生姜染料法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)*

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用(yong)，用(yong)戶只需要(yao)提供病毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據地黃(huang)保守(shou)序列(lie)設計(ji)的專壹(yi)性引物(wu)，與相(xiang)關病毒(du)無交(jiao)叉(cha)反應。
3. 靈(ling)敏度(du)可以(yi)達(da)到(dao)幾(ji)百(bai)拷(kao)貝(bei)/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後(hou)續(xu)汙染。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足(zu)夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本產品只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研，不能用於(yu)臨(lin)床診斷。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣(yang)品：樣(yang)品的采集(ji)與預(yu)培養按(an)照(zhao)樣(yang)品的采集(ji)與預(yu)培養按(an)照(zhao)《食(shi)品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物(wu)學(xue)檢驗阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿菌(jun)檢驗要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血液樣(yang)品：用(yong)無菌(jun)註射(she)器抽(chou)取受檢者(zhe)靜脈(mai)血2mL，註(zhu)入無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸鈉)抗(kang)凝(ning)管，立(li)即(ji)混勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品：取(qu)糞便(bian)置於(yu)滅(mie)菌(jun)的收(shou)集(ji)管中送檢。
4、病竈(zao)部(bu)位樣(yang)品：取(qu)發病部(bu)位新鮮(xian)滲出物(wu)、粘液(ye)膿血送檢。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個(ge) 10 倍(bei)稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意：由於(yu)標準(zhun)品(pin)濃度(du)非常(chang)高(gao)，因此下列(lie)稀(xi)釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的區域(yu)進行，千萬(wan)不能汙染樣(yang)品或(huo)本試(shi)劑(ji)盒(he)的其他成分(fen)）。為(wei)增(zeng)加產品穩(wen)定性(xing)和避免(mian)擴(kuo)散傳(chuan)染性病原，本產品不提供活(huo)體(ti)樣(yang)品做(zuo)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只提供可(ke)以(yi)直接(jie)使(shi)用的 DNA段作(zuo)為(wei)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離(li)心管，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)分(fen)別加入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋(shi)液(ye)（用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)，下(xia)同）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
5. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上步稀(xi)釋(shi)所(suo)得)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
6. 換(huan)槍頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管中加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)到 5 號(hao)管中，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的操作(zuo)直到得到 6 個(ge)稀(xi)釋(shi)度(du)的陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放(fang)冰上待用。
註(zhu)：上述(shu)樣(yang)品建議經(jing)過增菌(jun)後，收(shou)集(ji)培(pei)養物(wu)用於(yu)檢(jian)測。 
二、DNA提取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配備(bei)的DNA抽(chou)提液，按(an)以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的粗提。也(ye)可(ke)采購(gou)上海澤(ze)葉(ye)生(sheng)物(wu)科技(ji)有(you)限公司生產的DNA提取試(shi)劑(ji)盒(he)(過柱法(fa)-熒光(guang)配(pei)套)或(huo)其他合適(shi)的商(shang)業(ye)化(hua)產品，並按(an)照(zhao)相應(ying)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)操作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養物(wu)：取液(ye)體(ti)培(pei)養物(wu)100μL加到1.5mL無(wu)菌(jun)離心(xin)管中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上清，加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
2、固體(ti)培(pei)養物(wu)：挑(tiao)取單克(ke)隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
3、糞便(bian)樣(yang)品：挑(tiao)取米(mi)粒大(da)小(xiao)糞便(bian)於(yu)滅(mie)菌(jun)離心(xin)管中，加入0.5mL生(sheng)理鹽水(shui)，振蕩混勻，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
4、其他液體(ti)標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上清，沈澱(dian)中加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性(xing)對照(zhao)為(wei)已經抽(chou)提好的核(he)酸(無(wu)需提取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入到(dao)反(fan)應體(ti)系(xi)中即(ji)可(ke)。由於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃度(du)較高(gao)，建議在(zai)樣(yang)品制備(bei)區(qu)域加入陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗流程：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測過程應嚴格(ge)按(an)照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)區(qu)、樣(yang)本處理(li)區和(he)PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行操作，各區實(shi)驗服(fu)、儀器 、耗(hao)材應獨(du)立(li)使(shi)用，不能混用；實(shi)驗用吸(xi)頭(tou)采(cai)用帶(dai)濾芯吸(xi)頭(tou)；樣(yang)本處理(li)區應(ying)配有(you)生物(wu)安(an)全櫃，樣(yang)本處理(li)在生(sheng)物(wu)安(an)全櫃中進(jin)行(xing)操作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該配(pei)有(you)紫外線(xian)殺(sha)菌(jun)裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解(jie)，樣(yang)本處理(li)過程應在0-4℃條(tiao)件下操(cao)作，且完(wan)成實(shi)驗後立(li)即(ji)上機檢(jian)測；樣(yang)本處理(li)過程中使(shi)用的器具耗(hao)材(cai)應(ying)經(jing)過無核(he)酶處理。
3. 每(mei)次實驗應該(gai)設(she)置陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用前(qian)應該(gai)在常(chang)溫(wen)下(xia)充(chong)分融化(hua)混勻，並應瞬時(shi)離心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配陰性(xing)和陽(yang)性對(dui)照(zhao)在壹(yi)次使(shi)用前(qian)應全(quan)部(bu)轉移至(zhi)標本準(zhun)備(bei)區(qu)，並單獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應管，並應避免(mian)在PCR反(fan)應管上進(jin)行(xing)任何(he)標記(ji)。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參數應(ying)按(an)照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)設(she)置；不同批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不能混用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀參數設(she)置中不選ROX校(xiao)正(zheng)，淬滅(mie)基因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程中產品的廢棄(qi)物(wu)應該(gai)進行無害化處(chu)理(li)後方(fang)可(ke)丟棄(qi)。
儲存條件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處(chu)理及(ji)保存方(fang)法(fa)
1. 血清：使(shi)用不含(han)熱(re)原和內(nei)毒(du)素的試(shi)管，操作過程中避(bi)免(mian)任何(he)細(xi)胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液後，3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清和紅(hong)細(xi)胞迅速小心地分離。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸鹽(yan)或(huo)肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離心30 分(fen)鐘(zhong)取上清。
3. 細(xi)胞上清液：3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)去除顆(ke)粒和(he)聚(ju)合物(wu)。
4. 組織(zhi)勻漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加入適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)取上清。
5. 保(bao)存：如果(guo)樣(yang)本收(shou)集(ji)後(hou)不及(ji)時檢(jian)測，請(qing)按(an)壹次(ci)用(yong)量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於(yu)-20℃，避(bi)免反復(fu)凍融，在(zai)室(shi)溫(wen)下解(jie)凍並確保樣(yang)品均勻地充(chong)分解(jie)凍。
HB611(人肝癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞培(pei)養基FM十二水(shui)合硫(liu)酸(suan)鐵(tie)銨(an)(>98%,BR)Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR

腎(shen)系(xi)膜細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 ×105方(fang)(1ml)鉬(mu)酸(suan)銨(an)四(si)水(shui)Ammonium molybdate, tetrahydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR

ADRBK1 Others Human 人 GRK2 / ADRBK1 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 1鉬(mu)酸(suan)銨(an)(>96.5%,BR)Ammonium phosphomolybdate , hydrate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>96.5%,BR

雜交(jiao)瘤(liu)(B類(lei));Z153A2A5B3A121酸(suan)氫銨(an)鈉(>98%,BR)Ammonium  phosphate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR

HUVEC細(xi)胞，人臍靜脈血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞 人肝細(xi)胞正(zheng)常(chang),HL-7702細(xi)胞 CL-0072Daudi(人瘤細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2丁(ding)二酸(suan)銨(an)(>98%,BR)Ammonium succinate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,BR
HS 683(人腦(nao)膠(jiao)質(zhi)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 生(sheng)孢(bao)梭(suo)菌(jun)*-5'-三(san)1酸(suan)三(san)鈉(na)鹽(yan)ITP•Na3質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>95%,BR

滑(hua)膜細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)鳥(niao)苷(gan)-5'-三(san)1酸(suan)二鈉(na)鹽GTP.Na2質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>95%,BR

CNDP2 Others Mouse 小(xiao)鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 4,4'-二正(zheng)辛(xin)氧基氧化(hua)偶氮(dan)苯(ben)(>95.0%(N))4,4'-Di-n-octyloxyazoxybenzene質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>95.0%(N)

人髓母細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞;Daoy4,4'-二壬(ren)氧基氧化(hua)偶氮(dan)苯(ben)4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：

HMy2.CIR細(xi)胞，人B母(mu)細(xi)胞 人肝癌細(xi)胞,H7402細(xi)胞 CL-0200RWPE1(人前列(lie)腺(xian)上皮(pi)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×24'-(反(fan)-4-戊基環己(ji)基)二苯(ben)基-4-甲(jia)腈(>98.0%(GC))4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98.0%(GC)
P3HR1細(xi)胞，人EBV陽(yang)性B瘤(liu)細(xi)胞 大(da)鼠(shu)胰腺(xian)癌細(xi)胞株(zhu),DSL-6A/C1細(xi)胞 人小腦(nao)星形膠質(zhi)細(xi)胞cDNAHA-c cDNA*-d8質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Aripiprazole-d8

NCI-H716(人結(jie)直腸腺(xian)癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2*-d8 (丁(ding)基-d8)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Aripiprazole-d8 (Butyl-d8)

CoC1(人卵巢癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0142LM/TK(小(xiao)鼠胸腺(xian)激(ji)酶缺(que)陷(xian)細(xi)胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)氣(qi)管上皮(pi)細(xi)胞;RTE阿(e)紮那(na)韋-標記(ji)d4質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Atazanavir - Labeled d4

中國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵巢細(xi)胞;CHO4'-羥(qiang)基托(tuo)莫西汀質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)4'-Hydroxy Atomoxetine

PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / PTPT 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 脫氯(lv)阿(e)托(tuo)伐醌(kun)質量(liang)規(gui)格(ge)：美(mei)國(guo)進(jin)口(kou)Deschloro Atovaquone
生(sheng)姜染料法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)*PRLR Others Human 人 PRLR / Prolactin Receptor 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 3,4-二羥(qiang)基本酸100毫克(ke)

人內(nei)根(gen)殼(ke)細(xi)胞總(zong)RNAHHIRSC NA對(dui)基-α-D-吡(bi)... 4-Nitrophenyl α-D-galactopyranoside 7493-95-0 100MG 通用試(shi)劑(ji)

VEGFA Others Rat 大(da)鼠(shu) VEGF164 / VEGFA 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 1 JP-TS cVIcTION FUqL 6474-47-8

中國(guo)倉(cang)鼠(shu)