第(di)二(er)抗體是指能(neng)和抗體(ti)結(jie)合，即抗體(ti)的抗體(ti)，其主(zhu)要作用是(shi)檢測抗體的存在，放大壹(yi)抗的信號(hao)。二抗(kang)是利(li)用抗(kang)體是大(da)分(fen)子(zi)的蛋白質具有抗原性(xing)的性(xing)質(zhi)，去(qu)免(mian)疫(yi)異種(zhong)動(dong)物(wu)，由(you)異(yi)種(zhong)動(dong)物(wu)的免(mian)疫(yi)系(xi)統(tong)產(chan)生(sheng)的針對於此(ci)抗(kang)體(ti)的免(mian)疫(yi)球蛋白。二抗針對某壹(yi)特(te)定物(wu)種(zhong)（如小鼠）的所(suo)有抗體(ti)（如IgG、IgM或(huo)IgA等）均(jun)具有反應性(xing)。以(yi)下列舉二(er)抗的原理及(ji)特(te)點：

1、SABC法(fa)

  原理：SABC法(fa)是利(li)用鏈(lian)酶(mei)親和素(Streptavidin)與生(sheng)物(wu)su(Biotin)*的高度親和力這壹生(sheng)物(wu)學(xue)性(xing)質(zhi)，先(xian)將(jiang)生(sheng)物(wu)su與辣(la)根過氧(yang)化物(wu)酶(mei)(HRP)結(jie)合，形成生(sheng)物(wu)su化(hua)HRP，然(ran)後與鏈(lian)酶(mei)親和素按(an)壹(yi)定比(bi)例(li)混(hun)合，形成SABC復(fu)合物(wu)。用生(sheng)物(wu)su化(hua)二(er)抗(kang)與第(di)壹(yi)抗體結(jie)合，再與SABC復(fu)合物(wu)聯(lian)結(jie)形成抗原～抗體～生(sheng)物(wu)su化(hua)二(er)抗(kang)～ SABC復(fu)合物(wu)。最後用底(di)物(wu)顯(xian)色(se)劑(ji)顯色(se)。

  特(te)點：該(gai)法具(ju)有靈(ling)敏度高以(yi)及(ji)低背景染(ran)色(se)等特(te)點。

2、SP法(fa)

  原理：根據生(sheng)物(wu)su(Biotin) 與鏈(lian)黴親和素(Streptavidin)具(ju)有強結(jie)合力的原理設(she)計(ji)。在壹抗(kang)（兔(tu)源(yuan)與鼠源(yuan)）與相(xiang)應的靶(ba)抗(kang)原結(jie)合後，生(sheng)物(wu)su化(hua)標(biao)記的抗多價(jia)二(er)抗(kang)與壹(yi)抗特(te)異結(jie)合；二抗上(shang)標(biao)記的生(sheng)物(wu)su與標(biao)記了辣根過氧(yang)化物(wu)酶(mei)（HRP）的鏈黴親和素結(jie)合，形成抗原～特(te)異性(xing)壹(yi)抗(kang)～生(sheng)物(wu)su化(hua)的二抗(kang)～HRP 標(biao)記的鏈黴親和素復(fu)合物(wu)。

  特(te)點：該(gai)法孵育(yu)時(shi)間(jian)短（通(tong)常為10min），靈(ling)敏度高以(yi)及(ji)低背景染(ran)色(se)等特(te)點。

3. Polymer酶(mei)標(biao)二抗法(fa)

  原理：該(gai)法采(cai)用壹(yi)段多聚(ju)氨基(ji)酸聚(ju)合物(wu)做(zuo)為(wei)載(zai)體(ti)鏈(lian)，將(jiang)該(gai)多聚(ju)物(wu)與二(er)抗結(jie)合，然後可(ke)再(zai)標(biao)記上(shang)多個HRP/AP酶(mei)分(fen)子(zi)，所(suo)以(yi)同樣(yang)具有很高的信號(hao)放大作(zuo)用。

  特(te)點：靈(ling)敏度高；操(cao)作步(bu)驟簡(jian)單；無(wu)需進行(xing)內源(yuan)性(xing)的生(sheng)su封(feng)閉。

4. 直接酶(mei)標(biao)二抗法(fa)

  該(gai)法是(shi)將(jiang)HRP/AP酶(mei)分(fen)子(zi)直接標(biao)記於二抗(kang)上(shang)。因此(ci)需(xu)要(yao)普(pu)通(tong)的酶(mei)標(biao)二抗即(ji)可完(wan)成(cheng)。實(shi)驗(yan)簡(jian)單，成(cheng)本(ben)低，但是(shi)因為沒(mei)有信號(hao)放大作(zuo)用，所(suo)以(yi)對很多表達豐(feng)度(du)不(bu)是(shi)很高的抗原就(jiu)可(ke)能(neng)檢測不到。