根(gen)據酶標板(ban)與(yu)蛋白(bai)和其它分子(zi)結(jie)合才(cai)幹(gan)的不(bu)同(tong),又分為(wei)高(gao)結(jie)合力(li)、中(zhong)結(jie)合力(li)和氨基化等。
1、高(gao)結(jie)合力(li)
此(ci)種(zhong)酶標板(ban),表(biao)面(mian)經(jing)處(chu)理(li)後,其蛋(dan)白(bai)結(jie)合才(cai)幹(gan)大(da)大(da)增強(qiang),可達(da)300~400ng IgG/cm2,首(shou)要(yao)結(jie)合的(de)蛋(dan)白分子(zi)量(liang)>10kD。運(yun)用該類酶標板(ban)可進(jin)步(bu)敏感(gan)性(xing),並(bing)可相對(dui)減少(shao)包被(bei)蛋白(bai)的濃度和用(yong)量(liang),不(bu)足(zu)之(zhi)處(chu)為(wei)較易(yi)發生(sheng)非特(te)異(yi)性(xing)反應(ying)。抗(kang)原或抗體包被(bei)後,以(yi)非離(li)子(zi)去(qu)汙(wu)劑(ji)無(wu)法有(you)效地(di)封閉(bi)未結(jie)合蛋(dan)白(bai)的部位,需(xu)運(yun)用蛋(dan)白作為(wei)封(feng)閉(bi)劑(ji)。
2、中(zhong)結(jie)合力(li)
此(ci)類酶標板(ban)經(jing)表(biao)面(mian)疏水(shui)鍵與(yu)蛋白(bai)結(jie)合,適(shi)宜(yi)作為(wei)分子(zi)量(liang)>20kD的大(da)分子(zi)蛋(dan)白的固(gu)相載體,其蛋(dan)白(bai)結(jie)合才(cai)幹(gan)為(wei)200~300ng IgG/cm2。由(you)於該類酶標板(ban)所(suo)具(ju)有(you)的僅(jin)與(yu)大(da)分子(zi)結(jie)合的(de)特(te)性(xing),適(shi)用(yong)於作為(wei)未(wei)純化抗(kang)體或抗原的固(gu)相載體,可下(xia)降(jiang)潛在的(de)非特(te)異(yi)性(xing)穿(chuan)插(cha)反應(ying)。該類板(ban)可以(yi)慵(yong)懶(lan)蛋白(bai)或非離(li)子(zi)去(qu)汙(wu)劑(ji)作為(wei)封(feng)閉(bi)液。
ELISA試劑(ji)盒(he)實(shi)驗(yan)
3、氨基化
ELISA試劑(ji)盒(he)這(zhe)種(zhong)酶標板(ban)經(jing)表(biao)面(mian)改性(xing)處(chu)理(li)後具有(you)帶正(zheng)電(dian)荷(he)的氨基,其疏水(shui)鍵由(you)親水(shui)鍵代替。該類酶標板(ban)適宜(yi)作為(wei)小(xiao)分子(zi)蛋(dan)白的固(gu)相載體。運(yun)用適(shi)宜(yi)的緩(huan)沖(chong)液(ye)和pH值,其表(biao)面(mian)可通(tong)過離(li)子(zi)鍵(jian)與(yu)帶負(fu)電(dian)荷(he)的小(xiao)分子(zi)結(jie)合。由(you)於其表(biao)面(mian)的親(qin)水(shui)特(te)性(xing)和可通(tong)過其它交聯劑(ji)共(gong)價(jia)結(jie)合的(de)才(cai)幹,可用(yong)於固(gu)定溶(rong)於Triton-100、Tween 20等去汙(wu)劑(ji)的(de)蛋(dan)白分子(zi)。該類板(ban)的缺陷為(wei)由(you)於下降(jiang)了(le)疏水(shui)性,壹部分蛋白分子(zi)無(wu)法結(jie)合;此(ci)外,其表(biao)面(mian)需(xu)有(you)效地(di)封閉(bi)。由(you)於親水(shui)和共(gong)價(jia)的表(biao)面(mian)特(te)性(xing),運(yun)用的(de)封閉(bi)液有(you)必(bi)要(yao)可以(yi)與(yu)非反應(ying)性(xing)氨基基團和所(suo)挑(tiao)選的交聯劑(ji)中(zhong)任何功(gong)用基(ji)團(tuan)發生(sheng)作用。