人(ren)血(xue)管生(sheng)成素1elisa試(shi)劑(ji)盒(he) 儲存(cun)方式
標(biao)本(ben)的(de)采集(ji)與(yu)保(bao)存:收集(ji)標本(ben)前必(bi)須(xu)清(qing)楚要(yao)檢測的(de)成份(fen)是否(fou)足(zu)夠(gou)穩(wen)定(ding)。對收(shou)集(ji)後當(dang)天(tian)進(jin)行(xing)檢測的(de)標本,儲存在4℃備(bei)用(yong),如有(you)特殊(shu)原(yuan)因(yin)需(xu)要周(zhou)期收集(ji)標本(ben),將標(biao)本(ben)及時分裝(zhuang)後放在-20℃或(huo)-70℃條件下(xia)保存(cun)。避免反復(fu)凍(dong)融。標本2-8℃可保(bao)存(cun)48小時(shi),-20℃可(ke)保(bao)存(cun)1個月。-70度可(ke)保(bao)存6個(ge)月。部分激(ji)素類標本(ben)需(xu)添加(jia)。
◇液體(ti)類標本(ben):
標本(ben)必(bi)須(xu)為液體(ti),不含沈(chen)澱(dian)。包括(kuo)血(xue)清、血漿(jiang)、尿(niao)液、胸腹(fu)水、腦(nao)脊液、細胞(bao)培(pei)養上清(qing)、組織勻漿(jiang)等(deng)。1ml的(de)全血可得(de)到(dao)0.5ml的(de)血清或(huo)血漿(jiang)。每(mei)個標本(ben)量收(shou)集(ji)體(ti)積=100ul×檢測種(zhong)類。取(qu)材前(qian)須向(xiang)銷(xiao)售(shou)人員索(suo)要說明(ming)書(shu)。
◇血清(qing):
室溫血液自然凝固(gu)10-20分鐘後,離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。收集(ji)上清(qing)。如有(you)沈澱(dian)形成,應再次(ci)離心。
◇血漿(jiang):
應根據試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)要求選(xuan)擇(ze)EDTA、檸(ning)檬酸鈉或(huo)肝素(su)作(zuo)為抗凝劑(ji),加(jia)入(ru)10%(v/v)抗凝劑(ji)(0.1M檸(ning)檬酸鈉或(huo)1% heparin 或(huo)2.0%EDTA.Na2)混合(he)10-20分鐘後,離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。如有(you)沈澱(dian)形成,應再次(ci)離心。
◇尿(niao)液、胸腹(fu)水、腦(nao)脊液:
用(yong)無菌(jun)管收(shou)集(ji)。離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。如有(you)沈澱(dian)形成,應再次(ci)離心。
◇細胞(bao)培(pei)養上清(qing):
檢測分泌性(xing)的(de)成份(fen)時,用(yong)無菌(jun)管收(shou)集(ji)。離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。檢測細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)成份(fen)時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞(bao)懸(xuan)液,細胞(bao)濃度達(da)到(dao)100萬(wan)/ml左(zuo)右(you)。通(tong)過反復(fu)凍(dong)融,以使(shi)細(xi)胞(bao)破(po)壞並(bing)放出(chu)細胞(bao)內(nei)成份(fen)。離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)。保存過程(cheng)中如有(you)沈澱(dian)形成,應再次(ci)離心。
◇組織標本(ben):
切(qie)割(ge)標本(ben)後,稱取(qu)重量。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量的(de)PBS,緩沖(chong)液中可加(jia)入(ru)1μg/L蛋白(bai)酶抑制(zhi)劑(ji)或(huo)50U/ml的(de)Aprotinin()。用(yong)手工(gong)或(huo)勻漿(jiang)器將標(biao)本(ben)勻漿(jiang)充分。離心20分鐘左(zuo)右(you)(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔細(xi)收(shou)集(ji)上清(qing)置(zhi)於(yu)-20度或(huo)-70度保(bao)存(cun),如有(you)必(bi)要(yao),可(ke)以將樣(yang)品(pin)濃縮(suo)幹燥(zao)。分裝(zhuang)後壹(yi)份(fen)待檢測,其(qi)余冷凍備(bei)用(yong)。