小(xiao)鼠(shu)胰(yi)島(dao)素樣(yang)生(sheng)長(chang)因子(zi)1elisa試(shi)劑盒 樣(yang)本處(chu)理(li)及(ji)要(yao)求(qiu):
1. 血清:室(shi)溫(wen)血液(ye)自(zi)然凝(ning)固10-20分鐘,離心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。
仔細(xi)收集(ji)上(shang)清,保(bao)存(cun)過程中(zhong)如(ru)出現沈澱(dian),應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。
2. 血漿:應(ying)根據(ju)標本的(de)要(yao)求(qiu)選擇EDTA或檸檬(meng)酸(suan)鈉(na)作為抗凝劑,混(hun)合10-20分(fen)鐘(zhong)後(hou),離心20分(fen)鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收集(ji)上(shang)清,保(bao)存(cun)過程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱(dian)形成,應(ying)該再(zai)次離(li)心(xin)。
3. 尿液(ye):用(yong)無(wu)菌(jun)管收集(ji),離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收集(ji)上(shang)清,保(bao)存(cun)過程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱(dian)形成,應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。胸(xiong)腹水、腦脊液(ye)參(can)照(zhao)實(shi)行。
4. 細(xi)胞(bao)培(pei)養上(shang)清:檢(jian)測分泌(mi)性的(de)成份(fen)時(shi),用無(wu)菌管(guan)收集(ji)。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收集(ji)上(shang)清。檢(jian)測細(xi)胞(bao)內(nei)的(de)成份(fen)時(shi),用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋(shi)細(xi)胞(bao)懸液(ye),細(xi)胞(bao)濃度(du)達到(dao)100萬(wan)/ml左右。通(tong)過反(fan)復(fu)凍(dong)融,以使(shi)細(xi)胞(bao)破壞(huai)並放(fang)出細(xi)胞(bao)內(nei)成份(fen)。離心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收集(ji)上(shang)清。保(bao)存(cun)過程中(zhong)如(ru)有(you)沈澱(dian)形成,應(ying)再(zai)次離(li)心(xin)。
5. 組(zu)織標本:切(qie)割(ge)標本後(hou),稱取重(zhong)量。加入壹(yi)定量的(de)PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅(xun)速冷凍保(bao)存(cun)備(bei)用(yong)。標本融化後(hou)仍然保(bao)持(chi)2-8℃的(de)溫(wen)度(du)。加入壹(yi)定量的(de)PBS(PH7.4),用(yong)手工(gong)或勻漿(jiang)器(qi)將(jiang)標本勻漿(jiang)充(chong)分。離(li)心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔細(xi)收集(ji)上(shang)清。分(fen)裝後(hou)壹(yi)份待(dai)檢(jian)測,其余(yu)冷凍備(bei)用(yong)。
6. 標本采(cai)集(ji)後盡早(zao)進行提取(qu),提取(qu)按(an)相關(guan)文獻(xian)進行,提取(qu)後應盡(jin)快(kuai)進行實(shi)驗。若不(bu)能(neng)馬(ma)上(shang)進行試(shi)驗,可將(jiang)標本放(fang)於-20℃保(bao)存(cun),但應(ying)避免反(fan)復(fu)凍(dong)融.
7. 不能(neng)檢(jian)測含(han)NaN3的(de)樣(yang)品(pin),因NaN3抑(yi)制辣根過氧(yang)化物(wu)酶的(de)(HRP)活性。