木香(xiang)PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)

實驗流程：
1. 整個(ge)檢測過程應(ying)嚴格(ge)按(an)照本說明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分別在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本處理(li)區(qu)和(he)PCR擴(kuo)增區(qu)進行(xing)操(cao)作，各(ge)區(qu)實驗服(fu)、儀(yi)器 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使(shi)用，不能混(hun)用；實驗用吸(xi)頭(tou)采用帶濾芯吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處理(li)區(qu)應配(pei)有生(sheng)物安全櫃(gui)，樣(yang)本處理(li)在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全櫃(gui)中進行(xing)操(cao)作；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配有紫(zi)外(wai)線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣(yang)本處理(li)過程應(ying)在(zai)0-4℃條件下操(cao)作，且(qie)完(wan)成實驗後立即上(shang)機(ji)檢測；樣(yang)本處理(li)過程中使(shi)用的器具耗(hao)材(cai)應經過無(wu)核(he)酶(mei)處理(li)。
3. 每次實驗應該(gai)設(she)置陰(yin)、陽(yang)性(xing)對(dui)照。
4. 試劑(ji)盒(he)所有試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用前應該(gai)在(zai)常溫下充分融化(hua)混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬(shun)時(shi)離心。
5. 試劑(ji)盒(he)內所配(pei)陰(yin)性(xing)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照在(zai)壹(yi)次使(shi)用前應全部(bu)轉移至標(biao)本準備(bei)區(qu)，並(bing)單獨(du)存(cun)放。
6. 為防(fang)止(zhi)熒光幹擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直接(jie)接(jie)觸(chu)PCR反應(ying)管(guan)，並(bing)應避免在(zai)PCR反應(ying)管(guan)上進(jin)行(xing)任何標記。
7. 儀器 擴(kuo)增相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按(an)照本說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求(qiu)進行(xing)設(she)置；不(bu)同批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒光定量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置中不選(xuan)ROX校正，淬(cui)滅(mie)基(ji)因選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過程中產品(pin)的(de)廢(fei)棄物應該(gai)進行(xing)無(wu)害(hai)化(hua)處理(li)後方可(ke)丟(diu)棄(qi)。

特點：
1. 即開即(ji)用，用戶(hu)只需要(yao)提(ti)供病(bing)毒樣(yang)品(pin)。
2. 根據(ju)地黃(huang)保(bao)守序列(lie)設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹(yi)性引物(wu)，與(yu)相(xiang)關(guan)病(bing)毒無(wu)交(jiao)叉(cha)反應。
3. 靈敏度(du)可(ke)以(yi)達到(dao)幾(ji)百(bai)拷(kao)貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式熒光定量(liang) PCR 檢測，避免後(hou)續(xu)汙(wu)染(ran)。
5. 本試劑(ji)盒(he)足夠(gou) 50 次 20μL 反應(ying)體(ti)系的(de)熒光定量(liang) PCR。
6. 本產品(pin)只適(shi)用於科研，不能用於臨床診(zhen)斷(duan)。
使(shi)用方法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采(cai)集(ji)：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預(yu)培養按(an)照樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集(ji)與(yu)預(yu)培養按(an)照《食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)微(wei)生(sheng)物(wu)學檢驗阪崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗要(yao)求(qiu)進行(xing)。
2、血液(ye)樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌註(zhu)射器抽(chou)取(qu)受檢者靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝(ning)管(guan)，立即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取(qu)糞便(bian)置(zhi)於滅(mie)菌的收集(ji)管(guan)中送檢。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣(yang)品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新鮮滲(shen)出(chu)物(wu)、粘(zhan)液膿血(xue)送(song)檢。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性(xing)對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個 10 倍稀(xi)釋度(du)為例(li)）
1. 註(zhu)意：由於標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)非常高(gao)，因此(ci)下列(lie)稀(xi)釋操(cao)作壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的(de)區(qu)域進(jin)行(xing)，千萬(wan)不能汙(wu)染(ran)樣(yang)品(pin)或(huo)本試劑(ji)盒(he)的其(qi)他(ta)成分）。為增(zeng)加(jia)產品(pin)穩(wen)定性(xing)和(he)避免擴(kuo)散(san)傳(chuan)染(ran)性(xing)病(bing)原，本產品(pin)不(bu)提(ti)供活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照，只提供可(ke)以(yi)直接(jie)使(shi)用的 DNA段作(zuo)為陽(yang)性(xing)對(dui)照。
2. 標記 6 個離心管(guan)，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭(tou)分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒光 PCR 模板稀(xi)釋液（用帶芯槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照(上步稀(xi)釋所得(de))，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照到(dao) 5 號管(guan)中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用。
7. 重復(fu)上(shang)面的操(cao)作直到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待(dai)用。
註(zhu)：上(shang)述(shu)樣(yang)品(pin)建議(yi)經過增(zeng)菌後，收集(ji)培養物(wu)用於檢測。 
二、DNA提取(qu)：
可(ke)采用PCR試劑(ji)盒(he)配備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液，按(an)以(yi)下說明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸(suan)的(de)粗提。也(ye)可(ke)采購上海(hai)澤(ze)葉生物(wu)科技(ji)有限(xian)公司(si)生產的DNA提取(qu)試劑(ji)盒(he)(過柱(zhu)法(fa)-熒光配套)或其(qi)他(ta)合(he)適(shi)的商(shang)業(ye)化(hua)產品(pin)，並(bing)按(an)照相(xiang)應(ying)試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)進行(xing)操(cao)作。
1、液體(ti)培養物(wu)：取液(ye)體(ti)培養物(wu)100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌離心管(guan)中，8000rpm離心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清(qing)，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
2、固體(ti)培養物(wu)：挑取單克隆菌落與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑取米(mi)粒大(da)小糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌離心管(guan)中，加入(ru)0.5mL生理(li)鹽(yan)水，振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分鐘，棄上清，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
4、其他(ta)液(ye)體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清，沈澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液充分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離心3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對(dui)照和(he)陰性對(dui)照為已(yi)經抽提(ti)好的核(he)酸(suan)(無(wu)需(xu)提取)，直接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到(dao)反(fan)應(ying)體(ti)系中即可(ke)。由於陽(yang)性(xing)對(dui)照濃(nong)度(du)較(jiao)高(gao)，建議(yi)在(zai)樣(yang)品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域加(jia)入陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
CGB5 Others Human 人 CGB5 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 莫索(suo)尼(ni)定Moxonidine 質量(liang)規格：度(du)>99%,BR,可(ke)用於細胞培養

家兔(tu)骨髓間充質(zhi)幹細胞;2012083MSC莫索(suo)尼(ni)定(標準(zhun)品(pin))Moxonidine 質量(liang)規格：HPLC>98%,標準(zhun)品(pin)

二氫還(hai)原酶(mei)缺(que)陷型(xing)中國倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢細胞;CHO/dhFr- 食管(guan)癌細胞，TE-11細胞 B82細胞，鼠(shu)細胞系(xi)奈(nai)帕(pa)芬胺Nepafenac質量(liang)規格：>99%,BR

B16-F10, 小鼠色(se)素(su)瘤高(gao)轉移細胞 Mouse奈帕(pa)芬胺(標準(zhun)品(pin))Nepafenac質量(liang)規格：>99%,標準(zhun)品(pin)

SOST Others Rat 大(da)鼠(shu) SOST / Sclerostin 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 尼(ni)卡(ka)巴(ba)嗪 Nicarbazin 質量(liang)規格：>98%
LRG1 Others Human 人 LRG1 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 並(bing)五苯(ben)(以(yi)升華法(fa)化(hua))Pentacene (purified by sublimation)質量(liang)規格：

眼晶狀體(ti)上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)顏(yan)料(liao)藍(lan) 15(以(yi)升華法(fa)化(hua))Pigment Blue 15 (purified by sublimation)質量(liang)規格：>98.0%(T)

Jurkat E6-1細胞，人(ren)T細胞瘤 人癌細胞,4T1細胞 上皮細胞生(sheng)長(chang)添加物(wu)-2EpiCGS-21,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))1,2-Propanediol質量(liang)規格：standard for GC, ≥99.5% (GC)

水牛(niu)皮膚成纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞;WB-S2正十(shi)二烷基苯(ben)(analytical standard,≥99.5%(GC))1-Phenyldodecane質量(liang)規格：analytical standard,≥99.5%(GC)

IL1RN Others Human 人 IL1RA / IL1F3 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 2-苯(ben)乙(yi)醇(chun)(GC,>99.5%(GC))2-Phenylethal質量(liang)規格：GC,>99.5%(GC)
IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 葡萄糖-6-1酸(suan)脫(tuo)氫酶(mei)，硫(liu)酸(suan)銨懸(xuan)浮液(ye)質量(liang)規格：酶(mei)活(huo)>200 NADP units/mg，BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase

CM-H022人前(qian)列腺成纖(xian)維(wei)細胞*培養基(ji)100mL蘋(ping)果(guo)酸(suan)脫(tuo)氫酶(mei)(>12,000U/ml，BC)質量(liang)規格：>12,000U/ml，BCMalate dehydrogenase

BBOX1 Others Human 人 BBOX1 / Gamma-BBH 桿(gan)狀病(bing)毒-昆蟲(chong)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 草(cao)甘膦標(biao)準(zhun)溶液(10μg/ml,u=2%)質量(liang)規格：10μg/ml,u=2%N-(Phosphomethyl)glycine solution

支(zhi)氣(qi)管(guan)成纖(xian)維(wei)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)辛(分析標準(zhun)品(pin),99%)質量(liang)規格：分析標準(zhun)品(pin),99%Phoxim

恒河(he)猴腎(shen)細胞;RM-1 人胰(yi)腺癌細胞，HPAC細胞 SGC-7901(胃腺癌細胞)除草(cao)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)(10μg/ml,u=5%)質量(liang)規格：10μg/ml,u=5%Nitrofen solution
木香(xiang)PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)人微(wei)血(xue)管(guan)內皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-腺嘌(piao)呤二核(he)苷(gan)酸(suan) 3'-1酸(suan)鈉鹽(yan)水合(he)物質(zhi)量(liang)規格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate  salt hydrate

PROM1 Others Rat 大(da)鼠(shu) CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 腺嘌(piao)呤鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)質量(liang)規格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Adenine

家兔(tu)腎(shen)細胞;RABK3硫(liu)代(dai)腺嘌(piao)呤二核(he)苷(gan)酸(suan)質(zhi)量(liang)規格：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Thionicotinamide
儲存(cun)條(tiao)件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收集(ji)、處理(li)及保(bao)存(cun)方法(fa)
1. 血清(qing)：使(shi)用不含熱原和(he)內毒素(su)的(de)試管(guan)，操(cao)作過程中避免任何細胞刺(ci)激，收集(ji)血液(ye)後，3000 轉離心10 分鐘將(jiang)血清(qing)和(he)紅細胞迅(xun)速小心地(di)分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上(shang)清(qing)液(ye)：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和(he)聚(ju)合(he)物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組織(zhi)加入適(shi)量(liang)生理鹽(yan)水搗(dao)碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存(cun)：如(ru)果(guo)樣(yang)本收集(ji)後不(bu)及時(shi)檢測，請按(an)壹(yi)次用量(liang)分裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避免反(fan)復(fu)凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫(wen)下解凍並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均(jun)勻(yun)地充分解凍。