進口ELISA試劑(ji)盒實(shi)驗原理：

本(ben)進口ELISA試劑(ji)盒采用(yong)雙(shuang)抗體夾心(xin)酶(mei)聯免(mian)疫(yi)法(fa)（ELISA）測(ce)定標(biao)本(ben)中結(jie)核病(bing)（TB）。用(yong)純(chun)化的牛(niu)結(jie)核病(bing)（TB）抗體包(bao)被微(wei)孔(kong)板，制(zhi)成固(gu)相(xiang)抗(kang)體，可與(yu)樣品中結(jie)核病(bing)（TB）相(xiang)結(jie)合，經(jing)洗(xi)滌除(chu)去(qu)未(wei)結(jie)合的抗(kang)原和(he)其(qi)他(ta)成分(fen)後(hou)再與(yu) HRP 標記(ji)的結(jie)核病(bing)（TB）抗體結(jie)合，形成抗體-抗(kang)原-酶(mei)標抗(kang)體復(fu)合物，經(jing)過(guo)*洗滌後(hou)加(jia)底物 TMB 顯(xian)色(se)。TMB 在(zai) HRP 酶(mei)的催(cui)化下(xia)轉化成藍色(se)， 並在酸(suan)的作用(yong)下(xia)轉化成終的黃色。用(yong)酶(mei)標儀(yi)在 450nm 波長(chang)下(xia)測定吸(xi)光(guang)度(du)（OD 值），與(yu) CUTOFF 值相(xiang)比(bi)較，從(cong)而判定標(biao)本(ben)中牛結(jie)核病(bing)（TB）的存(cun)在(zai)與(yu)否。

進口ELISA試劑(ji)盒樣本(ben)處(chu)理及(ji)要(yao)求：

血(xue)清(qing)：室(shi)溫(wen)血(xue)液自(zi)然(ran)凝(ning)固(gu) 10-20 分(fen)鐘(zhong)，離心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如出(chu)現沈(chen)澱(dian)，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。

血(xue)漿：應(ying)根據(ju)標本(ben)的要(yao)求選擇 EDTA 或(huo)檸檬(meng)酸(suan)鈉作為(wei)抗(kang)凝劑(ji)，混合(he) 10-20 分(fen)鐘(zhong)後(hou)，離(li)心(xin)20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應(ying)該(gai)再次(ci)離(li)心(xin)。

尿(niao)液：用(yong)無(wu)菌(jun)管收集(ji)，離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)，保(bao)存(cun)過(guo)程中如有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。胸(xiong)腹(fu)水、腦脊(ji)液參照(zhao)實(shi)行。

細胞培(pei)養上(shang)清(qing)：檢(jian)測分(fen)泌性的成份時(shi)，用(yong)無(wu)菌(jun)管收集(ji)。離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/ 分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)。檢(jian)測細胞內的成份時(shi)，用(yong) PBS（PH7.2-7.4）稀(xi)釋細(xi)胞懸(xuan)液，細胞濃度(du)達到(dao) 100 萬/ml 左右(you)。通(tong)過(guo)反(fan)復(fu)凍融，以使細胞破壞並放(fang)出(chu)細胞內成份。離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)。保(bao)存(cun)過(guo)程中如有(you)沈(chen)澱(dian)形成，應(ying)再次(ci)離(li)心(xin)。

組(zu)織標本(ben)：切(qie)割標本(ben)後(hou)，稱(cheng)取重量。加(jia)入進口ELISA試劑(ji)盒壹定量(liang)的，PH7.4。用(yong)液氮迅(xun)速(su)冷凍保存(cun)備(bei)用(yong)。標(biao)本(ben)融(rong)化後(hou)仍然(ran)保(bao)持 2-8℃的溫(wen)度(du)。加(jia)入壹(yi)定量(liang)的 PBS（PH7.4），用(yong)手(shou)工(gong)或勻漿器(qi)將(jiang)標(biao)本(ben)勻漿充分(fen)。離心(xin)20 分(fen)鐘(zhong)左右(you)（2000-3000 轉/分(fen)）。仔細收集(ji)上(shang)清(qing)。分(fen)裝後(hou)壹(yi)份待(dai)檢(jian)測，其(qi)余冷(leng)凍備用(yong)。

標(biao)本(ben)采(cai)集(ji)後(hou)盡(jin)早(zao)進行提取，提取按相(xiang)關(guan)文獻(xian)進行，提取後(hou)應(ying)盡(jin)快(kuai)進行實(shi)驗。若不能馬(ma)上(shang)進行試驗，可將(jiang)標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保存(cun)，但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍融.
不能檢(jian)測含(han) NaN3 的樣(yang)品，因(yin) NaN3 抑(yi)制辣根過(guo)氧化物酶(mei)的（HRP）活(huo)性。​