茵陳染料法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒保存

特點(dian)：
1. 即開即用，用戶(hu)只(zhi)需要(yao)提(ti)供(gong)病(bing)毒(du)樣(yang)品(pin)。
2. 根(gen)據(ju)地黃保(bao)守(shou)序列(lie)設(she)計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引物，與(yu)相(xiang)關(guan)病毒(du)無(wu)交叉(cha)反(fan)應。
3. 靈敏度可以(yi)達(da)到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹(yi)管(guan)式熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免後續汙染。
5. 本(ben)試(shi)劑(ji)盒足夠(gou) 50 次 20μL 反應體(ti)系的(de)熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品(pin)只(zhi)適(shi)用於科研(yan)，不(bu)能(neng)用於臨床診斷。

使(shi)用方(fang)法(fa)：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采(cai)集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與預(yu)培(pei)養按(an)照(zhao)《食品(pin)衛生(sheng)微生(sheng)物(wu)學檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸桿菌(jun)檢(jian)驗要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液樣(yang)品(pin)：用無(wu)菌(jun)註(zhu)射器抽取受檢(jian)者靜(jing)脈血(xue)2mL，註入無菌(jun)EDTA2Na(或檸檬酸鈉(na))抗凝管(guan)，立即(ji)混勻。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：取糞便(bian)置(zhi)於滅菌(jun)的(de)收(shou)集管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病竈(zao)部位樣(yang)品(pin)：取發病部位新(xin)鮮(xian)滲出物(wu)、粘液膿血(xue)送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀釋(shi) PCR 陽(yang)性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋(shi)度為例(li)）
1. 註意：由(you)於標準(zhun)品(pin)濃(nong)度非(fei)常高(gao)，因此(ci)下(xia)列(lie)稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定要在(zai)獨(du)立(li)的(de)區(qu)域(yu)進(jin)行(xing)，千(qian)萬不(bu)能(neng)汙染樣(yang)品(pin)或本(ben)試(shi)劑(ji)盒的(de)其(qi)他(ta)成分）。為增(zeng)加產(chan)品(pin)穩定性(xing)和避(bi)免擴(kuo)散(san)傳染性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品(pin)不(bu)提(ti)供(gong)活(huo)體(ti)樣(yang)品(pin)做陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供(gong)可(ke)以直(zhi)接使(shi)用的(de) DNA段作(zuo)為陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標記 6 個(ge)離(li)心管(guan)，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶(dai)芯槍頭分別(bie)加(jia)入 45 μL 熒光 PCR 模(mo)板稀釋(shi)液（用帶(dai)芯槍頭，下(xia)同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換槍頭，在(zai) 6 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)(上(shang)步(bu)稀釋(shi)所得(de))，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換槍頭，在(zai) 5 號管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中，充(chong)分震(zhen)蕩(dang) 1 分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重復上(shang)面的(de)操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋(shi)度的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
註：上(shang)述樣(yang)品(pin)建(jian)議經(jing)過(guo)增(zeng)菌(jun)後(hou)，收(shou)集培養物用於檢(jian)測。 
二、DNA提(ti)取：
可采(cai)用PCR試(shi)劑(ji)盒配(pei)備(bei)的(de)DNA抽提(ti)液，按(an)以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)DNA核酸的(de)粗(cu)提(ti)。也(ye)可采(cai)購上(shang)海澤葉生(sheng)物(wu)科(ke)技(ji)有限(xian)公司生(sheng)產(chan)的(de)DNA提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(過柱法-熒光配(pei)套)或其他(ta)合適(shi)的(de)商(shang)業(ye)化(hua)產品(pin)，並(bing)按(an)照(zhao)相應試(shi)劑(ji)盒說明(ming)進(jin)行(xing)操作(zuo)。
1、液體(ti)培養物：取液體(ti)培養物100μL加到(dao)1.5mL無菌(jun)離(li)心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡(jin)量(liang)吸(xi)棄上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
2、固體(ti)培養物：挑取單克隆菌(jun)落與(yu)50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min，取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
3、糞便(bian)樣(yang)品(pin)：挑取米粒(li)大(da)小(xiao)糞便(bian)於滅菌(jun)離(li)心管(guan)中，加(jia)入0.5mL生(sheng)理鹽(yan)水(shui)，振蕩(dang)混勻，13000rpm離(li)心3分鐘(zhong)，棄上(shang)清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
4、其他(ta)液體(ti)標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄上(shang)清，沈澱中加(jia)入50μL DNA抽提(ti)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，100℃恒溫(wen)10min，13000rpm離(li)心3min取上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反應。
註：陽(yang)性(xing)對照(zhao)和陰性(xing)對照(zhao)為已(yi)經抽提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(suan)(無需提(ti)取)，直(zhi)接取5μL加入到(dao)反應體(ti)系中(zhong)即可(ke)。由(you)於陽(yang)性(xing)對照(zhao)濃(nong)度較(jiao)高(gao)，建(jian)議在(zai)樣(yang)品(pin)制備(bei)區域(yu)加(jia)入陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
實驗流(liu)程(cheng)：
1. 整個(ge)檢(jian)測過(guo)程應嚴(yan)格按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準備(bei)區、樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區進(jin)行(xing)操作(zuo)，各區(qu)實驗服、儀器(qi) 、耗材應獨立使(shi)用，不(bu)能(neng)混(hun)用；實(shi)驗(yan)用吸(xi)頭采(cai)用帶(dai)濾芯吸(xi)頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)應配(pei)有生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)，樣(yang)本(ben)處(chu)理在(zai)生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)櫃(gui)中進(jin)行(xing)操作(zuo)；三個(ge)區(qu)應該配(pei)有紫(zi)外(wai)線(xian)殺(sha)菌(jun)裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解，樣(yang)本(ben)處(chu)理過(guo)程(cheng)應在(zai)0-4℃條件下(xia)操(cao)作(zuo)，且完(wan)成(cheng)實(shi)驗(yan)後(hou)立即上(shang)機檢(jian)測；樣(yang)本(ben)處(chu)理過(guo)程(cheng)中使(shi)用的(de)器(qi)具(ju)耗(hao)材(cai)應經過無核(he)酶(mei)處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
4. 試(shi)劑(ji)盒所有試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用前(qian)應該在(zai)常溫(wen)下(xia)充(chong)分融化(hua)混勻(yun)，並(bing)應瞬時離(li)心。
5. 試(shi)劑(ji)盒內所配(pei)陰性(xing)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用前(qian)應全部轉移(yi)至標(biao)本(ben)準(zhun)備(bei)區，並(bing)單(dan)獨(du)存(cun)放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒光幹擾，應避(bi)免裸手直(zhi)接接(jie)觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避(bi)免在(zai)PCR反應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任何標記。
7. 儀器(qi) 擴(kuo)增(zeng)相關(guan)參數(shu)應按(an)照(zhao)本(ben)說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要求(qiu)進(jin)行(xing)設置(zhi)；不(bu)同(tong)批(pi)號試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混(hun)用。
8. ABI系列(lie)熒(ying)光定量(liang)PCR儀參數(shu)設置(zhi)中不(bu)選ROX校正，淬滅基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實驗過程中產(chan)品(pin)的(de)廢(fei)棄物(wu)應該進(jin)行(xing)無害化(hua)處理後(hou)方(fang)可丟(diu)棄。
儲存條件：
14℃或－20℃樣(yang)品(pin)收(shou)集、處理及(ji)保(bao)存方(fang)法
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不(bu)含熱(re)原(yuan)和內毒(du)素的(de)試(shi)管(guan)，操作(zuo)過程(cheng)中避(bi)免任何細胞刺(ci)激(ji)，收(shou)集血(xue)液後，3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅細(xi)胞迅(xun)速(su)小(xiao)心地(di)分離(li)。
2. 血(xue)漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或肝(gan)素抗凝。3000 轉離(li)心30 分鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細胞上(shang)清液：3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)去除顆(ke)粒(li)和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織(zhi)勻漿：將(jiang)組(zu)織(zhi)加入適(shi)量(liang)生(sheng)理鹽(yan)水(shui)搗碎。3000 轉離(li)心10 分鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保存：如果樣(yang)本(ben)收(shou)集後不(bu)及時(shi)檢(jian)測，請(qing)按(an)壹(yi)次(ci)用量(liang)分裝，凍(dong)存於-20℃，避(bi)免反復凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均勻(yun)地充(chong)分解(jie)凍(dong)。
小(xiao)氣道(dao)上(shang)皮細(xi)胞生(sheng)長(chang)添(tian)加(jia)物(wu)SAEpiCGS脫水(shui)長春堿(jian)（標準(zhun)品(pin)）Anhydrovinblastine質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥95%，標準品(pin)

MIF Others Human 人 MIF / GLIF 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 長春新(xin)堿（標(biao)準品(pin)）Vincristine質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品(pin)

CRFK 貓腎上(shang)皮細(xi)胞硫酸金(jin)雀(que)花堿；硫酸司巴(ba)丁（標(biao)準品(pin)）Sparteine sulfate質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥98%，標準品(pin)

T-111B木瓜(gua)蛋白酶(mei)(含100mL酶(mei)解緩(huan)沖液)10mL高烏甲素（標準品(pin)）Lappaconitine質(zhi)量(liang)規格：滴(di)定法≥98%，標準品(pin)

HET-1A, 人食管(guan)上(shang)皮細(xi)胞番茄(qie)紅素（標準品(pin)）Lycopene質(zhi)量(liang)規格：HPLC≥90%,標準品(pin),充(chong)氮氣保(bao)護
腦靜脈血(xue)管(guan)平滑(hua)肌細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(1ml)N-叔(shu)丁氧(yang)羰(tang)基(ji)-L-BOC-L-Mine質(zhi)量(liang)規格：>98%,BR

RBP4 Others Canine 狗(gou) RBP4 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) BOC-L-N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine質(zhi)量(liang)規格：>99%,BR

大鼠(shu)心肌(ji)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞*培養基 100mLBOC-L-苯(ben)Boc-L-phenylalanine質(zhi)量(liang)規格：>98.5%,BR

35.1雜交瘤(liu)細(xi)胞(bao)抗(kang)CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSBOC-Boc-Glycine質(zhi)量(liang)規格：>98%,BR

IFNA5 Protein Mouse 重組(zu)小(xiao)鼠(shu) IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標簽)BOC-L-異(yi)Boc-Ile-OH質(zhi)量(liang)規格：>98.5%,BR
TIGIT Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) TIGIT / VSTM3 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 氯尼達(da)明(ming)質(zhi)量(liang)規格：>99%,BRLonidamine

小(xiao)鼠(shu)腎動(dong)脈內(nei)皮(pi)細胞(bao)*培養基 100mL洛匹那(na)韋質(zhi)量(liang)規格：>99%Lopinavir

WEHI-231小(xiao)鼠(shu)B細胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethal環孢(bao)菌(jun)素,A,A（標準品(pin)）質(zhi)量(liang)規格：HPLC>98%,標準品(pin)Cyclosporine A

IL23 Protein Mouse 重組(zu)小(xiao)鼠(shu) IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白質(zhi)量(liang)規格：>99%,BRTiclopidine HCl

T/G HA-VSMC(人血(xue)管(guan)平滑(hua)肌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 B16(小(xiao)鼠(shu)色(se)素瘤(liu)細(xi)胞(bao))（標準品(pin)）質(zhi)量(liang)規格：HPLC>98%,標準品(pin)Ticlopidine HCl
茵陳染料法PCR鑒定試(shi)劑(ji)盒保存NRK-49F 大鼠(shu)正常腎(shen)成纖(xian)維(wei)細(xi)胞地塞米環(huan)氧水(shui)解物(wu)質(zhi)量(liang)規格：>98%8DM

水(shui)牛皮(pi)膚(fu)成纖(xian)維(wei)樣(yang)細胞(bao);WB-S4甲基(ji)潑(po)尼(ni)質(zhi)量(liang)規格：>98%,BRMeprednisone

HEC-1A, 人內膜(mo)癌(ai)細(xi)胞系甲基(ji)潑(po)尼(ni)(標準品(pin))質(zhi)量(liang)規格：>98%,標準品(pin)Meprednisone

人腦瘤(liu)細(xi)胞(bao);SF126 大鼠(shu)胰腺(xian)導(dao)管(guan)上(shang)皮細(xi)胞*培養基 100mL阿(e)普斯特;CC10004質(zhi)量(liang)規格：>98%,PDE4和TNF-α抑制劑(ji)Apremilast;CC-10004

食管(guan)上(shang)皮細(xi)胞Many types of cells包(bao)裝：5 ×