白(bai)扁(bian)豆PCR鑒定(ding)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)

特(te)點(dian)：
1. 即(ji)開即(ji)用(yong)，用戶(hu)只(zhi)需(xu)要提(ti)供病(bing)毒(du)樣(yang)品。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃(huang)保(bao)守(shou)序列設(she)計(ji)的(de)專壹(yi)性引物(wu)，與(yu)相(xiang)關(guan)病(bing)毒(du)無(wu)交(jiao)叉反(fan)應。
3. 靈(ling)敏度(du)可(ke)以達到幾(ji)百拷貝/反(fan)應。
4. 壹(yi)管(guan)式(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang) PCR 檢(jian)測，避(bi)免後續汙染。
5. 本(ben)試(shi)劑盒(he)足夠 50 次(ci) 20μL 反(fan)應體(ti)系(xi)的(de)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang) PCR。
6. 本(ben)產(chan)品只(zhi)適用(yong)於(yu)科研(yan)，不(bu)能(neng)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷。

使(shi)用方(fang)法：
壹(yi)、樣(yang)品采(cai)集(ji)：
1、食(shi)品樣(yang)品：樣(yang)品的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)樣(yang)品的(de)采(cai)集與(yu)預(yu)培(pei)養(yang)按(an)照(zhao)《食(shi)品衛(wei)生微(wei)生物(wu)學檢(jian)驗(yan)阪崎(qi)腸桿(gan)菌(jun)檢驗要求進(jin)行(xing)。
2、血液(ye)樣(yang)品：用(yong)無(wu)菌(jun)註射(she)器抽(chou)取(qu)受檢者靜(jing)脈(mai)血2mL，註(zhu)入無(wu)菌(jun)EDTA2Na(或(huo)檸(ning)檬(meng)酸鈉(na))抗(kang)凝(ning)管(guan)，立(li)即(ji)混勻。
3、糞(fen)便樣(yang)品：取(qu)糞(fen)便置於(yu)滅菌的(de)收(shou)集管(guan)中送(song)檢(jian)。
4、病(bing)竈(zao)部位(wei)樣(yang)品：取(qu)發(fa)病(bing)部位(wei)新(xin)鮮滲出(chu)物(wu)、粘液(ye)膿血送檢。
壹(yi)、稀(xi)釋 PCR 陽(yang)性對(dui)照(zhao)（以 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這(zhe) 6 個(ge) 10 倍(bei)稀釋度為例）
1. 註(zhu)意：由(you)於(yu)標準品濃(nong)度非(fei)常高，因(yin)此(ci)下列(lie)稀釋操作壹(yi)定(ding)要在(zai)獨立(li)的(de)區域進(jin)行(xing)，千萬(wan)不(bu)能(neng)汙(wu)染樣(yang)品或(huo)本(ben)試(shi)劑盒(he)的(de)其(qi)他成分(fen)）。為增(zeng)加(jia)產(chan)品穩(wen)定(ding)性和(he)避(bi)免擴散傳染性病(bing)原(yuan)，本(ben)產(chan)品不(bu)提(ti)供活體(ti)樣(yang)品做陽(yang)性對(dui)照(zhao)，只(zhi)提(ti)供可(ke)以直(zhi)接使(shi)用的(de) DNA段(duan)作為陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
2. 標記 6 個(ge)離(li)心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用(yong)帶芯槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加(jia)入 45 μL 熒(ying)光(guang) PCR 模(mo)板(ban)稀釋液(ye)（用帶芯槍(qiang)頭(tou)，下同(tong)）。
4. 在(zai) 7 號(hao)管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
5. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號(hao)管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀(xi)釋所得(de))，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
6. 換(huan)槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號(hao)管(guan)中加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)到 5 號(hao)管(guan)中，充(chong)分(fen)震蕩(dang) 1 分(fen)鐘(zhong)，得 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
7. 重(zhong)復上(shang)面(mian)的(de)操(cao)作直(zhi)到得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋度的(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。放冰(bing)上(shang)待用(yong)。
註(zhu)：上(shang)述(shu)樣(yang)品建(jian)議(yi)經過增(zeng)菌(jun)後，收集(ji)培(pei)養(yang)物(wu)用(yong)於(yu)檢測。 
二(er)、DNA提(ti)取：
可(ke)采用(yong)PCR試(shi)劑盒(he)配備的(de)DNA抽(chou)提(ti)液(ye)，按以下說明(ming)進(jin)行(xing)DNA核(he)酸的(de)粗(cu)提(ti)。也(ye)可(ke)采購(gou)上(shang)海(hai)澤(ze)葉(ye)生物(wu)科技(ji)有(you)限公司生產(chan)的(de)DNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)(過柱法-熒(ying)光(guang)配(pei)套)或(huo)其(qi)他合(he)適的(de)商(shang)業(ye)化產(chan)品，並按照(zhao)相應試(shi)劑盒(he)說明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作。
1、液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物(wu)：取(qu)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)物(wu)100μL加(jia)到1.5mL無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中，8000rpm離(li)心3min，盡量(liang)吸(xi)棄(qi)上(shang)清，加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
2、固體(ti)培(pei)養(yang)物(wu)：挑(tiao)取(qu)單(dan)克隆(long)菌(jun)落與50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min，取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
3、糞(fen)便樣(yang)品：挑(tiao)取(qu)米(mi)粒大小(xiao)糞(fen)便於(yu)滅菌離(li)心管(guan)中，加(jia)入0.5mL生理鹽(yan)水(shui)，振蕩(dang)混勻，13000rpm離(li)心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
4、其(qi)他液(ye)體(ti)標本：取(qu)標本2-3mL，13000rpm離(li)心3min，棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)中加(jia)入50μL DNA抽(chou)提(ti)液(ye)充(chong)分(fen)混勻，100℃恒(heng)溫10min，13000rpm離(li)心3min取(qu)上(shang)清5μL進(jin)行(xing)PCR反(fan)應。
註(zhu)：陽(yang)性對(dui)照(zhao)和陰性對(dui)照(zhao)為已經抽(chou)提(ti)好(hao)的(de)核(he)酸(無(wu)需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接取(qu)5μL加(jia)入到反應體(ti)系(xi)中即(ji)可(ke)。由於(yu)陽(yang)性對(dui)照(zhao)濃(nong)度較(jiao)高，建(jian)議(yi)在(zai)樣(yang)品制(zhi)備(bei)區域加(jia)入陽(yang)性對(dui)照(zhao)。 
實(shi)驗流(liu)程：
1. 整個檢(jian)測過程應嚴格(ge)按照(zhao)本說明(ming)書(shu)要(yao)求分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑準備區、樣(yang)本處(chu)理區和PCR擴增(zeng)區進(jin)行(xing)操(cao)作，各區實驗服(fu)、儀(yi)器(qi) 、耗(hao)材應獨立(li)使(shi)用(yong)，不(bu)能(neng)混用(yong)；實(shi)驗用(yong)吸頭(tou)采(cai)用(yong)帶濾芯(xin)吸頭(tou)；樣(yang)本處(chu)理區應配有(you)生物(wu)安全櫃，樣(yang)本處(chu)理在(zai)生物(wu)安全櫃中進(jin)行(xing)操(cao)作；三個區應該配(pei)有(you)紫(zi)外線殺(sha)菌(jun)裝置。
2. 為避(bi)免RNA降解(jie)，樣(yang)本處(chu)理過程應在(zai)0-4℃條件下操(cao)作，且完成實(shi)驗(yan)後立(li)即(ji)上(shang)機(ji)檢測；樣(yang)本處(chu)理過程中使(shi)用(yong)的(de)器(qi)具(ju)耗材(cai)應經過無(wu)核(he)酶(mei)處(chu)理。
3. 每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)應該設(she)置陰、陽(yang)性對(dui)照(zhao)。
4. 試(shi)劑盒(he)所有(you)試(shi)劑在(zai)使(shi)用前應該在(zai)常溫下充(chong)分(fen)融(rong)化混勻，並應瞬時(shi)離(li)心。
5. 試(shi)劑盒(he)內所配(pei)陰性和(he)陽(yang)性對(dui)照(zhao)在(zai)壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前應全部轉移至(zhi)標本準備區，並單(dan)獨存(cun)放(fang)。
6. 為防止熒光(guang)幹擾，應避(bi)免裸手直(zhi)接接觸(chu)PCR反(fan)應管(guan)，並應避(bi)免在(zai)PCR反(fan)應管(guan)上(shang)進(jin)行(xing)任(ren)何(he)標記。
7. 儀(yi)器(qi) 擴增(zeng)相(xiang)關(guan)參(can)數應按照(zhao)本說明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要(yao)求進(jin)行(xing)設(she)置；不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑不(bu)能(neng)混用(yong)。
8. ABI系(xi)列(lie)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)參(can)數設(she)置中不(bu)選ROX校(xiao)正(zheng)，淬(cui)滅基因(yin)選(xuan)擇(ze)None。
9. 實(shi)驗過程中產(chan)品的(de)廢(fei)棄(qi)物(wu)應該進(jin)行(xing)無(wu)害(hai)化處理後方(fang)可(ke)丟棄(qi)。
儲(chu)存(cun)條件：
14℃或(huo)－20℃樣(yang)品收(shou)集(ji)、處理及(ji)保存(cun)方(fang)法
1. 血清：使(shi)用(yong)不(bu)含熱(re)原(yuan)和(he)內(nei)毒(du)素(su)的(de)試(shi)管(guan)，操作過程中避(bi)免任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺激(ji)，收(shou)集血液(ye)後，3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)將血清和(he)紅細(xi)胞(bao)迅(xun)速小(xiao)心(xin)地(di)分(fen)離(li)。
2. 血漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸鹽(yan)或(huo)肝(gan)素(su)抗(kang)凝(ning)。3000 轉離(li)心30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清液(ye)：3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒和聚合物(wu)。
4. 組(zu)織勻漿(jiang)：將(jiang)組(zu)織加(jia)入適量(liang)生理鹽(yan)水(shui)搗(dao)碎(sui)。3000 轉離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清。
5. 保(bao)存(cun)：如(ru)果(guo)樣(yang)本收(shou)集後不(bu)及(ji)時檢(jian)測，請按(an)壹(yi)次(ci)用(yong)量(liang)分(fen)裝，凍存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免反(fan)復凍融(rong)，在(zai)室(shi)溫下解(jie)凍並確(que)保樣(yang)品均(jun)勻地(di)充(chong)分(fen)解(jie)凍。
LLC-MK2細(xi)胞(bao)，恒河(he)猴腎(shen)細(xi)胞(bao) 人(ren)結腸癌轉基因(yin)細(xi)胞(bao),RKO-E6細(xi)胞(bao) CM-H117人(ren)腦(nao)靜脈(mai)血管(guan)內皮(pi)細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji)100mL山(shan)梨酸鉀(jia)（標準品）Potassium Sorbate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含量(liang)測定(ding)

正(zheng)常大鼠腎(shen)細(xi)胞(bao);NRK甲(jia)磺(huang)酸(suan)倍(bei)他司汀(ting)（標準品）Betahistine mesylate質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含量(liang)測定(ding)

IL13RA1 Others Human 人(ren) IL13Ra1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) （標準品）Glucurolactone質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：檢查(zha)

小(xiao)鼠小(xiao)膠質(zhi)細(xi)胞(bao)MM反(fan)鉑(bo)transplatin 質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>95%

FAM19A2 Others Human 人(ren) FAM19A2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 草(cao)酸（標準品）Oxalic acid質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：含量(liang)測定(ding)
SK-N-SH細(xi)胞(bao)，人(ren)神(shen)經(jing)上(shang)皮瘤(liu)細(xi)胞(bao) 環狀芽孢(bao)桿(gan)菌(jun) 人(ren)前列腺上(shang)皮細(xi)胞(bao)RNAHPEpiC miRNA5 μg氫(qing)氧(yang)化鈣(>95%,BR)Calcium hydroxide質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>95%,BR

SF767(人(ren)腦(nao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2N-甲(jia)酰伐(fa)倫(lun)克林(lin)N-Formyl Varenicline質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)

HCT-15(人(ren)結腸癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人(ren)肺鱗(lin)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 非(fei)洲綠猴腎(shen)細(xi)胞(bao)系(xi)/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4BN-葡(pu)萄(tao)糖苷(gan)伐(fa)倫(lun)克林(lin)Varenicline N-Glucoside質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)

人(ren)鼻咽(yan)癌細(xi)胞(bao);CNE-2Z伐(fa)倫克林(lin)氨(an)基(ji)甲(jia)酰β-D-葡(pu)萄(tao)糖苷(gan)酸(suan)Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)

AGRP Others Mouse 小(xiao)鼠 AGRP / AgRP 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 去(qu)乙(yi)酰(xian)基(ji)長(chang)春瑞濱Deacetyl Vinorelbine質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：美國(guo)進(jin)口(kou)
人(ren)表皮(pi)角(jiao)質細(xi)胞(bao)-cDNAHEK-acDNA6-硫(標準品)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：HPLC>98%,標準品6-TG/Thioguanine

MCF/Adr細(xi)胞(bao)，人(ren)癌耐藥(yao)細(xi)胞(bao)株 團(tuan)頭(tou)魴尾(wei)鰭細(xi)胞(bao),WCF細(xi)胞(bao) 骨(gu)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105方(fang)(1ml)維(wei)A酸(suan);全反(fan)式(shi)維A酸(suan);維(wei)生素(su)A酸(suan);質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%%,USP,BRAll-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

2V6.11(人(ren)胚(pei)腎細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2維(wei)A酸(suan);(標準品)質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>98%,標準品All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin

HCF Pellet 人(ren)類心臟成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)團塊 > 1 mio.cells 人(ren)海(hai)馬(ma)趾星(xing)形(xing)膠質(zhi)細(xi)胞(bao)裂解(jie)物(wu)HA-h L質(zhi)量(liang)規(gui)格(ge)：>99%,BRBicalutamide

CL-0210SiHa(人(ren)頸(jing)鱗(lin)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×26-芐(bian)氨(an)基(ji)嘌呤(ling)質量(liang)規(gui)格(ge)：>99%6-Benzylamino purine
白(bai)扁豆(dou)PCR鑒(jian)定(ding)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)L-6TG細(xi)胞(bao)，肌母細(xi)胞(bao) 人(ren)前列腺癌細(xi)胞(bao),JCA-1細(xi)胞(bao) 人(ren)胚(pei)肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao);MRC-5間(jian)硝(xiao)基本(ben)胺100u

獼猴皮(pi)膚細(xi)胞(bao);MMS4啊利新藍(lan)8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1

ECE2 Others Human 人(ren) ECE-2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) γ-環糊(hu)精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3

人(ren)腎上(shang)皮細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHREpiC NA，英文(wen)名或(huo)英文(wen)縮寫(xie)：potewwium xy7noxide，級(ji)別(bie)：CP，98%，規(gui)格(ge)：100克

小(xiao)鼠少(shao)突膠質(zhi)前體(ti)細(xi)胞(bao)