在(zai)實際(ji)篩選(xuan)時(shi),主(zhu)要(yao)從血(xue)清(qing)外(wai)觀和(he)實(shi)驗(yan)操(cao)作時(shi)細胞的(de)生長(chang)狀態進行(xing)。
從外(wai)觀(guan)上(shang):
1. 顏色(se):
根據血紅(hong)蛋白含(han)量的(de)不同(tong),胎(tai)牛(niu)血(xue)清可(ke)表(biao)現出黃(huang)色(se)或紅色(se),這個指(zhi)標(biao)的(de)意義在(zai)於能(neng)體(ti)現出采(cai)血過(guo)程的(de)嚴謹(jin)規(gui)範(fan)程度(du)。胎(tai)牛(niu)血(xue)清或多或少總有(you)點溶(rong)血,因(yin)為胎(tai)牛(niu)血(xue)清凝(ning)血(xue)功(gong)能(neng)差(cha),紅細胞容易(yi)破裂(lie);
2. 澄(cheng)清度(du):
高質(zhi)量(liang)的(de)胎(tai)牛(niu)血(xue)清由(you)於蛋白和脂(zhi)類等物(wu)質(zhi)含(han)量低,表(biao)現為稀(xi)薄、清(qing)淡;
3. 血清(qing)沈(chen)澱:
血清中的(de)沈澱(dian)是(shi)由(you)纖(xian)維蛋白的(de)凝(ning)聚(ju)產(chan)生(sheng),對(dui)血清(qing)質(zhi)量(liang)沒(mei)有(you)影響(xiang),沈(chen)澱的(de)產生(sheng)原因(yin)跟加工(gong)生產(chan)方式(shi)、是(shi)否反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)密切(qie)相(xiang)關(guan),在實(shi)驗(yan)操(cao)作中可(ke)能會對(dui)細胞觀(guan)察產(chan)生(sheng)影(ying)響(xiang)。
從性(xing)能(neng)上(shang):
1. 細胞形(xing)態(tai),在(zai)進行(xing)血(xue)清(qing)篩(shai)選(xuan)時(shi)首先(xian)觀察細胞的(de)生長(chang)形(xing)態(tai)是(shi)否產生(sheng)明(ming)顯(xian)變(bian)化(hua),以及(ji)觀察貼壁細胞的(de)貼壁情況(kuang),細胞在(zai)不同(tong)血(xue)清培養中可(ke)能會出現形(xing)態上(shang)的(de)差異;
2. 倍增(zeng)時(shi)間,壹(yi)般情(qing)況下會選(xuan)擇(ze)倍增(zeng)時(shi)間短(duan)的(de)血清(qing),值(zhi)得註意的(de)是(shi)血清的(de)影響(xiang)會傳(chuan)至5代,在進行(xing)測(ce)試(shi)時(shi),最好(hao)培養五代後(hou)進行(xing)計(ji)倍增(zeng)時(shi)間的(de)計算;
3. 克(ke)隆(long)形(xing)成率,測(ce)試(shi)時(shi)壹(yi)般選(xuan)50、100、200個細胞進行(xing)平(ping)板(ban)克(ke)隆(long)測試,平均5d左右換(huan)壹(yi)次液,兩(liang)周(zhou)後(hou)染(ran)色(se)計數(shu),對(dui)比克(ke)隆(long)形成(cheng)情(qing)況(kuang)。
血清的(de)質(zhi)量(liang),種類及(ji)使用(yong)的(de)濃度(du)都有(you)可(ke)能影(ying)響(xiang)細胞的(de)生長(chang),而不同(tong)批(pi)次的(de)血清(qing)支(zhi)持(chi)細胞生(sheng)長(chang)的(de)能力(li)也不同(tong),尤其是(shi)對(dui)克隆(long)細胞的(de)生長(chang),某(mou)些(xie)批(pi)次血(xue)清(qing)可(ke)能含(han)有(you)毒性(xing)或抑(yi)制(zhi)細胞生(sheng)長(chang)的(de)物質(zhi)。因(yin)此(ci),在(zai)購(gou)買大量血清之(zhi)前(qian),必須對(dui)血清(qing)支(zhi)持細胞生(sheng)長(chang)能(neng)力進行(xing)檢(jian)測(ce),然(ran)後(hou)再(zai)大量(liang)購(gou)買質(zhi)量(liang)好(hao)的(de)同壹(yi)批(pi)號的(de)血清(qing)。