ELISA結(jie)合物(wu)的(de)定(ding)量測(ce)定(ding)：
 

　　壹(yi)般是(shi)對結(jie)合物(wu)中(zhong)的(de)酶和(he)IgG進(jin)行(xing)定(ding)量測(ce)定(ding)。常(chang)用紫外(wai)分光光(guang)度(du)計於(yu)403nm和(he)280nm進(jin)行(xing)測(ce)定(ding)，然後(hou)按(an)下列(lie)公(gong)式計算(suan)：
 

　　酶量(mg/ml)=OD403×0.42
 

　　IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62
 

　　對於(yu)過碘(dian)酸(suan)鈉(na)氧化(hua)法(fa)制(zhi)備的(de)標記抗體(ti)量(liang)，按(an)下列(lie)公(gong)式計算(suan)：
 

　　IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.34)×0.62
 

　　已知(zhi)酶量(liang)和(he)IgG量(liang)後(hou)，即(ji)可計算(suan)出標記抗體(ti)的(de)摩爾(mol)比(bi)值。
 

　　HRP/IgG摩爾比(bi)值=HRP(mg/ml)/IgG(mg/ml)×4
 

　　結(jie)合物(wu)中(zhong)酶總量(liang)=HRP(mg/ml)×結(jie)合物(wu)溶(rong)液(ye)量(liang)
 

　　結(jie)合物(wu)產(chan)率=結(jie)合物(wu)中(zhong)酶總量(liang)/標(biao)記時加(jia)入(ru)的(de)酶量(liang)×100%
 

　　用於(yu)ELISA的(de)結(jie)合物(wu)的(de)酶量(liang)為(wei)400(g/ml時效果壹(yi)般，為(wei)500(g/ml時效果較(jiao)好(hao)，達(da) 1000(g/ml時(shi)效果好(hao)。mol.比(bi)值由(you)於結(jie)合物(wu)中(zhong)含的(de)IgG並(bing)不(bu)wan全(quan)可靠(kao)，所以(yi)不(bu)能作為(wei)主要(yao)參數。壹(yi)般認(ren)為(wei)mol.比(bi)值為(wei)0.7時效果壹(yi)般，1.0時(shi)效果較(jiao)好(hao)，1.5-2.0時(shi)最(zui)好(hao)。酶(mei)結(jie)合率為(wei) 7%時效果壹(yi)般，為(wei)9%-10%較好，達(da)30%以(yi)上時最(zui)好(hao)。