying)按(an)傳染(ran)物處理。
9.本(ben)試劑不同(tong)批號(hao)組分(fen)不得(de)混(hun)用。
10. 如(ru)與英(ying)文說明(ming)書有(you)異(yi),以英文(wen)說明(ming)書為(wei)準。