ELISA（酶(mei)聯(lian)免疫吸附試(shi)驗(yan)）中的包被是(shi)將(jiang)抗原或(huo)抗體(ti)固定(ding)到(dao)固相載體(ti)表(biao)面的(de)關鍵步驟(zhou)，通常(chang)使(shi)用(yong)聚苯乙(yi)烯微孔(kong)板(ban)作為載(zai)體(ti)。包被的(de)方式(shi)包括(kuo)直(zhi)接包被和(he)間(jian)接包被兩(liang)種(zhong)：
 

　　直(zhi)接包被：適(shi)用(yong)於天(tian)然(ran)蛋白和重組(zu)蛋白。將(jiang)抗原或(huo)抗體(ti)溶液(ye)直(zhi)接加入(ru)到(dao)微(wei)孔(kong)板(ban)中，通常(chang)在(zai)pH 9.0-9.6的碳酸(suan)鹽(yan)緩(huan)沖(chong)液(ye)中，室溫或(huo)4°C孵(fu)育過夜(ye)，以(yi)確(que)保抗原或(huo)抗體(ti)充分(fen)吸附到(dao)載(zai)體(ti)表(biao)面。
 

　　間(jian)接包被：用(yong)於小分(fen)子抗原或(huo)不(bu)穩定(ding)抗原。通過將(jiang)小分(fen)子抗原偶(ou)聯(lian)到(dao)載(zai)體(ti)蛋白如(ru)牛血清(qing)白(bai)蛋白(BSA)或(huo)卵(luan)清蛋白(OVA)上(shang)，形(xing)成(cheng)較(jiao)大(da)的(de)復(fu)合(he)物(wu)後再進(jin)行包(bao)被(bei)，或(huo)采(cai)用(yong)間(jian)接捕獲(huo)法(fa)，先用(yong)特(te)異性抗體(ti)包被，再通過抗原與(yu)抗體(ti)的結合(he)實現(xian)固相化。
 

　　包(bao)被液(ye)的選(xuan)擇(ze)也很關鍵，常見(jian)的有(you)pH 9.6的碳酸(suan)鹽(yan)緩(huan)沖(chong)液(ye)和接近生理(li)pH值(zhi)的磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩(huan)沖(chong)液(ye)。包被(bei)的(de)溫度(du)壹般在(zai)室溫(18-25°C)或(huo)4°C進(jin)行，有(you)時(shi)也可在(zai)37°C孵(fu)育2小時以(yi)加速(su)反(fan)應(ying)。包(bao)被(bei)濃度(du)通常(chang)為(wei)10ug/ml-20ug/ml，具體(ti)需(xu)根(gen)據載體(ti)和包被(bei)物(wu)的性(xing)質(zhi)調(tiao)整(zheng)。包(bao)被(bei)完(wan)成(cheng)後，為了(le)封(feng)閉非特(te)異性位點，防(fang)止(zhi)後(hou)續(xu)步驟(zhou)中的幹擾，通常(chang)會使(shi)用(yong)牛血清(qing)白(bai)蛋白(BSA)、脫(tuo)脂(zhi)奶粉(fen)等封(feng)閉劑(ji)進(jin)行封(feng)閉處(chu)理(li)。封(feng)閉劑(ji)的(de)選(xuan)擇(ze)應(ying)根(gen)據實驗(yan)的(de)具(ju)體(ti)需(xu)求和(he)背(bei)景噪聲(sheng)來確(que)定(ding)。