銀柴(chai)胡探(tan)針法PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)直銷

特(te)點(dian)：
1. 即開即用(yong)，用(yong)戶(hu)只需(xu)要提供(gong)病(bing)毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃保(bao)守(shou)序(xu)列設計(ji)的(de)專(zhuan)壹(yi)性引(yin)物，與(yu)相關(guan)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。
3. 靈(ling)敏(min)度(du)可(ke)以(yi)達(da)到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝(bei)/反應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式熒光(guang)定(ding)量 PCR 檢測，避(bi)免後續(xu)汙(wu)染。
5. 本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)足夠 50 次(ci) 20μL 反應(ying)體系(xi)的(de)熒光(guang)定(ding)量 PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只(zhi)適(shi)用(yong)於(yu)科(ke)研(yan)，不(bu)能用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)：
壹、樣品采集：
1、食品(pin)樣品：樣(yang)品的(de)采集與(yu)預培養按照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采集與(yu)預培養按照(zhao)《食品(pin)衛生微(wei)生物學檢驗(yan)阪崎(qi)腸桿菌(jun)檢驗(yan)要求進行(xing)。
2、血液(ye)樣品：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器抽(chou)取受(shou)檢(jian)者靜脈血2mL，註入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉)抗凝(ning)管(guan)，立(li)即混(hun)勻。
3、糞便(bian)樣品(pin)：取(qu)糞便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌(jun)的(de)收集管(guan)中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部位(wei)樣(yang)品：取發(fa)病部位(wei)新(xin)鮮(xian)滲(shen)出物、粘(zhan)液(ye)膿血送(song)檢。
壹(yi)、稀(xi)釋(shi) PCR 陽(yang)性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這 6 個 10 倍稀(xi)釋(shi)度為(wei)例(li)）
1. 註意(yi)：由(you)於(yu)標(biao)準品(pin)濃度非常高，因此(ci)下列(lie)稀(xi)釋(shi)操作(zuo)壹(yi)定(ding)要在獨(du)立(li)的(de)區(qu)域(yu)進行(xing)，千(qian)萬不(bu)能汙(wu)染樣(yang)品或(huo)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)其(qi)他成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加產(chan)品穩(wen)定(ding)性和避(bi)免擴散傳(chuan)染(ran)性病(bing)原(yuan)，本(ben)產(chan)品不(bu)提供(gong)活(huo)體樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性對照(zhao)，只(zhi)提供(gong)可(ke)以(yi)直接(jie)使(shi)用(yong)的(de) DNA段(duan)作(zuo)為(wei)陽(yang)性對照(zhao)。
2. 標(biao)記 6 個離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)分(fen)別(bie)加入 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀(xi)釋(shi)液（用(yong)帶(dai)芯槍頭(tou)，下同）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
5. 換槍頭(tou)，在 6 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)(上(shang)步(bu)稀(xi)釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
6. 換槍頭(tou)，在 5 號(hao)管(guan)中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)到(dao) 5 號(hao)管(guan)中(zhong)，充分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
7. 重(zhong)復(fu)上(shang)面的(de)操作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋(shi)度的(de)陽(yang)性對照(zhao)。放(fang)冰(bing)上(shang)待(dai)用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述(shu)樣品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過(guo)增(zeng)菌(jun)後，收集培(pei)養物用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)。 
二、DNA提取：
可(ke)采用(yong)PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配備的(de)DNA抽(chou)提液，按以(yi)下說(shuo)明(ming)進行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗(cu)提。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉生(sheng)物科(ke)技(ji)有限公司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取試(shi)劑(ji)盒(he)(過柱法-熒光(guang)配(pei)套)或其(qi)他合(he)適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化產(chan)品，並(bing)按(an)照(zhao)相應(ying)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)進行(xing)操作(zuo)。
1、液體(ti)培(pei)養(yang)物：取(qu)液(ye)體培(pei)養物100μL加到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，8000rpm離心(xin)3min，盡量吸(xi)棄上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體(ti)培養物：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min，取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞便(bian)樣品(pin)：挑(tiao)取米(mi)粒大小糞便(bian)於滅菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，加入0.5mL生(sheng)理鹽水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，13000rpm離心3分(fen)鐘(zhong)，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其(qi)他液(ye)體標(biao)本(ben)：取標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心(xin)3min，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽(chou)提液充分(fen)混(hun)勻，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心(xin)3min取上(shang)清5μL進行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對照(zhao)和陰(yin)性對照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽(chou)提好的(de)核(he)酸(suan)(無(wu)需(xu)提取)，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加入到反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)即可(ke)。由於(yu)陽(yang)性對照(zhao)濃(nong)度(du)較(jiao)高，建議(yi)在樣(yang)品(pin)制備區域(yu)加入陽(yang)性對照(zhao)。 
實驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要求分(fen)別(bie)在試(shi)劑(ji)準備區、樣(yang)本(ben)處(chu)理區和PCR擴增(zeng)區進行(xing)操作(zuo)，各(ge)區(qu)實驗(yan)服(fu)、儀(yi)器 、耗材(cai)應(ying)獨(du)立(li)使(shi)用(yong)，不(bu)能混(hun)用(yong)；實驗(yan)用(yong)吸(xi)頭(tou)采用(yong)帶(dai)濾芯吸(xi)頭(tou)；樣本(ben)處(chu)理區應(ying)配有生物安(an)全(quan)櫃，樣(yang)本(ben)處(chu)理在生物安(an)全(quan)櫃中(zhong)進行(xing)操作(zuo)；三個區(qu)應(ying)該配有紫外線殺菌(jun)裝置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免RNA降解，樣(yang)本(ben)處(chu)理過程應(ying)在0-4℃條件下操作(zuo)，且完成(cheng)實驗(yan)後立(li)即上(shang)機檢(jian)測(ce)；樣(yang)本(ben)處(chu)理過程中(zhong)使(shi)用(yong)的(de)器具(ju)耗材(cai)應(ying)經(jing)過(guo)無(wu)核(he)酶處(chu)理。
3. 每次(ci)實驗(yan)應(ying)該設置(zhi)陰(yin)、陽(yang)性對照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)該在常溫下充分(fen)融化混(hun)勻，並應(ying)瞬時(shi)離(li)心(xin)。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內所(suo)配陰(yin)性和陽(yang)性對照(zhao)在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)全部轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準備區，並(bing)單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為防(fang)止熒光(guang)幹(gan)擾(rao)，應(ying)避(bi)免裸手直接接觸(chu)PCR反應(ying)管(guan)，並(bing)應(ying)避(bi)免在PCR反(fan)應(ying)管(guan)上(shang)進行(xing)任(ren)何標(biao)記。
7. 儀(yi)器 擴增(zeng)相關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相關(guan)要求進行(xing)設(she)置(zhi)；不(bu)同批號(hao)試(shi)劑(ji)不(bu)能混(hun)用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量PCR儀(yi)參(can)數(shu)設置(zhi)中(zhong)不(bu)選ROX校(xiao)正，淬(cui)滅基因選擇None。
9. 實驗(yan)過程(cheng)中(zhong)產(chan)品的(de)廢棄物應(ying)該進行(xing)無(wu)害化處(chu)理後方(fang)可(ke)丟棄。
儲(chu)存(cun)條件：
14℃或－20℃樣品(pin)收集、處(chu)理及保存(cun)方(fang)法(fa)
1. 血清：使(shi)用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和內毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong)避(bi)免任何(he)細胞刺(ci)激(ji)，收集血液(ye)後，3000 轉(zhuan)離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血清和紅細胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地分(fen)離(li)。
2. 血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬酸(suan)鹽或肝(gan)素(su)抗凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
3. 細胞上(shang)清液(ye)：3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆(ke)粒和聚(ju)合物。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織加入適(shi)量生(sheng)理鹽水搗(dao)碎。3000 轉(zhuan)離心10 分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清。
5. 保存(cun)：如(ru)果(guo)樣本(ben)收集後(hou)不(bu)及時(shi)檢(jian)測，請(qing)按(an)壹(yi)次(ci)用(yong)量分(fen)裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反復(fu)凍融，在室溫(wen)下解凍並確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均勻地充分(fen)解凍。
TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 麗(li)春紅2R(BS)Ponceau 2R質量規(gui)格：BS

人腎(shen)小(xiao)球內皮(pi)細胞HRGEC孟加拉玫(mei)瑰紅(hong),酸性紅(hong)94Rose bengal質(zhi)量規(gui)格：AR

HA Others H10N9 甲型(xing)流(liu)感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 偶(ou)氮(dan)熒光(guang)桃(tao)紅(hong),酸(suan)性紅(hong)1Azophloxine質(zhi)量規(gui)格：BS

大鼠小腸血管(guan)內皮(pi)細胞*培(pei)養(yang)基 100mL曙紅Y,醇(chun)溶劑(ji)紅(hong) 43Eosin Y ,alcohol solution質量規(gui)格：AR

Raji人Butt's瘤細胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS曙紅BEosin B質量規(gui)格：BS
EB病毒(du)轉化(hua)的(de)人B細胞;KMY0903 新(xin)生(sheng)兒表(biao)皮角(jiao)化(hua)細胞*培(pei)養(yang)基 100mLC12E10，10%溶液(ye)質(zhi)量規(gui)格：BRC12E10

成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞培(pei)養(yang)基FM-acfC12E9, 10%溶液(ye)質(zhi)量規(gui)格：BRC12E9

Spike Others MERS-CoV 中(zhong)東呼吸(xi)綜合(he)征(zheng) MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀(zhuang)病毒(du)-昆蟲(chong)細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖(tang)苷(gan)(>98%,BR)質量規(gui)格：>98%,BRMagenta-Gal

雙位(wei)點(dian)HC-kit受(shou)體(ti)細胞株(zhu);DMF7檸(ning)檬酸(suan)鎂九水(>98%,BR)質量規(gui)格：>98%,BRMagnesium  nahydrate

大鼠胚胎心(xin)肌(ji)細胞;H9c2(2-1) 膠質瘤(liu)細胞，SHG-44細胞 W6/32細胞，小(xiao)鼠B細胞雜(za)交(jiao)瘤(liu)細胞十(shi)二(er)烷(wan)基*(分(fen)子(zi)生物學)質量規(gui)格：>85%,分(fen)子(zi)生物學級(ji)Magnesium dodecyl sulfate
FGF9 Protein Canine 重(zhong)組(zu)狗(gou) FGF9 / FGF-9 蛋(dan)白 (Fc 標(biao)簽)*葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)酸Propofol Glucuronide質(zhi)量規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(kou)

A3(人T細胞白血病(bing)細胞) 5×106cells/瓶×2 癌(ai)組(zu)織源(yuan)性原(yuan)代(dai)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)/1ml4-羥基(ji)*4-Hydroxy Propofol質量規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(kou)

人滑膜(mo)細胞cDNAHS cDNA2,2-二甲基(ji)-4-異(yi)丙基(ji)-1,3-苯並(bing)二(er)茂2,2-Dimethyl-4-isopropyl-1,3-benzodioxole質量規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(kou)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) 4-羥基(ji)*4-O-β-D-葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)酸4-Hydroxy Propofol 4-O-β-D-Glucuronide質(zhi)量規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(kou)

人內臟(zang)脂肪細胞*培(pei)養(yang)基 100mL4-羥基(ji)*1-O-β-D-葡萄(tao)糖(tang)苷(gan)酸4-Hydroxy Propofol 1-O-β-D-Glucuronide質(zhi)量規(gui)格：美(mei)國(guo)進口(kou)
銀柴(chai)胡探(tan)針法PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)直銷小(xiao)梁網細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(fang)(1ml)*10克(ke)

MCF7B細胞，人癌(ai)細胞 人癌(ai)Tamoxifen耐(nai)藥株(zhu),LCC2細胞 脂肪細胞生(sheng)長(chang)添加物PAGS2,3-二溴 2,3-DibroMopyridinq 13234-89-9

水牛(niu)皮(pi)膚成(cheng)纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞;WB-S4羥高(gao)鐵(tie)血紅(hong)素(su)50毫克(ke)

IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性對照(zhao)) SCHAEDLER瓊脂25克(ke)RT

卵巢上(shang)皮(pi)細胞培(pei)養(yang)基OEpiCM-prf94-96-22