生(sheng)姜(jiang)探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)直銷(xiao)

儲(chu)存條件(jian)：
14℃或(huo)－20℃樣品(pin)收(shou)集(ji)、處理及保存方法(fa)
1. 血(xue)清：使(shi)用不(bu)含(han)熱(re)原(yuan)和內毒(du)素(su)的(de)試(shi)管，操作過(guo)程(cheng)中(zhong)避免任(ren)何(he)細(xi)胞刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液(ye)後(hou)，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘將血清和紅細(xi)胞迅速小心地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素抗凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘取上清。
3. 細(xi)胞上清液(ye)：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿：將組(zu)織(zhi)加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗碎。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘取上清。
5. 保(bao)存：如(ru)果樣本(ben)收(shou)集(ji)後(hou)不(bu)及時檢測(ce)，請(qing)按(an)壹次(ci)用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍存於-20℃，避免反(fan)復(fu)凍融，在(zai)室(shi)溫下解凍並確(que)保樣品(pin)均(jun)勻(yun)地(di)充分(fen)解凍。

特點：
1. 即開即用，用戶(hu)只需(xu)要提(ti)供病毒(du)樣品(pin)。
2. 根據地(di)黃保(bao)守序列(lie)設計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引(yin)物(wu)，與相(xiang)關(guan)病毒(du)無(wu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以(yi)達到(dao)幾(ji)百拷(kao)貝/反(fan)應。
4. 壹(yi)管式(shi)熒光(guang)定量(liang) PCR 檢(jian)測(ce)，避免後(hou)續汙染(ran)。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的(de)熒光(guang)定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於科(ke)研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣品(pin)采集(ji)：
1、食品(pin)樣品(pin)：樣品(pin)的(de)采集(ji)與預培(pei)養(yang)按(an)照樣品(pin)的(de)采集(ji)與預培(pei)養(yang)按(an)照《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物(wu)學檢(jian)驗阪崎(qi)腸(chang)桿菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求進行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射器(qi)抽(chou)取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜脈(mai)血2mL，註(zhu)入(ru)無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉)抗凝(ning)管(guan)，立(li)即混勻。
3、糞(fen)便樣品(pin)：取(qu)糞(fen)便置(zhi)於滅(mie)菌(jun)的(de)收(shou)集(ji)管中送檢(jian)。
4、病竈部(bu)位樣品(pin)：取(qu)發(fa)病部(bu)位新(xin)鮮滲出物(wu)、粘液(ye)膿血送檢(jian)。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性(xing)對(dui)照（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個 10 倍(bei)稀(xi)釋度(du)為(wei)例(li)）
1. 註(zhu)意：由於標準品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常高，因(yin)此下列(lie)稀釋(shi)操作壹(yi)定(ding)要(yao)在(zai)獨立(li)的(de)區(qu)域(yu)進行(xing)，千(qian)萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染(ran)樣品(pin)或(huo)本(ben)試(shi)劑盒(he)的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分）。為(wei)增(zeng)加(jia)產(chan)品(pin)穩(wen)定(ding)性(xing)和避免擴(kuo)散傳(chuan)染性(xing)病原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣品(pin)做(zuo)陽(yang)性(xing)對(dui)照，只(zhi)提(ti)供可(ke)以(yi)直接使(shi)用的(de) DNA段(duan)作為(wei)陽(yang)性(xing)對(dui)照。
2. 標記(ji) 6 個離(li)心管(guan)，分別為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)分別加(jia)入(ru) 45 μL 熒光(guang) PCR 模(mo)板稀(xi)釋(shi)液(ye)（用帶(dai)芯(xin)槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待用。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(上步(bu)稀釋(shi)所得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待用。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照到(dao) 5 號(hao)管中(zhong)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待用。
7. 重(zhong)復上面(mian)的(de)操作直到得(de)到 6 個稀(xi)釋(shi)度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照。放冰(bing)上待用。
註(zhu)：上述(shu)樣品(pin)建(jian)議經過(guo)增(zeng)菌(jun)後(hou)，收(shou)集(ji)培養物(wu)用於檢測(ce)。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采用PCR試(shi)劑盒(he)配(pei)備(bei)的(de)DNA抽(chou)提液(ye)，按(an)以(yi)下說明進(jin)行(xing)DNA核酸(suan)的(de)粗(cu)提。也(ye)可(ke)采購(gou)上海澤(ze)葉生(sheng)物(wu)科(ke)技有(you)限(xian)公(gong)司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒光(guang)配(pei)套)或(huo)其(qi)他合適的(de)商(shang)業化產(chan)品(pin)，並(bing)按(an)照相(xiang)應(ying)試(shi)劑盒(he)說明進(jin)行(xing)操作。
1、液(ye)體培養物(wu)：取液(ye)體培養物(wu)100μL加(jia)到(dao)1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸棄上清，加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
2、固體培(pei)養物(wu)：挑取(qu)單克隆菌(jun)落(luo)與(yu)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣品(pin)：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒(li)大(da)小(xiao)糞(fen)便於滅(mie)菌(jun)離(li)心管(guan)中，加(jia)入(ru)0.5mL生(sheng)理(li)鹽(yan)水，振蕩混(hun)勻(yun)，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘，棄上清，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
4、其(qi)他液(ye)體標本：取標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上清，沈澱中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混勻(yun)，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性(xing)對(dui)照和陰性(xing)對(dui)照為(wei)已(yi)經抽(chou)提(ti)好(hao)的(de)核酸(suan)(無(wu)需(xu)提取(qu))，直接取(qu)5μL加(jia)入(ru)到(dao)反(fan)應體系(xi)中(zhong)即可(ke)。由於陽(yang)性(xing)對(dui)照濃(nong)度(du)較高，建(jian)議在(zai)樣品(pin)制(zhi)備(bei)區(qu)域(yu)加(jia)入(ru)陽(yang)性(xing)對(dui)照。 
HBEGF Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) HBEGF / D 蛋白雙(亞(ya)甲基(ji)二(er)硫代(dai))四(si)硫富(fu)瓦(wa)1[有(you)機(ji)電(dian)子材料(liao)]Bis(methylenedithio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhi)量規格(ge)：

TE-13(人(ren)食管癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 心肌(ji)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)雙(三(san)亞甲基(ji)二(er)硫代(dai))四(si)硫富(fu)瓦(wa)1[有(you)機(ji)電(dian)子材料(liao)]Bis(trimethylenedithio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhi)量規格(ge)：>97.0%(HPLC)

小(xiao)鼠垂體瘤細(xi)胞;GT1-1四(si)硫富(fu)瓦(wa)1(>98.0%(GC))Tetrathiafulvalene質(zhi)量規格(ge)：>98.0%(GC)

人(ren)表皮微血管(guan)內(nei)皮細(xi)胞(HDMEC)( 5×105 )四(si)(甲硫代(dai))四(si)硫富(fu)瓦(wa)1[有(you)機(ji)電(dian)子材料(liao)]Tetrakis(methylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhi)量規格(ge)：>98.0%(T)

Raji，人(ren)Butt's瘤(liu)細(xi)胞四(si)(十八(ba)烷基(ji)硫代(dai))四(si)硫富(fu)瓦(wa)1[有(you)機(ji)電(dian)子材料(liao)]Tetrakis(octadecylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]質(zhi)量規格(ge)：>98.0%(T)
ANGPTL5 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) ANGPTL5 蛋白 (GST 標簽)山梨(li)酸(suan)Sorbic acid質(zhi)量規格(ge)：AR,99%

Li-7(人(ren)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 SARS Spike S1 Subunit 桿(gan)狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) DL-丙(bing)氨酰-DL-正(zheng)DL-Alanyl-DL-norvaline質(zhi)量規格(ge)：0.99

牛腎(shen)細(xi)胞;MDBK3-(1-萘(nai)基(ji))-L-3-(1-Naphthyl)-L-alanine質(zhi)量規格(ge)：>98%,BR

LILRB2 Others Human 人(ren) LILRB2 / ILT4 / LIR-2 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) Fmoc-3-(2-萘(nai)基(ji)）-D-Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine質(zhi)量規格(ge)：0.98

腎(shen)系(xi)膜細(xi)胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)L-瓜(gua)氨酸(suan)L-Citrulline 質(zhi)量規格(ge)：>99%,BR
U-2 OS, 人(ren)骨肉(rou)瘤細(xi)胞羥(qiang)基(ji)-d8質(zhi)量規格(ge)：美(mei)國(guo)進口(kou)Hydroxy Itraconazole-d8

人(ren)骨肉(rou)瘤細(xi)胞;HOS 大(da)鼠支氣管成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mL丁(ding)基(ji)質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口(kou)Butyl Itraconazole

原(yuan)代(dai)骨骼(ge)肌(ji)細(xi)胞培(pei)養特制(zhi)添加(jia)劑Many types of cells包裝(zhuang)：5/2.5/1ml丙(bing)基(ji)質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口(kou)Propyl Itraconazole

EPHA3 Others Rat 大(da)鼠 EphA3 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 異丙基(ji)質(zhi)量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口(kou)Isopropyl Itraconazole

敘(xu)利亞(ya)倉鼠腎(shen)細(xi)胞;BHK-21噴(pen)托維(wei)林(lin)質量(liang)規格(ge)：美(mei)國(guo)進口(kou)Carbetapentane
生(sheng)姜(jiang)探針(zhen)法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑盒(he)直銷(xiao)人(ren)間充質(zhi)幹細(xi)胞-脂(zhi)肪RNAHMSC-ad miRNA5 μg2′-脫(tuo)氧胸(xiong)苷(gan)25克(ke)

大(da)鼠小神經膠(jiao)質細(xi)胞(RM)(5×105)-2.5-二(er)羧(suo)醋97% 2,5-Thiophqnqdiccrboxylic ccid 48-31-9

非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞;CV-1正(zheng)嶙酸(suan)鐵二(er)水物(wu)25克(ke)

KM小(xiao)鼠腦神(shen)經膠(jiao)質母細(xi)胞瘤(liu)瘤株;G422 小(xiao)鼠膀胱(guang)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞*培(pei)養基(ji) 100mL偏(pian)硼酸(suan)鈉shēng huà shì jì容(rong)量(liang)：500克(ke)

細(xi)胞名(ming)稱 種屬(shu)60-23-1半胱(guang)胺;巰;2-;硫代(dai);2-基(ji)乙(yi)CysteaMine;Decarboxy
實驗流(liu)程(cheng)：
1. 整個檢(jian)測(ce)過程(cheng)應(ying)嚴格(ge)按(an)照本(ben)說明書(shu)要(yao)求分別在(zai)試(shi)劑準備(bei)區(qu)、樣本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操作，各(ge)區(qu)實驗服(fu)、儀器(qi) 、耗(hao)材應獨立(li)使(shi)用，不(bu)能(neng)混(hun)用；實驗用吸(xi)頭(tou)采用帶(dai)濾(lv)芯(xin)吸頭；樣本(ben)處(chu)理區(qu)應(ying)配(pei)有(you)生(sheng)物(wu)安全櫃，樣本(ben)處(chu)理在(zai)生(sheng)物(wu)安全櫃中(zhong)進(jin)行(xing)操作；三(san)個區(qu)應(ying)該(gai)配(pei)有(you)紫(zi)外(wai)線(xian)殺菌(jun)裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為(wei)避免RNA降(jiang)解，樣本(ben)處(chu)理過程(cheng)應(ying)在(zai)0-4℃條件(jian)下操作，且(qie)完成(cheng)實驗後(hou)立(li)即上機(ji)檢測(ce)；樣本(ben)處(chu)理過程(cheng)中(zhong)使(shi)用的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材應經過(guo)無(wu)核酶(mei)處(chu)理(li)。

3. 每次(ci)實驗應(ying)該(gai)設置(zhi)陰、陽(yang)性(xing)對(dui)照。
4. 試(shi)劑盒(he)所(suo)有(you)試(shi)劑在(zai)使(shi)用前(qian)應該(gai)在(zai)常溫下充分(fen)融化混勻(yun)，並應(ying)瞬時(shi)離(li)心。
5. 試(shi)劑盒(he)內(nei)所配(pei)陰性(xing)和陽(yang)性(xing)對(dui)照在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用前(qian)應全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標本準備(bei)區(qu)，並(bing)單獨存放。
6. 為(wei)防止(zhi)熒光(guang)幹擾(rao)，應(ying)避免裸(luo)手(shou)直接接(jie)觸PCR反(fan)應管(guan)，並應避免在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上進(jin)行(xing)任何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數(shu)應(ying)按(an)照本(ben)說明書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求進行(xing)設置(zhi)；不(bu)同(tong)批號試(shi)劑不(bu)能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)參數(shu)設置(zhi)中不(bu)選ROX校(xiao)正，淬滅(mie)基(ji)因(yin)選擇(ze)None。
9. 實驗過(guo)程(cheng)中(zhong)產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄物(wu)應該(gai)進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處理(li)後(hou)方(fang)可(ke)丟棄。