燈心(xin)草(cao)染料(liao)法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒*

儲(chu)存條(tiao)件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品收集(ji)、處理(li)及(ji)保(bao)存方(fang)法
1. 血(xue)清：使(shi)用(yong)不含(han)熱(re)原(yuan)和內毒素的(de)試(shi)管(guan)，操作過程(cheng)中(zhong)避免(mian)任何(he)細胞刺激(ji)，收集(ji)血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘將(jiang)血(xue)清和紅(hong)細胞迅速小心(xin)地(di)分離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬酸(suan)鹽或肝素抗凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)30 分鐘取(qu)上(shang)清。
3. 細胞上(shang)清液：3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘去除顆(ke)粒和(he)聚合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生理(li)鹽水(shui)搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分鐘取(qu)上(shang)清。
5. 保(bao)存：如(ru)果(guo)樣本收集(ji)後(hou)不及(ji)時檢測，請(qing)按壹(yi)次用量(liang)分裝，凍存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反復凍融(rong)，在室溫下(xia)解(jie)凍並確(que)保(bao)樣品均勻(yun)地充分解(jie)凍。

特(te)點：
1. 即開即用，用(yong)戶(hu)只需(xu)要(yao)提供(gong)病毒樣品。
2. 根(gen)據(ju)地黃(huang)保(bao)守序(xu)列(lie)設計(ji)的(de)專壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與相(xiang)關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度(du)可以達到幾(ji)百(bai)拷貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒光(guang)定量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免後(hou)續汙(wu)染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒足(zu)夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的熒光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本產品只適(shi)用(yong)於(yu)科研(yan)，不能用於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)。

使(shi)用(yong)方法(fa)：
壹(yi)、樣品采集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣品：樣品的采集(ji)與預培(pei)養(yang)按照(zhao)樣品的采集(ji)與預培(pei)養(yang)按照(zhao)《食(shi)品(pin)衛(wei)生微(wei)生物(wu)學檢驗阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣品：用無菌註射(she)器抽取(qu)受(shou)檢者靜(jing)脈血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸(suan)鈉(na))抗凝(ning)管，立(li)即混勻(yun)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：取(qu)糞(fen)便置於(yu)滅菌(jun)的收(shou)集(ji)管中(zhong)送檢。
4、病竈(zao)部(bu)位(wei)樣品：取(qu)發(fa)病部(bu)位(wei)新鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液(ye)膿血(xue)送檢。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋(shi)度(du)為例(li)）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標準(zhun)品(pin)濃度(du)非常(chang)高，因此下(xia)列(lie)稀釋(shi)操(cao)作壹定要(yao)在獨立(li)的(de)區(qu)域(yu)進行，千萬不(bu)能汙(wu)染樣品或本試(shi)劑(ji)盒的(de)其他(ta)成(cheng)分）。為增加產品穩(wen)定(ding)性(xing)和(he)避免(mian)擴(kuo)散(san)傳(chuan)染性(xing)病原(yuan)，本產品不(bu)提(ti)供活(huo)體樣品做陽性(xing)對照(zhao)，只提(ti)供(gong)可以直(zhi)接使(shi)用(yong)的 DNA段作為陽性(xing)對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心(xin)管(guan)，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)分別加(jia)入 45 μL 熒光(guang) PCR 模板稀釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯(xin)槍頭(tou)，下(xia)同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de)1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在 6 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)(上(shang)步(bu)稀釋(shi)所(suo)得(de))，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在 5 號(hao)管中(zhong)加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)到 5 號(hao)管中(zhong)，充分震蕩(dang) 1 分鐘，得(de) 1×10E5 拷貝/μL 的(de)陽性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
7. 重復上面的操作直到得(de)到 6 個(ge)稀釋(shi)度(du)的陽性(xing)對照(zhao)。放冰(bing)上待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述樣品建議(yi)經(jing)過(guo)增菌後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物用(yong)於(yu)檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可采用PCR試(shi)劑(ji)盒配備的(de)DNA抽(chou)提(ti)液，按以(yi)下(xia)說明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗提。也可采購上海(hai)澤(ze)葉(ye)生物(wu)科技(ji)有(you)限公司(si)生產的DNA提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(過(guo)柱(zhu)法-熒光(guang)配套)或(huo)其他(ta)合(he)適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產品，並按(an)照相(xiang)應試(shi)劑(ji)盒說明(ming)進行(xing)操作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物：取(qu)液(ye)體培(pei)養(yang)物100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心(xin)3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加入50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單(dan)克(ke)隆菌落與50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣品：挑取(qu)米粒大小糞(fen)便於(yu)滅菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，加入(ru)0.5mL生理(li)鹽水(shui)，振(zhen)蕩混勻(yun)，13000rpm離(li)心(xin)3分鐘，棄(qi)上清，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其他(ta)液(ye)體標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄(qi)上(shang)清，沈澱(dian)中(zhong)加入(ru)50μL DNA抽(chou)提(ti)液充分混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽性(xing)對照(zhao)和陰(yin)性(xing)對照(zhao)為已經抽提好(hao)的(de)核(he)酸(無(wu)需(xu)提取(qu))，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)即可。由於(yu)陽性(xing)對照(zhao)濃度(du)較(jiao)高，建議(yi)在樣品制備區(qu)域(yu)加入陽性(xing)對照(zhao)。 
腎(shen)皮(pi)層(ceng)上(shang)皮(pi)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)去氧膽(dan)酸Deoxycholic acid質量(liang)規(gui)格(ge)：>95.0%

NRG1 Others Human 人(ren) NRG1-beta 1 (ECD) 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) β-環(huan)糊精β-Cyclodextrin質量(liang)規(gui)格(ge)：>98.5%,藥用級

大(da)鼠(shu)腎上皮(pi)細胞*培(pei)養(yang)基(ji) 100mLRamipril質量(liang)規(gui)格(ge)：>98.0,BR

MR1 [derivative of HB-11048]中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)X小(xiao)鼠(shu)B細胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS(標準(zhun)品(pin))Ramipril質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98,標準(zhun)品(pin)

IGFBP6 Protein Human 重組(zu)人(ren) IGFBP6 / IBP-6 蛋白(bai) (His 標簽)質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,BR
猴(hou)腎(shen)細胞;Vero IgCD4硫(liu)化鐵(tie) (II)(>70%,BR)Iron (II) sulfide質量(liang)規(gui)格(ge)：>70%,BR

NGFR Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) NGFR / P75 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 四(si)氧(yang)化三鐵(tie)(>98%,BR)Iron (II,III ) oxide質量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR

(含(han)100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖(chong)液) 10mL3-乙(yi)基(ji)-d5-腺(xian)嘌(piao)呤(ling)3-Ethyl-d5-adenine質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)

HGC-27人(ren)胃(wei)癌(ai)細胞(未分化) HGC-27 human gasic carcima cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS3-甲(jia)基(ji)-d3-腺(xian)嘌(piao)呤(ling)3-Methyl-d3-adenine質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)

IL13 Protein Cymolgus 重組(zu)食蟹猴(hou) IL13 / ALRH 蛋白(bai) (His 標簽)N1-氧(yang)基(ji)-腺(xian)嘌(piao)呤(ling)Adenine-N1-Oxide質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)
OLR1 Others Rat 大(da)鼠(shu) OLR1 / LOX1 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,USP 32,BR,可用於(yu)細胞培(pei)養(yang)Spirolactone

神(shen)經(jing)細胞培(pei)養(yang)基(ji)NM-prf（標準(zhun)品(pin)）質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準(zhun)品(pin)Spirolactone

SiHa細胞，人(ren)細胞 小(xiao)鼠(shu)血(xue)細胞,WEHI-3細胞 成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)質量(liang)規(gui)格(ge)：>98.5%,BR,可用於(yu)細胞培(pei)養(yang)Azathioprine

Hela 299(人(ren)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2鹽(yan)酸(suan)巴(ba)尼(ni)地平(ping)質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,BRBarnidipine HCl

hMNC-CB pooled Pellet 人(ren)類(lei)臍(qi)帶(dai)血(xue)單(dan)核(he)細胞混(hun)合(he)團塊，超 > 1 mio.cells 人(ren)角膜上(shang)皮細胞總(zong)RNAHCEpiC NA鹽(yan)酸(suan)頭孢(bao)吡1 質量(liang)規(gui)格(ge)：含(han)量(liang)82.5%~91.1%（每(mei)毫(hao)克(ke)頭孢(bao)吡1含(han)量(liang)，幹(gan)品）Cefepime
燈心(xin)草(cao)染料(liao)法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒*NRK-52E 大(da)鼠(shu)腎細胞單(dan)1酸(suan)鹽(yan)質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)Acyclovir Mophosphate

大(da)額(e)牛(niu)皮(pi)膚(fu)成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細胞;BOS-2-d4質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)Acyclovir-d4

Caki-1, 人(ren)腎(shen)透(tou)明(ming)細胞癌(ai)皮膚(fu)轉(zhuan)移(yi)細胞N2-乙(yi)酰基(ji)-9-（2-乙(yi)酰氧基(ji)乙(yi)氧基(ji)甲基(ji)）（雜質）質量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進口(kou)N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)

人(ren)腦瘤細胞;SF763 大(da)鼠(shu)頜下(xia)腺(xian)上(shang)皮(pi)細胞*培(pei)養(yang)基(ji) 1
實(shi)驗流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個檢(jian)測過(guo)程(cheng)應嚴(yan)格按照本說明(ming)書要(yao)求(qiu)分別在試(shi)劑(ji)準備(bei)區(qu)、樣本處理(li)區(qu)和PCR擴(kuo)增區(qu)進行(xing)操作，各(ge)區(qu)實(shi)驗服、儀(yi)器 、耗(hao)材應(ying)獨立(li)使(shi)用(yong)，不能混用；實(shi)驗用(yong)吸(xi)頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭(tou)；樣本處理(li)區(qu)應配有(you)生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)，樣本處理(li)在生物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中(zhong)進行(xing)操作；三個區(qu)應該配有(you)紫外(wai)線殺菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為避(bi)免RNA降(jiang)解(jie)，樣本處理(li)過程(cheng)應在0-4℃條(tiao)件(jian)下(xia)操(cao)作，且(qie)完(wan)成(cheng)實(shi)驗後(hou)立(li)即上機檢測；樣本處理(li)過程(cheng)中(zhong)使(shi)用(yong)的器具耗(hao)材應(ying)經(jing)過(guo)無核(he)酶處理(li)。

3. 每(mei)次實(shi)驗應(ying)該設置(zhi)陰(yin)、陽性(xing)對照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)在使(shi)用(yong)前(qian)應該在常(chang)溫下(xia)充分融(rong)化混(hun)勻(yun)，並應(ying)瞬(shun)時離心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒內所(suo)配陰(yin)性(xing)和(he)陽性(xing)對照(zhao)在壹次使(shi)用(yong)前(qian)應全(quan)部(bu)轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標本準備區(qu)，並單(dan)獨存放(fang)。
6. 為防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應避(bi)免裸手直(zhi)接接觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管，並應(ying)避免在PCR反(fan)應(ying)管上進(jin)行任何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關參(can)數應按(an)照(zhao)本說明(ming)書相(xiang)關要(yao)求(qiu)進行(xing)設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不能混用。
8. ABI系(xi)列熒光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設置(zhi)中(zhong)不選(xuan)ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基(ji)因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過(guo)程(cheng)中(zhong)產品的(de)廢棄(qi)物應(ying)該進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化(hua)處理(li)後(hou)方可丟棄。