明(ming)黨(dang)參(can)探(tan)針(zhen)法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)

實(shi)驗流程(cheng)：
1. 整(zheng)個(ge)檢(jian)測過(guo)程(cheng)應(ying)嚴(yan)格(ge)按照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求分(fen)別(bie)在試(shi)劑(ji)準(zhun)備區(qu)、樣本(ben)處(chu)理區(qu)和PCR擴(kuo)增(zeng)區(qu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)，各區(qu)實(shi)驗服、儀器 、耗材應獨(du)立使(shi)用，不能混(hun)用；實(shi)驗用吸頭采(cai)用帶濾芯(xin)吸頭；樣(yang)本(ben)處(chu)理區(qu)應配(pei)有生物安全櫃，樣本(ben)處(chu)理在(zai)生物安全櫃中進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區(qu)應該(gai)配(pei)有紫外線(xian)殺菌裝(zhuang)置(zhi)。
2. 為(wei)避(bi)免(mian)RNA降解，樣本(ben)處(chu)理過(guo)程應(ying)在(zai)0-4℃條件下(xia)操(cao)作(zuo)，且(qie)完成(cheng)實(shi)驗後(hou)立即上機檢(jian)測；樣(yang)本(ben)處(chu)理過(guo)程中(zhong)使(shi)用的(de)器具(ju)耗材應經(jing)過無(wu)核酶處(chu)理。
3. 每次實(shi)驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰、陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
4. 試劑盒所(suo)有試劑在使(shi)用前(qian)應該(gai)在常溫(wen)下(xia)充(chong)分(fen)融化混(hun)勻，並(bing)應(ying)瞬(shun)時離(li)心。
5. 試劑盒內(nei)所配(pei)陰性(xing)和陽(yang)性(xing)對照(zhao)在壹(yi)次(ci)使(shi)用前(qian)應全部(bu)轉移(yi)至(zhi)標(biao)本(ben)準(zhun)備區(qu)，並(bing)單(dan)獨(du)存放(fang)。
6. 為(wei)防(fang)止熒光幹擾(rao)，應(ying)避(bi)免(mian)裸手(shou)直接(jie)接(jie)觸PCR反(fan)應(ying)管，並(bing)應(ying)避(bi)免(mian)在PCR反(fan)應(ying)管上(shang)進(jin)行(xing)任何(he)標(biao)記(ji)。
7. 儀器 擴(kuo)增(zeng)相(xiang)關參(can)數(shu)應(ying)按照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關要(yao)求進(jin)行(xing)設置(zhi)；不(bu)同批(pi)號(hao)試(shi)劑(ji)不能(neng)混(hun)用。
8. ABI系(xi)列熒光定量(liang)PCR儀參(can)數(shu)設(she)置(zhi)中(zhong)不選ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因選擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程(cheng)中(zhong)產(chan)品的(de)廢棄物應(ying)該進(jin)行(xing)無害化(hua)處(chu)理後(hou)方(fang)可丟棄。

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特點：
1. 即開即用，用戶只(zhi)需要(yao)提供病(bing)毒(du)樣品。
2. 根據(ju)地(di)黃保守序(xu)列設計的(de)專(zhuan)壹(yi)性(xing)引物，與相(xiang)關病(bing)毒(du)無交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。
3. 靈敏度(du)可以達(da)到(dao)幾(ji)百拷(kao)貝/反(fan)應(ying)。
4. 壹(yi)管式熒(ying)光定量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免(mian)後(hou)續(xu)汙染。
5. 本試劑盒(he)足夠(gou) 50 次 20μL 反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)的(de)熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品只(zhi)適用於科研，不(bu)能用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷。
使(shi)用方(fang)法：
壹(yi)、樣(yang)品(pin)采(cai)集：
1、食品(pin)樣(yang)品(pin)：樣品的(de)采(cai)集與預培養按照樣(yang)品(pin)的(de)采(cai)集與預培養按照《食品(pin)衛(wei)生(sheng)微生(sheng)物學(xue)檢(jian)驗阪(ban)崎(qi)腸(chang)桿菌檢(jian)驗要(yao)求進(jin)行(xing)。
2、血液樣品(pin)：用無菌註(zhu)射(she)器抽(chou)取(qu)受檢(jian)者(zhe)靜(jing)脈血(xue)2mL，註入無(wu)菌EDTA2Na(或(huo)檸檬酸鈉)抗凝(ning)管，立即混(hun)勻。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品(pin)：取(qu)糞(fen)便(bian)置(zhi)於(yu)滅菌的(de)收(shou)集管中(zhong)送檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部位樣品：取(qu)發病(bing)部(bu)位新鮮滲出(chu)物、粘(zhan)液膿血送(song)檢(jian)。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性(xing)對照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍稀(xi)釋度(du)為(wei)例(li)）
1. 註意：由(you)於(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)非(fei)常高，因此下(xia)列稀(xi)釋操(cao)作(zuo)壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立的(de)區(qu)域進(jin)行(xing)，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙染(ran)樣(yang)品或(huo)本(ben)試劑盒的(de)其(qi)他(ta)成(cheng)分(fen)）。為(wei)增(zeng)加產(chan)品穩(wen)定性(xing)和避(bi)免(mian)擴(kuo)散(san)傳(chuan)染性(xing)病(bing)原，本(ben)產(chan)品不(bu)提供活(huo)體(ti)樣品做陽(yang)性(xing)對照(zhao)，只(zhi)提供可(ke)以直接(jie)使(shi)用的(de) DNA段作(zuo)為(wei)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。
2. 標(biao)記(ji) 6 個(ge)離心管，分(fen)別(bie)為(wei) 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭分(fen)別(bie)加入 45 μL 熒光 PCR 模板(ban)稀(xi)釋液（用帶芯槍(qiang)頭，下(xia)同）。
4. 在 7 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用。
5. 換(huan)槍(qiang)頭，在(zai) 6 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)(上步(bu)稀(xi)釋所得(de))，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用。
6. 換(huan)槍(qiang)頭，在(zai) 5 號(hao)管中(zhong)加入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)到 5 號(hao)管中(zhong)，充(chong)分(fen)震(zhen)蕩(dang) 1 分(fen)鐘，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用。
7. 重復上面(mian)的(de)操(cao)作(zuo)直到得(de)到 6 個(ge)稀(xi)釋度(du)的(de)陽(yang)性(xing)對照(zhao)。放(fang)冰上待(dai)用。
註：上述(shu)樣(yang)品(pin)建(jian)議經(jing)過增(zeng)菌後(hou)，收(shou)集培養物用於檢(jian)測。 
二、DNA提取(qu)：
可采(cai)用PCR試劑盒配(pei)備的(de)DNA抽(chou)提液，按以下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)DNA核酸的(de)粗(cu)提。也可采(cai)購上(shang)海澤(ze)葉生物科技(ji)有限公司(si)生(sheng)產(chan)的(de)DNA提取(qu)試劑(ji)盒(過柱法-熒光配(pei)套(tao))或(huo)其(qi)他合(he)適的(de)商(shang)業化產(chan)品，並(bing)按(an)照(zhao)相(xiang)應試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液體(ti)培養物：取(qu)液體(ti)培養物100μL加到1.5mL無菌離心(xin)管中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量吸棄上(shang)清，加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
2、固體(ti)培養物：挑(tiao)取(qu)單克(ke)隆(long)菌(jun)落(luo)與50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min，取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
3、糞(fen)便(bian)樣(yang)品(pin)：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒(li)大(da)小(xiao)糞(fen)便(bian)於(yu)滅菌離(li)心管中(zhong)，加入0.5mL生理鹽(yan)水，振蕩(dang)混(hun)勻，13000rpm離心3分(fen)鐘，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
4、其他液體(ti)標(biao)本(ben)：取(qu)標(biao)本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄上(shang)清，沈澱中(zhong)加入50μL DNA抽(chou)提液充(chong)分(fen)混(hun)勻，100℃恒(heng)溫(wen)10min，13000rpm離心3min取(qu)上清(qing)5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)。
註：陽(yang)性(xing)對照(zhao)和陰性(xing)對照(zhao)為(wei)已(yi)經(jing)抽(chou)提好的(de)核酸(無需提取(qu))，直接(jie)取(qu)5μL加入到(dao)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中(zhong)即可。由(you)於(yu)陽(yang)性(xing)對照(zhao)濃(nong)度(du)較高，建(jian)議在樣(yang)品制(zhi)備區(qu)域加(jia)入陽(yang)性(xing)對照(zhao)。 
CD5 Others Mouse 小(xiao)鼠 CD5 / LEU1 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 綿馬酸ABA（標(biao)準(zhun)品(pin)）Filixic acid ABA質量規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

人胰(yi)腺導(dao)管癌(ai)細胞;CFPAC-1莫(mo)諾(nuo)苷Morroniside質量規格(ge)：HPLC≥97%，標(biao)準(zhun)品(pin)

ERBB2 Others Mouse 小(xiao)鼠 HER2 / ErbB2 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 牡荊素(標(biao)準(zhun)品(pin))Vitexin質量規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

CoC1(懸浮(fu)) 卵巢(chao)癌(ai)牡荊素葡萄糖苷(標(biao)準(zhun)品(pin))Glucosyl-vitexin質量規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)

MRC-5-EGFP+puro人胚(pei)肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts MEM+10%Hyclone滅活血(xue)清+2ug/ml puromycin牡荊素鼠(shu)李(li)糖苷（標(biao)準(zhun)品(pin)）vitexin-2″-o-rhamside質量規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)
大(da)鼠(shu)小(xiao)腦星形(xing)膠(jiao)質細胞(RAc)(5×105) Ishikawa, 人內膜(mo)癌細(xi)胞系(xi) Human[Tyr34]-甲(jia)狀(zhuang)旁腺激素(7-34) 酰(xian)胺 (牛)[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)質量規格(ge)：>95%,BR

非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞;VERO E6[Trp4]-Kemptide[Trp4]-Kemptide質量規格(ge)：>95%,BR

FIGF Others Mouse 小(xiao)鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) (Z)-4-羥基它(ta)莫(mo)西(xi)芬(fen)(Z)-4-Hydroxytamoxifen質量規格(ge)：美國進(jin)口(kou)

(含10mL酶解(jie)緩(huan)沖(chong)液) 1mL拉寧A2 Teicoplanin A2質量規格(ge)：美國進(jin)口(kou)

CAL 27-EGFP-puro(pLVT7慢病(bing)毒(du)構(gou)建(jian)穩(wen)定株(zhu))人舌(she)鱗(lin)癌細(xi)胞 CAL 27-EGFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcima DMEM+10% FBS+2μg/ml puromycin泰諾(nuo)福韋1酸鹽(yan)Tefovir Phosphate質量規格(ge)：美國進(jin)口(kou)
IL23 Protein Marmoset 重組絨(rong)猴 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白乙(yi)酸銅水合(he)物(>99%，BR)質量規格(ge)：>99%，BRCopper(II) acetate, hydrate

SW 982(人滑膜(mo)肉(rou)瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶×2 A549(人肺腺癌(ai)細胞)1酸肌酸鈉鹽(yan)四(si)水質(zhi)量(liang)規(gui)格：>98%,BRCreatine phosphate

CM-M091小(xiao)鼠成(cheng)骨(gu)細胞*培養基100mL芹(qin)糖甘草(cao)苷(gan)；甘(gan)草(cao)苷(gan)元(yuan)-7-O-D-芹(qin)糖-4’-O-D-葡萄糖苷質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Liquiritin apioside

TNFSF12 Others Cymolgus 食蟹(xie)猴(hou) / 人 TNFSF12 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 芹(qin)糖異(yi)甘(gan)草(cao)苷(gan)；異(yi)甘(gan)草(cao)苷(gan)芹(qin)糖質量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Isoliquiritin apioside

成骨細胞培養基ObM-prf白屈(qu)菜(cai)紅堿(標(biao)準(zhun)品(pin)）質量規格(ge)：HPLC≥98%，標(biao)準(zhun)品(pin)Chelerythrine
明黨參(can)探(tan)針(zhen)法PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)人浸潤(run)性(xing)導(dao)管癌(ai)旁皮(pi)膚(fu)細胞;CCD-1095Sk 人成纖(xian)維(wei)細(xi)胞*培養基 100mL6-羥基質(zhi)量規格(ge)：美(mei)國進(jin)口(kou)6-Hydroxy Chlorzoxazone

輸尿管上(shang)皮(pi)細胞Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105方(fang)(1ml)6-嘌(piao)呤(ling)質(zhi)量(liang)規(gui)格：美國進(jin)口(kou)6-Mercaptopurine

CREB3L1 Others Human 人 CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 7-甲(jia)基-6-嘌(piao)呤(ling)質(zhi)量(liang)規(gui)格：美國進(jin)口(kou)7-Methyl-6-Mercap
儲(chu)存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣品收集、處(chu)理及(ji)保存方(fang)法
1. 血清：使(shi)用不含熱(re)原和內(nei)毒(du)素的(de)試(shi)管，操(cao)作(zuo)過(guo)程中避(bi)免(mian)任何(he)細胞刺激，收集血液後(hou)，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘將(jiang)血清和紅(hong)細(xi)胞迅速(su)小(xiao)心地(di)分(fen)離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽(yan)或(huo)肝素抗凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘取(qu)上清(qing)。
3. 細胞上清(qing)液(ye)：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘去除顆(ke)粒(li)和聚(ju)合(he)物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量(liang)生理鹽(yan)水搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘取(qu)上清(qing)。
5. 保存：如(ru)果樣(yang)本(ben)收集後(hou)不(bu)及(ji)時檢(jian)測，請(qing)按壹(yi)次(ci)用量分(fen)裝(zhuang)，凍存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融，在室溫(wen)下(xia)解凍並(bing)確(que)保樣品(pin)均勻地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍。