通草(cao)PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)

特(te)點：
1. 即(ji)開(kai)即(ji)用，用戶只(zhi)需(xu)要提(ti)供(gong)病(bing)毒樣品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃保守序(xu)列(lie)設(she)計(ji)的(de)專(zhuan)壹性(xing)引(yin)物，與相(xiang)關病(bing)毒無(wu)交叉(cha)反應(ying)。
3. 靈敏度(du)可以達到幾(ji)百(bai)拷(kao)貝(bei)/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒光(guang)定量 PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後(hou)續汙染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)足(zu)夠(gou) 50 次(ci) 20μL 反(fan)應(ying)體系(xi)的(de)熒光(guang)定量 PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於(yu)科(ke)研，不能(neng)用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使用方(fang)法：
壹(yi)、樣品(pin)采集(ji)：
1、食(shi)品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的采集(ji)與預培(pei)養(yang)按照(zhao)樣品(pin)的采集(ji)與預培(pei)養(yang)按照(zhao)《食品(pin)衛(wei)生微生物學(xue)檢(jian)驗(yan)阪崎(qi)腸桿(gan)菌(jun)檢(jian)驗(yan)要求(qiu)進(jin)行。
2、血(xue)液(ye)樣品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射(she)器(qi)抽取(qu)受(shou)檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬酸鈉)抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即(ji)混勻(yun)。
3、糞便(bian)樣品(pin)：取(qu)糞便(bian)置於(yu)滅菌的收集(ji)管(guan)中(zhong)送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發(fa)病(bing)部位(wei)新鮮滲出物(wu)、粘液(ye)膿(nong)血送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋(shi)度(du)為例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由於(yu)標(biao)準品(pin)濃度(du)非常(chang)高，因此下列(lie)稀(xi)釋操(cao)作(zuo)壹定要在獨立(li)的區(qu)域(yu)進(jin)行，千(qian)萬(wan)不能(neng)汙染(ran)樣品(pin)或本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)其他(ta)成分(fen)）。為增(zeng)加產(chan)品(pin)穩定性和避(bi)免(mian)擴散(san)傳(chuan)染性(xing)病(bing)原(yuan)，本產(chan)品(pin)不提(ti)供(gong)活體樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供(gong)可以直(zhi)接(jie)使用的(de) DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離(li)心管(guan)，分(fen)別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分(fen)別加入(ru) 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在 7 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
5. 換槍頭，在 6 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋(shi)所(suo)得)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
6. 換槍頭，在 5 號(hao)管(guan)中加入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)到 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
7. 重(zhong)復(fu)上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直到得到 6 個(ge)稀(xi)釋度(du)的陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待(dai)用。
註(zhu)：上(shang)述樣品(pin)建(jian)議(yi)經(jing)過增(zeng)菌(jun)後(hou)，收集(ji)培(pei)養(yang)物用於(yu)檢(jian)測。 
二(er)、DNA提(ti)取(qu)：
可采用PCR試(shi)劑(ji)盒(he)配備的DNA抽提(ti)液(ye)，按以下說明(ming)進(jin)行DNA核酸(suan)的(de)粗提。也可采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉生物科(ke)技有限公司(si)生產(chan)的(de)DNA提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(過(guo)柱(zhu)法-熒(ying)光(guang)配套(tao))或(huo)其他(ta)合適(shi)的(de)商(shang)業化(hua)產(chan)品(pin)，並(bing)按照(zhao)相(xiang)應試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)進(jin)行操(cao)作(zuo)。
1、液(ye)體培(pei)養(yang)物：取(qu)液(ye)體培(pei)養(yang)物100μL加到1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量吸棄上清，加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
2、固(gu)體培(pei)養(yang)物：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
3、糞便(bian)樣品(pin)：挑取(qu)米粒(li)大(da)小糞便(bian)於(yu)滅菌離(li)心管(guan)中(zhong)，加入(ru)0.5mL生理鹽水，振(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘，棄上清，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
4、其他(ta)液(ye)體標(biao)本：取(qu)標(biao)本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱中加入(ru)50μL DNA抽提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行PCR反(fan)應(ying)。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性(xing)對照(zhao)為已(yi)經(jing)抽提(ti)好的(de)核酸(suan)(無(wu)需(xu)提取(qu))，直(zhi)接(jie)取(qu)5μL加入(ru)到反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)即(ji)可。由於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃度(du)較高(gao)，建(jian)議(yi)在樣品(pin)制備(bei)區(qu)域(yu)加入(ru)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
實(shi)驗(yan)流程：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測過程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)要求(qiu)分(fen)別在試(shi)劑(ji)準備區(qu)、樣本(ben)處理區(qu)和(he)PCR擴增(zeng)區(qu)進(jin)行操(cao)作(zuo)，各區(qu)實(shi)驗(yan)服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材(cai)應獨(du)立(li)使用，不能(neng)混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸頭采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣本(ben)處理區(qu)應(ying)配有生物安(an)全櫃(gui)，樣本(ben)處理在生物安(an)全櫃(gui)中進(jin)行操(cao)作(zuo)；三個區(qu)應(ying)該(gai)配有紫外(wai)線(xian)殺(sha)菌裝置。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降(jiang)解，樣本(ben)處理過程(cheng)應(ying)在0-4℃條(tiao)件(jian)下操(cao)作(zuo)，且完成實驗(yan)後(hou)立(li)即(ji)上機檢(jian)測；樣本(ben)處理過程(cheng)中(zhong)使用的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應經(jing)過無(wu)核酶(mei)處(chu)理。
3. 每(mei)次(ci)實驗(yan)應該(gai)設(she)置陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)有試(shi)劑(ji)在使用前(qian)應(ying)該(gai)在常(chang)溫(wen)下充(chong)分(fen)融化混勻(yun)，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離(li)心。
5. 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)所(suo)配陰性(xing)和陽(yang)性對照(zhao)在壹次(ci)使用前(qian)應(ying)全部轉(zhuan)移(yi)至(zhi)標(biao)本準(zhun)備(bei)區(qu)，並(bing)單獨(du)存(cun)放。
6. 為(wei)防止熒(ying)光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸(luo)手直(zhi)接(jie)接觸(chu)PCR反(fan)應(ying)管，並(bing)應(ying)避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應(ying)管上(shang)進(jin)行任(ren)何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀器(qi) 擴增(zeng)相(xiang)關參數應按照(zhao)本說明(ming)書(shu)相(xiang)關要求(qiu)進(jin)行設(she)置；不同(tong)批號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒(ying)光(guang)定量PCR儀參數設(she)置中(zhong)不選(xuan)ROX校正，淬(cui)滅基因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗(yan)過程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的廢(fei)棄物應該(gai)進(jin)行無(wu)害化處理後(hou)方可丟棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收集(ji)、處(chu)理(li)及(ji)保存(cun)方法
1. 血(xue)清：使用不含(han)熱(re)原(yuan)和內(nei)毒(du)素的試(shi)管，操(cao)作(zuo)過程中避(bi)免(mian)任(ren)何(he)細胞刺(ci)激，收集(ji)血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘將(jiang)血清和(he)紅細胞(bao)迅速小心地分(fen)離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬酸鹽或肝素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉(zhuan)離(li)心30 分(fen)鐘取(qu)上清。
3. 細(xi)胞(bao)上清液(ye)：3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘去除顆粒和(he)聚(ju)合(he)物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適(shi)量生理鹽水搗(dao)碎(sui)。3000 轉(zhuan)離(li)心10 分(fen)鐘取(qu)上清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果(guo)樣本(ben)收集(ji)後(hou)不及(ji)時檢(jian)測，請(qing)按壹(yi)次用量分(fen)裝，凍存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)，在室(shi)溫(wen)下解凍(dong)並(bing)確(que)保樣品(pin)均勻(yun)地(di)充(chong)分(fen)解凍(dong)。
SW626(人卵(luan)巢癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2去(qu)甲(jia)異波(bo)爾定（標(biao)準品(pin)）risoboldine質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)

HAoEC-c 人主動脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞(HAoEC) 500,000cells 腦(nao)成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)去(qu)氫二(er)異(標(biao)準品(pin))Dehydrodiisoeugel質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)

腎動脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)去(qu)氫鉤藤(teng)堿(jian)（標(biao)準品(pin)）Coryxeine質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)

MUC1 Others Human 人 Mucin-1 / MUC-1 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 去(qu)氫木香(xiang)內(nei)酯(zhi)（標(biao)準品(pin)）Dehydrocostus Lactone質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)

OK 負(fu)鼠(shu)腎細胞(bao)染料木苷（標(biao)準品(pin)）Genistin質(zhi)量規格：HPLC≥98%，標(biao)準品(pin)
VEGFC Protein Rat 重(zhong)組大(da)鼠(shu) VEGFC / VEGF-C 蛋(dan)白(bai) (aa 108-223, Fc 標(biao)簽)撲(pu)草(cao)凈Prometryn質(zhi)量規格：>95%,BR

大(da)鼠(shu)海(hai)馬(ma)趾(zhi)星(xing)形(xing)膠質(zhi)細(xi)胞(bao)(RAh)(5×105) ACHN, 人腎細胞(bao)腺癌(ai)細胞(bao) Human蘿(luo)蔔(bu)硫素(su)；萊菔硫烷(wan)(標(biao)準品(pin))Sulforaphane質(zhi)量規格：HPLC≥95%,標(biao)準品(pin)

猴脈(mai)絡(luo)膜-視(shi)網(wang)膜(內(nei)皮(pi))細(xi)胞(bao);RF/6A3-甲(jia)基(ji)菲(>98.0%(GC))3-Methylphenanthrene質(zhi)量規格：>98.0%(GC)

9. 腎臟細胞系統(tong)3-溴-1,10-鄰(lin)二(er)氮(dan)雜(za)菲(fei)(>98.0%(HPLC)(T))3-Bromo-1,10-phenanthroline質(zhi)量規格：>98.0%(HPLC)(T)

CL-0219ST(豬細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×25-氯(lv)-1,10-菲(fei)咯(ge)啉(>98.0%(T))5-Chloro-1,10-phenanthroline質(zhi)量規格：>98.0%(T)
OCM-1A細(xi)胞(bao)，人低(di)侵(qin)襲性(xing)脈(mai)絡(luo)膜色素素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao) 綠(lv)色(se)木黴 小(xiao)鼠(shu)樹突狀(zhuang)細(xi)胞肉瘤(liu)細(xi)胞(bao);DCS2-氨(an)基(ji)環乙(yi)醇質(zhi)量規格：>98%,日(ri)本(ben)*2-Amicyclohexal 

CCL28 Protein Human 重(zhong)組人 CCL28 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽)Y-27632.2HCl質(zhi)量規格：>98%,ROCK1(p160ROCK) 選(xuan)擇(ze)性抑(yi)制劑(ji)Y27632

LM/TK(小(xiao)鼠(shu)胸腺(xian)激(ji)酶(mei)缺(que)陷(xian)細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 靈芝酸A(標(biao)準品(pin))質(zhi)量規格：HPLC≥95%，標(biao)準品(pin)Gaderic acid A

豬腎細胞(bao);PK(15)蝙(bian)蝠(fu)葛蘇(su)林(lin)堿(jian)(標(biao)準品(pin))質(zhi)量規格：≥96%，標(biao)準品(pin)Daurisoline

TGFB1 Others Rat 大(da)鼠(shu) TGF-beta 1 / TGFB1 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 硒(xi)吩(fen)(>98.0%(GC))質(zhi)量規格：>98.0%(GC)Selephene
通草(cao)PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) BENZAMIDINExy7CHLORIDE芐(bian)脒,HCl蛋(dan)白(bai)組學(xue)級100G1670-14-0COLD

人胚(pei)肺(fei)成纖維(wei)細胞(bao);MRC-52-錄(lu)-5-肖(xiao)基(ji)本(ben)加醋 2-Chloro-5-nitbqnzoic ccid 216-96-3

PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsigen A 人細(xi)胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) SSPEBUFFERTAETSSSPE 緩沖液(ye),蛋(dan)白(bai)組學(xue)級100 TAETSR